厚朴居群叶表皮毛的显微特征差异及分类意义

2016-12-22杨志玲潘文婷李火根

广西植物 2016年11期

杨旭，杨志玲，麦静，潘文婷，李火根

( 1. 南京林业大学林木遗传与生物技术省部共建教育部重点实验室，南京 210037； 2. 中国林科院亚热带林业研究所，浙江富阳， 311400； 3. 中国林科院亚热带林业实验中心，江西分宜 336600 )

杨旭1,2，杨志玲2，麦静2，潘文婷3，李火根1*

叶片的微观形态特征包括表皮的毛被特征，在现代植物分类研究中被越来越多地应用于疑难类群的分类鉴定中。厚朴为我国常用中药，该分类群的分类地位一直存在着很大争议。该研究选取16个厚朴的天然群体，运用光学和电子显微镜观测不同居群厚朴叶片的毛被特征，并通过对显微特征的UPMGA聚类分析，了解其分类地位及亲缘关系。结果表明：不同居群厚朴叶表皮毛差异显著，表皮毛各特征均呈现出多态性。16个居群厚朴叶表皮大致可以分为两类形态，一类由2～3个细胞组成，表皮毛直立或微倒伏，长147.48～489.21 μm，顶细胞长度远长于其他细胞，与其他细胞的衔接方式为直接；另一类表皮毛由2～7个细胞组成，弯曲或扭曲，全长251.70～489.21 μm，顶细胞长176.47～353.23 μm，与其余细胞形成一定的夹角(123.31°～150.61°)，顶细胞与其他细胞的衔接方式以钝接为主。16个样本可以分为两个类群——直立型和弯曲型，所划分的类群与根据叶形划分的类型基本一致。直立型表皮毛又可以划分为粗短型和细长型，所划分的类群对应的叶形为小凸尖型的厚朴和中间型厚朴。因此，该研究结果证实厚朴在归并为一个种后，将其分为3个地理亚种是合理的。

厚朴, 天然居群, 叶表皮毛, 显微特征, 分类意义

厚朴为常用中药，在我国已有两千多年的药用历史，以干燥根皮、干皮和枝皮入药，性辛苦温，有燥湿消痰，下气除满之功效(国家药典委员会, 2005)。厚朴为多年生植物，其分布和栽培面积很广，在长期的系统发育和引种栽培过程中，因为基因交流、遗传漂变等原因，在外部形态、内部结构和内含物含量等方面发生了丰富的变异。在表型上叶型、毛被、花色上出现了过渡类型(杨志玲和杨旭，2012)。并且由于存在广泛的营养繁殖，缺少有性生殖的选择压力，丰富的变异类型得以保存和进一步发生，从而造成种下的界定存在很大的争议。

厚朴药材来源于厚朴(Magnoliaofficinalis)和凹叶厚朴(M.officinalissubsp.biloba)(刘玉壶等，1996)。《中国高等植物图鉴》中将凹叶厚朴作为一个种处理，定名为M.biloba(Rehd. et Wils.)Cheng(中国科学院植物研究所,1972)；《中国药用植物志》和《中国药典》各版本将其作为厚朴的变种处理，定名为M.officinalisvar.bilobaRehd. et Wils(国家药典委员会，2005；裴监和周太炎，1957)；《中国植物志》将其作为厚朴的亚种处理，学名为M.officinalissubsp.biloba(Rehd. et Wils.)Law. (刘玉壶等，1996)。此外，邓朝义(1986)根据叶柄的长短、顶芽及果柄被毛情况发表新变种毛芽厚朴(M.officinalisRehd. et Wils. var.pubescensC. Y. Deng)。傅大立等(2007)根据幼枝、托叶、顶叶芽、混合芽、花蕾和花梗均无毛的情况发表新变种无毛厚朴M.officinalisRehd. et Wils. var.glabraD. L. Fu T. B Zhao et H T Dai。易同培(2014)根据花被片、雄蕊花药及雌蕊群颜色发表新变种红花凹叶厚朴[MagnoliaofficinalisRehd. et Wils. subps.biloba(Rehd. et Wils.) Law var.rubicundaYi]。并且，在长期的栽培过程中，又有大量的栽培变种的涌现(赵天榜等，1991a,b)。而这些变种又在不断地被归并(纪成据，1998)。最新版的“FloraofChina”首次把厚朴和凹叶厚朴及以下变种进行归并，统称厚朴(Houpo⊇aofficinalis)。

