逍遥散治疗首发抑郁症的疗效与5-羟色胺2A受体基因多态性的关联研究

陈健华 葛鑫宇 黄俊东 伍远菲 朱志敏

广州市脑科医院中医科（广州 510370）

逍遥散治疗首发抑郁症的疗效与5-羟色胺2A受体基因多态性的关联研究

陈健华 葛鑫宇 黄俊东 伍远菲 朱志敏

广州市脑科医院中医科（广州 510370）

目的 探讨逍遥散治疗首发抑郁症的疗效与5-HT2A受体基因多态性的关联。方法 采用病例对照研究方法，以120例首发抑郁症患者（研究组）和120例正常人（对照组）为研究对象，研究组予逍遥散治疗，疗程8周。于治疗前后采用汉密顿抑郁量表评定。采用高温连接酶检测反应法（LDR）检测5-HT2A受体基因，分析其与抗抑郁药物疗效的关系。结果 5-HT2A受体基因（T102C）T/C基因型、C/C基因型频率及等位基因频率与对照组相比差异无统计学意义（P＞0.05）。不同基因型的疗效无差异（P＞0.05）。结论 5-HT2A受体基因（T102C）多态性与逍遥散治疗抑郁症的疗效无关联。

5-HT2A受体 抑郁症 逍遥散

抑郁症具有高发病、高复发、高致残和高自杀率等特点，抑郁症的生物学基础是中枢神经系统突触间隙单胺类神经递质水平或功能下降，这是抑郁症研究中最经典的假说。中医认为抑郁症多为情志不舒，气机郁滞所致，故应以疏肝理气，调节情志予以辨证施治。5-羟色胺2A（5-HT2A）受体基因多态性与抑郁症发病及抗抑郁治疗的关系是目前研究热点之一，但均是针对西药的研究［1-5］，国内、外未见关于中药与基因组学的研究。逍遥散是治疗抑郁症常见中药治疗方剂。本研究就逍遥散治疗抑郁症疗效及与5-HT2A相关性进行研究，为抑郁症的研究提供理论依据。

1 资料与方法

1.1 研究对象 患者主要来源于本院2013年10月—2014年10月门诊及住院患者。所有受试者均被提前告知研究目的。并签署知情同意书，该研究获得本院伦理委员会的批准。均为汉族人群。

研究组:入组标准:①符合美国DSM-1V中抑郁症的诊断标准，首次发作，既往没有躁狂发作、混合发作或轻躁狂发作；②17项汉密尔顿抑郁量表（HAMD）评分≥18分；③首次发病年龄≥18岁；④入组前两周无使用抗抑郁及抗精神病药物。排除标准:①合并脑器质性及严重躯体疾病、精神障碍（如精神发育迟滞、物质依赖等）；②妊娠、哺乳期妇女。终止试验标准:①不能坚持治疗者；②有严重的自杀倾向者。对照组:120例，来源于本院职工、进修医护人员及实习学生，与研究组无血缘关系。

1.2 方法

1.2.1 一般资料收集 采用一般情况问卷收集所有受试者的人口学资料和临床资料。

1.2.2 DNA提取 入组当天抽取5mL静脉血。采用EDTA抗凝，于-20℃冰箱保存。采用DNA提取试剂盒经柱分离法提取DNA。

1.2.3 基因多态性检测 采用PCR扩增5-HT2A受体基因片段，T102C多态性引物:上游为5′-TCTGCTACAAGTTCTGGCTT-3′，下游为5′-CTGCAGCTTTTTCTCTAGGG-3′。反应体积为50μl。其中两个引物各为0.2μmol，1μ Taq酶和1 ×缓冲液，0.2mmol/L dNTPs，100 ng基因组DNA，PCR操作程序依次为94℃ 2min，（94℃ 60s，64℃ 60s，72℃30s）30个循环，72℃ 10min。

取PCR产物5μl，加入1μlMSPI内切酶，37℃消化过夜，次日加0.5 mol/Ly乙二胺四乙酸钠终止反应。采用2%琼脂糖凝胶电泳分离酶切产物片段，采用银染色法，用凝胶成像系统检查并摄影。

