联合检测CTGF和PAI-1对原发性IgA肾病病情评估价值研究

施颖 沈卫强

联合检测CTGF和PAI-1对原发性IgA肾病病情评估价值研究

施颖 沈卫强

目的 探讨联合检测结缔组织生长因子（CTGF）和纤溶酶原激活物抑制物-1（PAI-1）对原发性IgA肾病（PIgAN）患者病情评估的价值。方法 ELISA法检测50例PIgAN患者（PIgAN患者组）血清CTGF和PAI-1水平，并根据病理Lee氏分级法将PIgAN患者组分为轻度组（Ⅰ～Ⅲ级）和重度组（Ⅳ～Ⅴ级），采用ROC曲线和曲线下面积（AUC）评价CTGF和PAI-1在PIgAN病情评估中的价值。另设年龄、性别相匹配的30例健康体检者作为对照组。结果 PIgAN患者组血清CTGF和PAI-1水平均明显高于对照组（均P＜0.05）。重度组患者血清CTGF和PAI-1水平均明显高于轻度组（均P＜0.05）。血清CTGF和PAI-1单独评估患者病情时，ROC曲线的AUC分别为0.844（95%CI：0.736～0.995，P＜0.05）、0.900（95%CI：0.811～0.988，P＜0.05），而两者联合检测评估病情时，其AUC为0.927（95%CI：0.856～0.998，P＜0.05）。结论 联合检测血清CTGF和PAI-1对PIgAN患者病情评估有较高价值。

原发性IgA肾病 结缔组织生长因子 纤溶酶原激活物抑制物-1 ROC曲线 血液 诊断

【 Key words】 Primary immunoglobulin A nephropathy Connective tissue growth factor Plasminogen activator inhibitor-1 Receiver operating characteristic curve Blood Diagnosis

IgA肾病（IgAN）是指以IgA为主的免疫球蛋白弥漫沉积于肾小球系膜区及毛细血管襻而引起的原发性肾小球病变[1]。目前，对IgAN的诊断和病情评估主要采用经皮肾穿刺组织病理活检，但此为有创性检查，有发生并发症的风险。因此，寻找到创伤小、可重复、能准确评估IgAN患者病情的血清指标临床意义重大。研究表明，结缔组织生长因子（CTGF）和纤溶酶原激活物抑制物-1（PAI-1）在原发性IgAN（PIgAN）患者病情发生、发展中起着重要作用[2-3]。本研究通过检测PIgAN患者血清CTGF和PAI-1水平，探讨两者对PIgAN病情评估的价值，以期为临床诊治提供参考。

1 对象和方法

1.1 对象 选取2014年6月至2015年6月本院肾内科新发PIgAN患者50例（PIgAN患者组），均行经皮肾穿刺组织病理活检确诊。排除标准：（1）3个月内使用过细胞毒药物、糖皮质激素等免疫抑制剂；（2）其他疾病引起的继发性IgAN患者；（3）近期有严重感染、严重心肺脑疾病、恶性肿瘤、非甾体类抗炎药应用史患者；（4）穿刺组织标本肾小球数＜6个的PIgAN患者；（5）表现为急性肾功能不全的PIgAN患者。PIgAN患者组中男29例，女21例；年龄20～56（36.72±10.07）岁。另择同期健康体检者30例作为对照组，其中男17例，女13例；年龄21～57（37.28±9.84）岁。PIgAN患者组与对照组性别、年龄比较均无统计学差异（均P＞0.05）。本研究获患者和家属知情同意并签署知情同意书。

1.2 检测方法 PIgAN患者组于入院时采集晨起空腹外周静脉血5ml，对照组于体检时采集空腹外周静脉血5ml。两组标本离心20min（3 000r/min）静置，收集上层血清，保存于-80℃低温冰箱待检测。血清CTGF和PAI-1水平测定采用ELISA法。Human CTGF ELISA试剂盒购自上海酶联生物科技有限公司，Human PAI-1ELISA试剂盒购自上海西唐生物科技有限公司，具体操作严格按照说明书进行；误差控制在10%以内，重复2次，取平均值。