尽管从实践利用的角度对厚朴各种、亚种和变种进行了归并，但厚朴的分类地位及各分类群的分类关系仍存在着很大的争议。斯金平等(2000)提出，厚朴叶在种群间和种群内，甚至同一植株中均存在连续的变异，因此将厚朴分为小凸尖型、中间型和凹叶型3个地理宗，并对其观点提供了同工酶谱带和化学含量的佐证(朱玉球等，2000；童再康等，2000)。郭宝林等(2001)利用RAPD技术探讨了不同产地厚朴的种内关系，也认为将厚朴分为3个地理宗更为合适，但这一观点并未得到国内外专家的广泛认可。Yu et al(2011)对厚朴复合群ITS序列分析结果显示，各叶型间没有ITS序列上的相关性，且根据Kimura-2参数计算的不同产地厚朴间的遗传距离也未因叶型形态而表现较近的遗传距离(Yu et al,2011)。余盛贤等(2010)运用分子谱系对厚朴居群间的遗传分析也验证了以上观点。

以往对厚朴分类学的研究中，利用的均是宏观的特征，把叶的微观形态特征运用到该属植物的分类研究中，将会提供新的依据。在植物分类研究中，叶是仅次于花和果实用于分类的特征(王东超等，2012；李相传等，2010)。叶微观形态特征在现代植物分类研究中被越来越多的应用与疑难类群的分类鉴定中(彭斌等，2010；徐艳琴等，2013)。表皮毛在种间或种下等级被证实是一类有运用价值的分类特征。因此，本研究运用光学和电子显微技术观测厚朴叶片的毛被特征，旨在通过叶表皮毛被的显微特征的差异来分析了解厚朴分类群的分类地位及亲缘关系，以期对厚朴进行深入的研究，品种资源的合理开发与利用、新品种的选育，以及进一步扩大厚朴植物的应用范围提供理论的依据。

1 材料与方法

1.1 材料

由于“FloraofChina”对厚朴各亚种和变种进行归类，统称为厚朴，因此本研究所采集的居群包括小凸尖型厚朴、凹叶型厚朴及中间型厚朴等多种类型，于2014年6-7月厚朴叶片基本成熟时采集厚朴叶片。采集地的经纬度情况见表1。每居群采集30个个体，小于30个的全部采集。将采集的植株制成腊叶标本，带回实验室备用。

表 1 厚朴样本来源及野生居群地信息

Table 1 Location and habitat characters of wild population ofHoupo⊇aofficinalis

居群Population 采集地点 Location经度Longitude纬度Latitude海拔Elevation(m) 叶型 LeaftypeAHYX安徽省岳西县鹞落坪自然保护区YaoluopingNatureReserve，Yuexi，AnhuiProvince111°21′36″E30°50′24″N824圆钝，微凸或微凹Obtuse，slightlyconvexorslightlyconcaveAHYX2安徽省岳西县鹞落坪自然保护区YaoluopingNatureReserve，Yuexi，AnhuiProvince116°21′36″E30°50′24″N824先端凹缺成二裂ThetipconcaveintotwocracksFJJN福建省建宁县溪源乡Xiyuan，Jianning，FujianProvince117°2′24″E26°31′24″N373圆钝，微凸或微凹Obtuse，slightlyconvexorslightlyconcaveGXZY广西省资源县车田乡Chetian，Ziyuan，Guangxi110°37′48″E26°1′44″N859全缘，先端圆钝Entire，apexobtuseGZLP贵州省黎平县德化乡Dehua，Liping，GuizhouProvince119°8′24″E26°14′23″N896先端凹缺成二裂ThetipconcaveintotwocracksHBES湖北省建始县长梁乡Changliang，Jianshi，HubeiProvince109°27′48″E30°22′48″N525全缘，先端圆钝Entire，apexobtuseHBES2湖北省建始县长梁乡Changliang，Jianshi，HubeiProvince109°27′48″E30°22′48″N525先端凹缺成二裂ThetipconcaveintotwocracksHNAH湖南省安化县江南镇Jiangnan，Anhua，HunanProvince111°12′4″E28°22′48″N1021圆钝，微凸或微凹Obtuse，slightlyconvexorslightlyconcaveHNAH2湖南省安化县江南镇Jiangnan，Anhua，HunanProvince111°12′4″E28°22′48″N1021先端凹缺成二裂ThetipconcaveintotwocracksHNSM湖南省石门县壶瓶山自然保护区HupingshanNaturalReserve，Shimen，HunanProvince110°19′48″E30°0′36″N1016先端凹缺成二裂ThetipconcaveintotwocracksHNXX河南新县新集镇Xiji，Xinxian，HenanProvince114°52′12″E31°37′46″N715先端凹缺成二裂ThetipconcaveintotwocracksSCXH四川省宣汉县龙泉乡Longquan，Xuanhan，SichuanProvince108°5′24″E31°29′24″N1530全缘，先端急尖Entire，apexacutusSXLG陕西岚皋县滔河镇Taohe，Langao，ShanxiProvince108°31′12″E30°2′24″N798全缘，先端急尖Entire，apexacutusYNTC云南省腾冲市腾越镇Tengyue，Tengchong，YunnanProvince98°30′1″E25°1′48″N2252全缘，先端急尖Entire，apexacutusZJAJ浙江省安吉县天荒坪镇Tianhuangping，Anji，ZhejiangProvince119°36′31″E30°26′84″N895先端凹缺成二裂ThetipconcaveintotwocracksZJSC浙江省遂昌县埯口乡Ankou，Suichang，ZhejiangProvince119°16′13″E28°36′24″N1045圆钝，微凸或微凹Obtuse，slightlyconvexorslightlyconcave