1.2.4 疗效评定 ①对符合条件的抑郁症患者给予逍遥散汤剂治疗。给药方法:病例组应用逍遥散治疗，方剂:柴胡25 g、当归10 g、白芍20 g、茯苓20 g、白术15 g、酸枣仁20 g、远志20 g、郁金15 g、香附15 g、炙甘草10 g。每日1付，早晚分服，观察2个月。②治疗前和治疗8周后均给予HAMD17项版评定。③疗效判定标准为:无效（HAMD减分率＜50%）和有效（HAMD减分率≥50%）。减分率=（基线总分—治疗8周末总分）/基线总分×100%。④由两名具有精神科主治医师以上职称者进行诊断入组与量表评定。

1.3 统计学分析 采用SPSS 17.0统计软件进行方差分析及卡方检验。两组基因型、等位基因频率检验采用卡方检验。成组计量资料采用方差分析。P＜0.05为差异有统计学意义。按照Hardy-Weinberg平衡定律分别计算各组等位基因频率，并作吻合度检验。

2 结 果

2.1 一般资料 收集研究组和对照组各120例，其中研究组男56例，女64例，年龄18～54岁，平均年龄（30.50 +9.82）岁。对照组男58例，女62例；年龄18～59岁，平均年龄（29.65+11.18）岁。两组年龄（F=0.82）、性别（χ2=0.067）差异无统计学意义（均P＞0.05）。

2.2 两组基因型分布 两组的期望值与观察值比较，研究组P＞0.05，对照组P＞0.05。见表1。两组基因型分布均符合Hardy-Weinberg定律。说明本研究所选取的研究组来自大的群体，无人口迁移等干扰群体特征因素，样本具有群体代表性。

2.3 研究组不同基因型之间疗效差异 有效组与无效组比较，不同基因型的疗效无统计学意义（P＞0.05），见表2。

表1 研究组和对照组基因型及等位基因频率的比较

表2 研究组不同基因型之间疗效差异

3 讨 论

5-HT2A受体基因和抑郁症关系是近年的研究热点之一，但是各研究结果显示的并不一致。正电子发射断层扫描术显示，抗抑郁药可降低抑郁症患者脑内5-HT2A受体的密度［6］，说明5-HT2A受体与抑郁症密切相关。研究认为5-HT2A受体基因T102C多态性中C等位基因能够降低信使核糖核酸（mRNA）以及蛋白的表达，并与5-HT2A受体结合位点数目降低［7］、与抑郁症发病有关。Jokela等［8］的研究也表明5-HT2A受体基因T102C多态性影响重性抑郁症的发展。也有研究显示5-HT2A受体基因T102C多态性与抑郁症无明显关联［9］。本研究通过对首发抑郁症患者进行研究，结果表明5-HT2A受体基因（T102C）T/C基因型、C/C基因型频率及等位基因频率与正常对照组相比无统计学意义，提示T102C多态性中胞嘧啶C基因型可能并不是抑郁症发病的易感基因，与抑郁症发病无显著关系。

抗抑郁药物主要作用于5-HT2A神经递质系统，抑郁症患者对药物治疗的反应表现出遗传异质性。有研究显示，5-HT2A T102C的C等位基因是SSRI类抗抑郁药物治疗的优势基因，T102C的C/C基因型抑郁症患者具有较好的治疗效果［10-11］。逍遥散是治疗抑郁症的常见方剂［12］，既补肝体，又助肝用，是气血兼顾、调和肝脾的名方，具有疏肝理气，健脾养血清热之功能，对抑郁症有良好的疗效。较多的研究显示逍遥散的抗抑郁作用机制可能与影响脑内5-HT能神经系统有关，如赵威等［13］研究发现逍遥散可显著增高利血平致抑郁症小鼠脑内的5-HT含量。熊静悦等［14］的研究提示逍遥散的抗抑郁作用可能与5-TH2A受体有关，且随后的验证研究进一步证实5-TH2A受体是逍遥散发挥作用的靶点。本研究表明逍遥散治疗抑郁症的疗效与5-HT2A受体基因（T102C）多态性无关联。

该结果可能受到相对较少研究样本量的影响，还可能在一定程度上受到抑郁症表型异质性的影响。同时研究结果只涉及单个基因多态性与抑郁症的关系，而未深入考虑到多个基因之间和基因—环境因素的交互作用。因此，为得到较全面、合理的结论，仍需开展大量的多中心及大样本的病例对照研究。

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10.3969/j.issn.1000-8535.2016.01.029

2015-06-10）

广州市中医药科技项目（20132A011019）