1.3 病情评估 采用病理Lee氏分级法[4]进行PIgAN患者组病情评估。（1）Ⅰ级：大多肾小球正常，偶尔轻度系膜增宽(节段)伴/不伴细胞增生，无肾小管和间质损害；（2）Ⅱ级：肾小球示局灶系膜增生和硬化（＜50%），罕见小新月体，无肾小管和间质损害；（3）Ⅲ级：弥漫肾小球系膜增生和增宽（偶尔局灶节段），偶有粘连和小新月体，偶有局灶间质水肿和细胞浸润，罕见肾小管萎缩；（4）Ⅳ级：重度弥漫系膜增生和硬化，部分或全部肾小球硬化，＜45%的肾小球有新月体，有明显的肾小管萎缩和间质浸润；（5）Ⅴ级：与Ⅳ级相似，但更严重，＞45%的肾小球有新月体。将病理Lee氏分级Ⅰ～Ⅲ级作为轻度组，Ⅳ～Ⅴ级作为重度组。

1.4 统计学处理 应用SPSS18.0统计软件；计量资料以表示，两组间比较采用t检验；以PIgAN病情分级为状态变量（Ⅳ～Ⅴ级为阳性，Ⅰ～Ⅲ级为阴性），血清CTGF和PAI-1水平为检验变量，绘制ROC曲线并计算曲线下面积（AUC）。

2 结果

2.1 PIgAN患者组与对照组血清CTGF和PAI-1水平比较 见表1。

表1 PIgAN患者组与对照组血清CTGF和PAI-1水平比较

由表1可见，PIgAN患者组血清CTGF和PAI-1水平均明显高于对照组，两组比较差异均有统计学意义（均P＜0.05）。

2.2 PIgAN患者组中轻度组和重度组患者血清CTGF和PAI-1水平比较 PIgAN患者组中轻度组患者31例（62.00%），重度组患者19例（38.00%）；轻度组和重度组患者血清CTGF和PAI-1水平比较见表2。

表2 轻度组和重度组患者血清CTGF和PAI-1水平比较

由表2可见，重度组患者血清CTGF和PAI-1水平均明显高于轻度组，两组比较差异均有统计学意义（均P＜0.05）。

2.3 血清CTGF和PAI-1水平对PIgAN病情评估的ROC曲线 见图1。

图1 血清CTGF和PAI-1水平对PIgAN病情评估的ROC曲线

由图1可见，单独以血清CTGF水平评估PIgAN病情的ROC曲线AUC为0.844（95%CI：0.736～0.995，P＜0.05）；单独以血清PAI-1水平评估PIgAN病情的ROC曲线AUC为0.900（95%CI：0.811～0.988，P＜0.05）；联合检测血清CTGF和PAI-1水平评估PIgAN病情的ROC曲线AUC为0.927（95%CI：0.856～0.998，P＜0.05）。

3 讨论

IgAN是最常见的原发性肾小球肾炎，约20%～30%的患者在确诊后20～25年内不可逆地进展为终末期肾病。尽管目前对PIgAN的诊治水平有了较大提高，但其确诊仍依赖于肾穿刺组织病理活检。如能从血清中寻找到创伤小、敏感、便捷、可重复、能准确评估PIgAN患者病情的指标，将有利于早期诊断、指导治疗及预测预后。目前认为细胞外基质积聚IgA，导致肾间质纤维化和肾小球硬化在PIgAN的发生和发展中有重要影响。

CTGF是于1991年在培养的人脐静脉内皮细胞中分离出来的细胞因子，在人体许多组织均有表达，尤以肾脏含量为最高。CTGF具有调控细胞增殖、分化，促进细胞黏附、增生和细胞外基质合成等作用。Nonaka等[5]研究发现CTGF在肾小管中的表达水平与肾小管损伤的程度密切相关。转化生长因子-β（TGF-β）是目前发现的最强促肾脏纤维化因子[6]，陶少平等[7]研究证实，CTGF可在TGF-β诱导下参与成纤维细胞或肾小管上皮细胞细胞外基质的合成，最终导致间质纤维化的发生。

PAI-1是一种丝氨酸蛋白水解酶抑制剂，其活性的改变能够调节细胞外基质的积聚与降解[8]。周文华等[9]通过动物实验发现，PAI-1表达水平上调可使肾小球内纤维蛋白沉积，抑制系膜细胞基质的降解。Grandaliano等[10]亦证实在IgAN患者中PAI-1表达增高，PAI-1可促进IgAN患者肾小管间质纤维化，参与IgAN的发生。本研究结果显示，PIgAN患者的血清CTGF和PAI-1水平均明显高于对照组，重度组均明显高于轻度组，结合文献分析表明，CTGF和PAI-1在PIgAN的发生和发展中起重要作用。