1.2 方法

每个居群中所有个体均随机挑选1片叶片，采用叶表皮局部刮取表皮毛制片法，先用吸耳球吹去叶表面的浮尘，均匀刮取叶基、叶尖、叶缘、叶中部的表皮毛于载玻片上，用醋酸甘油(50%冰醋酸∶甘油∶蒸馏水=1∶1∶1)透化后，加拿大树胶稀释液封片，室温下晾干。使用DM BA200-B光学显微镜在10 × 40倍镜下观测其结构，每居群随机取20颗完整、具有代表性的表皮毛进行测量，记录总细胞数、表皮毛全长、顶细胞长(指表皮毛末端的一个细胞)、其余细胞长、顶余比(顶细胞与其余细胞长度比)、顶细胞比例、顶细胞直径、顶细胞与其他细胞衔接方式、细胞间是否具有膨大关节、是否具有伸长细胞、是否具有内含物等信息。

每个居群随机选取2～3片叶片，挑选叶片中上部靠近叶脉的部位，将一小块成熟完好的干叶片直接贴在观测台上，镀导电膜，在KYKY-1000B型扫描电子显微镜下观察拍照。

1.3 数据统计分析

采用Photoshop图像处理软件编辑。数据采用

SPSS软件统计，以变异系数作为种群内各形态特征变异的测度，用单样本的t-检验检测居群内形态变异的显著性水平，使用NTSYS 2.2对不同居群表皮毛性状进行聚类分析。

2 结果与分析

2.1 厚朴叶表皮性状

通过对16个居群厚朴叶下表皮光学和显微电镜观察显示(表2，图1，图2)，厚朴叶表皮密被中长的单列多细胞毛，毛细胞矩形、长方形或不规则形，基部宽平，末端渐尖，多数透明无色，部分毛细胞内可见暗色油滴状液体(不确定是油滴还是由细胞壁渗入的透明液)。表皮毛大致可分为两种形态。一种由2～3个细胞组成，表皮毛大多直立或微向一侧倒伏，全长147.48～489.21 μm。顶细胞长度远长于其他细胞，有131.09～388.07 μm，顶细胞占表皮毛全长的79%～91%，顶细胞与其他细胞的衔接方式为直接；另一种表皮毛由2～7个细胞组成，表皮毛大多弯曲或扭曲，全长251.70～489.21 μm，与其余细胞形成一定的夹角(123.31°～150.61°)。顶细胞长度远长于其他细胞，有176.47～353.23 μm，顶细胞占表皮毛全长的65%～82%，顶细胞与其他细胞的衔接方式为直接或钝接。

表 2 不同居群厚朴表皮毛特征的差异比较

Table 2 Morphological characters of leaf trichomes for differentHoupo⊇aofficinalispopulations

居群Population表皮毛形态Shapeofleaftrichome总细胞数Totalnumberofcells衔接方式Connectionpattern表皮毛长度Fulllength(μm)顶细胞长度Lengthofthefirstcell(μm)顶细胞直径Diameteroffirstcell(μm)顶细胞比例Ratioofthefirstcell顶细胞与其余细胞夹角Angle(°)AHYX直立Upright2d(0)直接或钝接Boxer/obtuseangle186．71cd(0．33194)150．22c(0．3193)14．37ab(0．1301)0．80abc(0．0625)173．25a(0．1925)AHYX2弯曲Bent3．67a(0．3134)钝接Obtuseangle276．73abcd(0．4309)180．48bc(0．4220)11．44b(0．0865)0．65d(0．1962)142．19b(0．2265)FJJN直立Upright2．33b(0．21)直接或钝接Boxer/obtuseangle165．11cd(0．4094)131．09c(0．4749)14．56ab(0．1367)0．79abcd(0．0722)167．3a(0．0912)GXZY直立Upright2．11cd(0．1564)直接或钝接Boxer/obtuseangle147．48d(0．0859)133．84c(0．0850)12．53b(0．4405)0．91a(0．0219)172．08a(0．1209)GZLP弯曲Bent2．75bc(0．1818)钝接Obtuseangle251．70abcd(0．3049)176．74bc(0．1808)13．641b(0．3599)0．73bcd(0．2054)143．41b(0．2436)HBES直立Upright2．5bcd(0．228)直接或钝接Boxer/obtuseangle278．17abcd(0．6279)241．58abc(0．3938)11．91b(0．2888)0．87abc(0．0575)171．38a(0．0724)HBES2弯曲Bent3．2ab(0．0594)钝接Obtuseangle362．27abc(0．4803)244．09abc(0．4267)19．09a(0．1356)0．72bcd(0．2083)126．31b(0．3762)HNAH直立Upright2d(0)直接或钝接Boxer/obtuseangle174．13cd(0．2777)147．04bc(0．3029)14．29ab(0．1336)0．84abc(0．0357)176．09a(0．1687)HNAH2弯曲Bent3．67a(0．3133)钝接Obtuseangle298．23abcd(0．3841)201．08abc(0．4339)10．99b(0．1981)0．67d(0．1920)123．41b(0．4087)HNSM直立Upright2．7bcd(0．1778)直接或钝接Boxer/obtuseangle245．68abcd(0．5447)197．50abc(0．5545)13．68b(0．1754)0．80abcd(0．075)170．61a(0．2253)HNXX弯曲Bent2．5bcd(0．228)钝接Obtuseangle280．11abcd(0．4648)225．01abc(0．5071)11．93b(0．3252)0．82abc(0．2195)133．81b(0．3482)SCXH直立Upright2．50bcd(0．204)直接或钝接Boxer/obtuseangle292．42abcd(0．9321)261．74abc(0．9673)14．92ab(0．3257)0．86abc(0．0732)167．39a(0．0426)SXLG直立Upright2．82bc(0．1454)直接或钝接Boxer/obtuseangle429．13ab(0．6717)296．49abc(0．5709)12．318b(0．2583)0．73bcd(0．2192)173．01a(0．0701)YNTC直立Upright2．5bcd(0．228)直接或钝接Boxer/obtuseangle496．98a(0．5298)388．07a(0．5402)14．77ab(0．1537)0．88ab(0．1023)168．67a(0．1166)ZJAJ弯曲Bent2．71bcd(0．1808)钝接Obtuseangle489．21a(0．6141)353．23ab(0．7014)12．17b(0．2761)0．71cd(0．1827)127．67b(0．4151)ZJSC直立Upright2．0d(0)直接或钝接Boxer/obtuseangle186．74bcd(0．5073)163．64bc(0．5812)12．95b(0．3938)0．84abc(0．1190)167．67a(0．1428)平均Average2．6225(0．1641)285．05(0．4748)218．24(0．4669)13．4724(0．2386)0．7887(0．1276)155．8285(0．2038)

注：同列中不同的小写字母表示差异显著(P<0.05)。

Note: The different small letters in the same column indicate the significant differenctes (P<0.05).

图 1 不同居群厚朴表皮毛光镜照片Fig. 1 Comparison of the morphological characters among different Houpo⊇a officinalis populations

图 2 不同居群厚朴叶表皮毛的显微电镜照片Fig. 2 Microscopic characters of leaves trichomes in different Houpo⊇a officinalis populations under LM a. AHYX; b. AHYX2， c. FJJN; d. GXZY; e. GZLP; f. HBES; g. HBES2; h. HNAH; i. HNAH2; j. HNSM， k. HNXX， l. SCXH; m. SXLG; n. YNTC; o. ZJSC; p. ZJAJ.

图 3 不同居群厚朴叶表皮毛的UPGMA聚类图Fig. 3 UPGMA dendrogram using morphological characters for different Houpo⊇a officinalis populations

2.2 表皮毛特征在厚朴居群内和居群间的变异

不同居群厚朴叶表皮表皮毛差异显著，表皮毛形态、构成细胞数、表皮毛长度、顶细胞长度、顶细胞直径、顶细胞比例、顶细胞与其余细胞夹角都呈现出非常多的多态性(图1，图2)(以下数据均展示的是居群水平)。表皮毛的形态及构成表皮毛的细胞数大致可分为两类，一类表皮毛由2～3个细胞组成，表皮毛大多直立或微向一侧倒伏；另一种表皮毛由2～7个细胞组成，表皮毛大多弯曲或扭曲。构成细胞个数最多的为HNAH的凹叶厚朴，平均由3.67个细胞构成，构成细胞数最少的为AHYX、HNAH、ZJSC的中间型厚朴，均是由两个细胞构成，一个为占绝对优势的顶细胞，一个为稍膨大的基部细胞，构成细胞个数最多的居群为最少居群1.84倍。表皮毛长度最长的为ZJAJ居群(489.21 μm)，表皮毛长度最短的为GXZY居群(147.48 μm)，长度最长的居群为最短居群的3.31倍。顶细胞长度最长的为YNTC居群(388.07 μm)，长度最小的为FJJN居群(131.09 μm)，长度最大居群为最小居群的2.63倍；顶细胞直径最大的为HBES的凹叶厚朴居群(19.09 μm)，直径最小的为HNAH的凹叶厚朴居群(10.99 μm)，直径最大的居群为最小居群的1.74倍；顶细胞比例最大的为GXZY居群，顶细胞占表皮毛全长的91%，顶细胞比例最小的为AHYX的凹叶厚朴，顶细胞占表皮毛全长的65%；顶细胞与其余各细胞的夹角在各居群间差异没有达到显著水平，其中夹角最大的为HNAH中间型厚朴，夹角最小的为HNAH的凹叶厚朴，前者为后者的1.43倍。