同时，本研究通过ROC曲线对CTGF和PAI-1对PIgAN患者病情评估的价值进行研究。结果表明，CTGF和PAI-1均可单独评估PIgAN病情，而联合检测CTGF和PAI-1对病情评估价值更大。因此本研究认为，在PIgAN患者中联合检测血清CTGF和PAI-1水平，有助于判断及预测患者病情，对指导临床治疗决策有一定意义。

[1] Tatematsu M,Yasuda Y,Morita Y,et al.Complete remission within 2 years predicts a good prognosis after methylprednisolone pulse therapy in patients with IgA nephropathy[J].Clin Exp Nephrol, 2012,16(6):883-891.

[2] 张丽英,梦雅平.CTGF在IgA肾病肾组织中的表达与临床病理关系[J].中国中西医结合肾病杂志,2012,13(1):67-69．

[3] 丁瑞,陈香美,刘述文,等.PAI-1基因4C4G基因型与IgA肾病易感性及临床表现的关系[J].中华医学遗传学杂志,2006,23(4):449-451．

[4] 茹凉,张欣,朱洪涛,等.IgA肾病患儿血管紧张素Ⅱ变化的临床意义[J].临床儿科杂志,2014,32(8):736-739.

[5] Nonaka TakahashiS,Fujita T,TakahashiT,et al.TGF‐beta 1 and CTGF mRNAs are correlated with urinary protein level inIgA nephropathy[J].J Nephrol,2008,21(1):53-63.

[6] KalliakmaniP,Nakopoulou L,Tsakas S,et al.Urinary interleukin-6 (IL-6)and transforming growth factor(TGF-β)levels incorticosteroidtreated patients with IgAnephropathy[J].Clin Nephrol,2011, 76(2):144-150.

[7] 陶少平,陈学峰,孙艳,等.黄芪注射液对糖尿病肾病患者血转化生长因子原-β1及Ⅳ型胶原水平的影响及其意义[J].中国中西医结合肾病杂志,2006,7(3):156-157.

[8] 张艳辉,王慧,杜宇,等.纤溶酶原激活物抑制物-1基因4G/5G多态性与内蒙古汉族人群IgA肾病患者病理特点的相关性研究[J].包头医学院学报,2010,26(2):8-11.

[9] 周文华,孔丽丽,贾冶,等.GSK3β抑制剂对糖尿病肾病大鼠肾组织TGF-β1和血清PAI-1表达的影响[J].中国实验诊断,2013,17(4): 634-638．

[10] Grandaliano G,Pontrellip,Cerullo G,et al.Protease activated receptor 2 expression in IgA nephropathy:a potential role in the pathogenesis of interstitial fibrosis[J].J Am Soc Nephrol,2003, 14(8):2072-2083.

Clinical value of serum CTGF and PAI-1 in patients with primary immunoglobulin A nephropathy

SHI Ying,SHEN Weiqiang. Department of Urology,Deqing People's Hospital,Huzhou 313200,China

Objective To investigate serum connective tissue growth factor(CTGF)and plasminogen activator inhibitor-1 (PAI-1)levels in patients with primary immunoglobulin A nephropathy(PIgAN). Methods The serum CTGF and PAI-1 levels were assayed by using ELISA in 50 patients with PIgAN and 30 health subjects(control group).According to the Lee's pathological grading,the cases were divided into mild group and severe group.The receiver operating characteristic(ROC) curve was used to analyze prognostic values of serum CTGF and PAI-1 levels for PIgAN patients. Results The serum levels of CTGF and PAI-1 in patients with PIgAN were higher than those in control group (both P＜0.05).Compared with the mild group, the serum levels of CTGF and PAI-1 in severe group were increased significantly (all P＜0.05).ROC curve showed the AUC of CTGF and PAI-1 was 0.844(95%CI:0.736～0.995,P＜0.05)and 0.900(95%CI:0.811～0.988,P＜0.05)respectively;whereas the AUC of combined CTGF and PAI-1 was 0.927(95%CI:0.856～0.998,P＜0.05).Conclusion The combination of serum CTGF and PAI-1 levels may improve the evaluation of disease severity for patients with PIgAN.

2016-01-06）

（本文编辑：李媚）

313200 德清县人民医院内四科

施颖，E-mail：yyt1982@sina.com