从表2可以看出，表皮毛各性状中，表皮毛性状、顶细胞衔接方式、顶细胞与其余细胞夹角等性状在居群内表现非常一致。而表皮毛长度、顶细胞长度、顶细胞直径、总细胞数、顶细胞比例等则呈现出较大的变异。变异系数在居群内差异最为显著的是顶细胞长度，变异系数最大的是SCXH居群(0.967 3)，比最小的GXZY居群(0.085 0)高11.38倍，此外，表皮毛长度在各居群间差异也较显著。同一居群内表皮毛性状，一般凹叶厚朴的变异系数要高于小凸尖型和中间型厚朴。

2.3 厚朴表皮毛变异模式

基于表皮毛的主要特征的UPMGA聚类分析结果显示(图3)，16个样本可显著分为两个类群，一类为直立类型的表皮毛，一类为弯曲类型的表皮毛，所划分的两个类群与叶形划分类型一致。其中直立型表皮毛又可显著分为两类，一类毛被较长，顶细胞直径较小，这类为小凸尖型的厚朴，一类毛被较前者粗短，叶型为中间型厚朴。而典型的凹叶厚朴样本分支的分辨率较差，地理种源相近的居群没有相应的聚在一起。因此我们建议将厚朴分类群分为两个类型，分别为厚朴和凹叶厚朴，厚朴下又分为两个变型，小凸尖型和中间型厚朴。

3 讨论

3.1 基于厚朴表皮毛特征的分类学启示

长期以来，枝、芽的解剖结构、化学成分、核型和染色体、遗传多样性等都曾被运用于厚朴的分类学研究(王峻鹏，2008；张春霞等，2009；He et al, 2009)，但这些研究都存在样本数量不足的缺点，其结果都存在着较大的分歧。叶表皮的毛被特征作为种间的特异性差别，是一种比较稳定的特征，对于种及种下单元的划分具有一定的参考意义(高敏和郭宝林，2010)。一般认为，表皮的毛被特征，可作为种间及种下分类群的扩散途径及演化趋势的形态学证据。物种曾经的中心分布区其叶表皮毛类型比较原始，而分布于外围区域的类型为衍生类型。染红平等(1991)综合叶表皮毛的类型、密度及分支特征提出我国常绿栎类毛的演化趋势为从单一到复杂的演化途径，分化出形态各异的结构复杂的毛系。而高敏(2011)对淫羊藿属表皮毛的研究认为，单一表皮毛的演化途径为细胞数由多到少，细胞壁从薄到厚至中部膨大，顶细胞比例逐渐增大，伸长细胞由无到有、相邻细胞连接方式由直接到钝接甚至“t”型相接，表皮毛形态从平直到卷曲。

本研究基于厚朴在我国亚热带地区广泛分布的前提下，在全分布区内选择大样本天然群体进行观察，且选择了每种群的30个个体的表皮毛进行详尽的测量，研究样本和数量具有较好的代表性。研究认为依据叶表皮的表皮毛特征，厚朴种群可明显聚为三大类型，分别为典型的小凸尖型厚朴、典型的凹叶厚朴和中间型厚朴，这一结论与斯金平等(2000)将厚朴以叶的类型划分为3个地理宗的结果吻合。郭宝林等(2011)通过RAPD分子标记将不同种源厚朴的聚类分析结果显示，典型的厚朴聚类分辨率最好，可单独聚为一支，而中间型厚朴和凹叶厚朴形成一个复合的群体，这与本文的研究结果有一定的相似性。此外，俞盛贤等(2010)运用2个叶绿体基因间序列psbA-mtH和tmj-tmF对不同居群的厚朴和凹叶厚朴的遗传结构研究认为凹叶厚朴为较原始的类型，从凹叶厚朴中进化出了厚朴，基于此，我们推测，厚朴叶表皮表皮毛的演化趋势为细胞数由多到少，顶细胞比例逐渐增大，表皮毛形态从卷曲到平直。

3.2 整合物种概念在厚朴分类学上的运用

厚朴分类群分布范围非常广，野外调查结果显示，厚朴分布区横跨21.11个经度，6.6个纬度。小凸尖型的厚朴主要分布于大巴山脉、武陵山脉及大渡河两岸，凹叶厚朴主要分布于浙、闽、赣皖交界的武夷山系、洞宫山系、南岭山系及广西北部和东北部(刘玉壶等，1996)。两者在分布区上有许多的重叠。厚朴花期一般在5-6月，凹叶厚朴花期为4-5月，两者花期很难相遇，在一定程度上防止了不同分类群间的基因渐渗。然而，近几十年的研究逐渐认识到，生殖隔离并不是物种形成的直接原因，只是差异适应与遗传漂变的一个副产物(Wu et al，2001；Rieseberg et al，2006)。

通常提到的物种的形成是谱系不断分裂和不断融合的过程(Mallet，2007)。许多物种，已经在形态、化学成分或异常结构上产生很大的变异，但这种变异还需要时间加以固定，是处于形成两个种的“在路上”的阶段(刘建全，2014)。厚朴分类群中，表型特征、化学成分及遗传变异都存在显著的差异，因此有理由认为，厚朴为多型种。多型种通过地理或生殖的隔离而产生地方宗、地理宗和地理亚种的阶段，最后才进化成种。因此，本研究认为，厚朴在归并为一个种后，将其分为三个地理亚种是合理的。但是，该结论是建立在以叶表皮的显微结构的差异为基础上的，还需要采用‘整合物种概念’(Integrated species concept)的综合手段。在居群水平上，对广义形态分类性状包括花部特征、花粉粒形态、种实特性的差异等进行广泛的统计分析，并结合DNA条形码序列及化学成分的差异；并对上述获得的形态或遗传间断群进行地理隔离、生态以及生殖隔离的深入分析和实验验证，综合以上证据获得的间断或单系群，重新进行厚朴界限的划定和分类修订。使其具有更为广泛的应用性或验证性。

DENG CY, 1986. A new variety ofMagnoliaOfficinalisRehd. Et. Wils [J]. J Nanjing For Coll,(1):145. [邓朝义, 1986. 厚朴一新变种 [J]. 南京林学院学报,(1):145.]

FU DL,ZHAO TB,DAI HT,et al, 2007. A new variety ofMagnoliaofficinalisRehd. & Wils. [J]. Bull Bot Res, 27(4):388-389. [傅大立,赵天榜,戴惠堂,等, 2007. 厚朴一新变种 [J]. 植物研究, 27(4):388-389.]

GAO M,GUO BL, 2010. Taxonomical significances of leaf epidermal microfeatures [C]. Proceedings on Conference of 9thChinese Medicinal Plant and Herbal Medicinal Products Conference.[高敏,郭宝林, 2010. 叶片微形态特征的分类学意义 [C]. 第九届药用植物及植物药学学术研讨会论文集.]

GAO M, 2011. Non-glandular hairs characteristic and the content of magnoflorine ofEpimediumL. (Berberidaceae) from China [D]. Beijing: Chinese Academy of Medical Sciences.[高敏, 2011. 中国地区淫羊蕾属非腺毛特征及木兰花碱含量研究 [D]. 北京：中国药用植物研究所.]

GUO BL,WU M,SI JP,et al, 2001. Research on DNA molecular marker ofMagnoliaOfficinalisRehd. Et Wils. RAPD study on certified species [J]. Acta Pharm Sin:386-389. [郭宝林,吴勐,斯金平,等, 2001. 厚朴DNA分子标记的研究——正品的RAPD研究 [J]. 药学学报:386-389.]HE JS,CHEN L, SI Y, et al，2009. Population structure and genetic diversity distribution in wild and cultivated populations of the traditional Chinese medicinal plantMagnoliaofficinalissubsp.biloba(Magnoliaceae) [J]. Genetica, 135,(2)2:233-243.

大多数高职院校对顶岗实习阶段的党团组织生活没有足够重视，对顶岗实习学生的思想政治教育工作缺乏周密的教学计划，没能建立起完整有效的管理体系；也没有建立起学生、辅导员、实习指导教师、企业技术指导师傅之间进行思想沟通的有效载体。况且许多非公有制经济组织还没有建立党组织，大学生流动党员在这些企业中进行顶岗实习无法转组织关系，无法过组织生活。

INSTITUTE OF BOTANY, CHINESE ACADEMY OF SCIENCES, 1972. High plant iconography of China [M]. Beijing: Science Press: 787. [中国科学院植物研究所, 1972. 中国高等植物图鉴 [M]. 北京:科学出版社: 787.]

JI CJ, 1998. A view on “new variety” ofMagnoliaofficinalisRehd. Et Wils. var.pubescensC. Y. Deng [J]. Subtrop Plant Res Comm, 27(1):38-40. [纪成据, 1998. 对毛芽厚朴“新变种”的看法 [J]. 亚热带植物通讯, 27(1):38-40.]

LI XC,SUN BN,LIN ZC,et al, 2010. Epidermal anatomy of the genus Ilex and its taxonomic significance [J]. J Lanzhou Univ (Nat Sci Ed),46(4):13-21. [李相传,孙柏年,林志成,等, 2010. 冬青属植物的叶表皮特征及其分类学意义 [J]. 兰州大学学报(自然科学版),46(4):13-21.]

LIU YH,LUO XR,WU RF,et al, 1996. Flora Reipublicae Popularis Sinicae [M]. Beijing: Science Press, 30(1):221-222. [刘玉壶,罗献瑞,吴容芬,等, 1996. 中国植物志 [M]. 北京:科学出版社, 30(1):221-222.]

LIU JQ, 2014. Special concept and plant taxonomy in a new era. [C]//Abstract book on Chinese Systematic and Evolutionary Botany seminars and the 11thYSSNLP,11:17-18. [刘建全, 2014. 新时代下的物种概念和植物分类学 [C]//全国系统与进化植物学研讨会暨第十一届青年学术研讨会论文摘要集,11:17-18.]

MALLET J, 2007. Hybird speciation [J]. Nature, 446(7133):279-283.

PENG B,ZHOU YF,SHU P,et al, 2011. Comparative observation on micro-morphological characters of leaf epidermis ofDioscoreabulbiferaL. from different populations [J]. J Plant Res Environ, (2):19-27. [彭斌,周义峰,舒璞,等, 2011. 黄独(DioscoreabulbiferaL.)不同居群叶表皮微形态特征的比较观察 [J]. 植物资源与环境学报, (2):19-27.]

PEI J,ZHOU TY， 1957. Medical flora of China [M]. Beijing: Science Press: 220. [裴监,周太炎， 1957. 中国药用植物志 [M]. 北京:科学出版社: 220.]

RAN HP,REN XW,LIU YQ, 1990. A study on the morphology of foliar trichomes of evergreen Oaks(Quercus) in China and its implication in taxonomy [J]. Acta Phytotax Sin, 28(2):112-121. [染红平,仁宪威,刘一樵, 1990. 中国常绿栎类叶表皮毛形态与分类的研究 [J]. 植物分类学报, 28(2):112-121.]

SI JP,TONG ZK,GUO BL, 2000. Discussion on current classification ofMagnoliaofficinalis[J]. J Pharm Prac,18(5):301-302. [斯金平,童再康,郭宝林, 2000. 厚朴原职务现行分类法的商榷 [J]. 药学实践杂志,18(5):301-302.]

THE COMMITTEE OF PHARMACOPOEIA, 2005. Chinese Pharmacopoeia [M]. Beijing: Chemical Industry Publishers: 176. [国家药典委员会, 2005. 中国药典 [M]. 北京：化工出版社: 176.]

TONG ZK,SI JP,LIU R, 2000. Study on variation and inheritance of phenolic compound concentrations inMagnoliaofficinalisof different seed sources [J]. For Res, 13(3):257-261. [童再康,斯金平,刘饶, 2000. 不同种源厚朴酚类物质含量变异与遗传的初步研究 [J]. 林业科学研究, 13(3):257-261.]

WANG DC,YANG YP,CHEN JH,et al, 2012. Leaf epidermal microfeatures of 28Salixspecies under scanning electronic microscope and their taxonomical significances [J]. Plant Divers Res, 34(5)：430-442. [王东超,杨永平,陈家辉,等, 2012. 28种柳属植物的叶表皮微形态特征及其分类学意义 [J]. 植物分类与资源学报, 34(5)：430-442.]

WANG JP, 2008. Study on anatomical characters and garden application of several species inMagnoliaL [D]. Fuzhou: Fujian Agriculture and Forestry University. [王峻鹏, 2008. 木兰属(Magnolia.)一些植物的形态解剖与园林应用探讨 [D]. 福州：福建农林大学.]

WU CI, 2001. The genic view of process of speciation [J]. J Evol Biol ,14(6):851-865.

XIA NH,LIU YH, NOOTEBOOM HP,2008. Houpo⊇a. Flora of China [M]. 7: 64. [夏念和,刘玉壶, NOOTEBOOM HP,2008. Houpo⊇a. 中国植物志 [M]. 7: 64.]

XU YQ,CAI WZ,HU SF,et al. 2013. Morphological variation of non-glandular hairs in cultivatedEpimediumsagittatum(Berberidaceae) populations and implications for taxonomy [J]. Biodivers Sci, 21(2):185-196. [徐艳琴,蔡婉珍,胡生福,等. 2013. 箭叶淫羊藿同质栽培居群非腺毛多样性及其分类学启示 [J]. 生物多样性, 21(2):185-196.]

YANG ZL,YANG X， 2012. Germplasm resources research ofMagnoliaofficinalis[M]. Beijing: China Forestry Publishing:36-37. [杨志玲,杨旭， 2012. 厚朴种质资源研究 [M]. 北京:中国林业出版社:36-37.]

YI TP, 2014.MagnoliaofficinalisRehd. et Wils. subsp.biloba(Rehd.et Wils.)Law var.rubicundaYi——A new variety ofMagnoliaLinn. (Magloniaceae) from Sichuan, China [J]. J Sichuan For Sci & Technol, 35(5):1-2. [易同培, 2014. 凹叶厚朴一新变种——红花凹叶厚朴(木兰科) [J]. 四川林业科技, 35(5):1-2.]

YU HH, YANG ZL, SUN B, et al, 2011.Genetic diversity and relationship of the endangered plantMagnoliaofficinalis(Magnoliaceae) assessed with ISSR polymorphisms [J]. Biol Sys & Ecol, 39(2):71-78.

YU SX, YUAN QJ, YANG B, et al, 2010. Population genetic study ofMagnoliaofficinalisandM.officinalisvar.biloba[J]. Chin J Chin Mat Med, 35(16):2019-2132. [余盛贤, 袁庆军, 杨滨, 等, 2010. 厚朴与凹叶厚朴群体遗传学研究 [J]. 中国中药杂志, 35(16):2019-2132.]

ZHAO TB,CHEN ZX,FU DL,et al, 1991a. Four new cultivated variety ofMagnoliaofficinalis[J]. Henan Sci & Technol (Suppl): 39-40. [赵天榜,陈志秀,傅大立,等, 1991a. 厚朴四新栽培变种 [J]. 河南科技增刊，林业论文集:39-40.]

ZHAO TB,CHEN ZX,LI RF,et al, 1991b. New variants ofMagnoliaofficinalisin Henan Province [J]. J Nanyang Coll Ed (Sci Ed),(6):16-17. [赵天榜,陈志秀,李瑞符,等, 1991b. 河南厚朴三个新变种 [J]. 南阳教育学院学报(理科版),(6):16-17]

ZHANG CX,YANG LX,YU XING,et al. 2009. Effects of tree ages and geographic area on quality of bark ofMagnoliaofficinalisandM.officinalisvar.biloba[J]. Chin J Chin Mat Med,34(19)：2431-2437. [张春霞,杨立新,余星,等. 2009. 种源、产地及采收树龄对厚朴药材质量的影响 [J]. 中国中药杂志， 34(19)：2431-2437.]

ZHU YQ,TONG ZK,SI JP, 2000. A preliminary study on isozymes ofMagnoliaofficinalisfrom different provenances [J]. J Zhejiang For Coll, 17(4):32-36. [朱玉球,童再康,斯金平, 2000. 厚朴种源同工酶初步研究 [J]. 浙江林学院学报, 17(4):32-36.]

Comparison of characteristics of leaf trichomes inHoupo⊇aofficinalisand their taxonomical significances

YANG Xu1,2， YANG Zhi-Ling2， MAI Jing2， PAN Wen-Ting3, LI Huo-Gen1*

( 1.KeyLaboratoryofGenetics&Biotechnology,NanjingForestryUniversity,MinistryofEducation, Nanjing 210037, China；2.ResearchInstituteofSubtropicalForestry,ChineseAcademyofForestry, Fuyang 311400, Zhejiang, China;3.SubtropicalExperimentalCenter,ChineseAcademyofForestry, Fenyi 336600, Jiangxi, China)

CortexHoupo⊇aofficinalisis a traditional Chinese medicine. There have been long disputes in classifying status in this taxonomic group. In this study, microphotography and scanning electron microscope were used to observe leaf trichomes of this taxonomic group of 16 natural populations. The result indicated that there existed significant differences in leaf epidermal hair among 16 populations, which indicated high polymorphism between populations. Microscopic structures of epidermal hair could be divided into two groups. One kind of epidermal hair was composed of 2-3 cells, upright or flattened a little, 147.48-489.21 μm long. The first cell was much longer than other cells, and comprises 79%-91% of the whole hair length. The connection pattern to other cells was boxer. The another kind of epidermal hair was composed of 2-7 cells, bent or twisted, 251.70-489.21 μm long. The first cell was 176.47-353.23 μm long, which comprised 65%-82% of the whole hair length and bearing angle of 123.31-150.61 to other cells. The connection pattern to other cells was obtuse angle. According to UPMGA clustering analysis of morphological diversity among populations, the hair ofH.officinaliscould be divided into two main groups, namely upright group and bent group. The result was basically coincident with Leaf-shaped. Meanwhile upright group can also be divided into two groups, namely leptosomatic group and stubby group, corresponding to typicalH.officinalisand middle type. Therefore, the results prove that it is reasonable thatH.officinalisshould be divided into three geographic clans.

Houpo⊇aofficinalis, leaf trichomes, microscopic characters, classification significance

10.11931/guihaia.gxzw201506001

2015-09-10

2015-12-20

国家自然科学基金(31270585)；农业科技成果转化资金项目 (2013GB24310613) [Supported by the National Natural Science Foundation of China (31270585)； Fund for Agricultural Scientific and Technological Achievement Transformation (2013GB24310613)]。

杨旭(1979-)，女，浙江建德人，硕士，助理研究员，主要从事药用植物资源保护和利用，(E-mail)yangxu2119@126.com。

*通讯作者：李火根，教授，博士生导师，主要从事林木遗传育种工作，(E-mail)hgli@njfu.edu.cn。

Q944.56

1000-3142(2016)11-1335-09

杨旭，杨志玲，麦静，等. 厚朴居群叶表皮毛的显微特征差异及分类意义 [J]. 广西植物， 2016， 36(11):1335-1343

YANG X， YANG ZL， MAI J， et al. Comparison of characteristics of leaf trichomes inHoupo⊇aofficinalisand their taxonomical significances [J]. Guihaia， 2016， 36(11):1335-1343