细胞块石蜡包埋切片鉴别良恶性胸腹腔积液的应用价值

罗政权 王宝军 杜秀杰 逯娟 郑宏江

(1.河北邯郸峰峰集团总医院病理科，河北 邯郸 056200；2.邯郸市第四医院病理科，河北 邯郸 056200)



细胞块石蜡包埋切片鉴别良恶性胸腹腔积液的应用价值

罗政权1王宝军1杜秀杰2逯娟1郑宏江1

(1.河北邯郸峰峰集团总医院病理科，河北 邯郸 056200；2.邯郸市第四医院病理科，河北 邯郸 056200)

目的 研究细胞块石蜡包埋切片鉴别良恶性胸腹腔积液的应用价值。方法 连续选择68份高度怀疑恶性胸腹腔积液标本，分别进行细胞块石蜡包埋切片和细胞脱落病理学检查，对比诊断敏感性、特异性、阳性预测值和阴性预测值的差异性。结果 细胞涂片诊断恶性胸、腹腔积液的阳性率明显低于最终结果，也明显低于石蜡包埋，差异均有统计学意义(P<0.05)；石蜡包埋与最终结果比较，差异无统计学意义(P>0.05). 细胞涂片诊断恶性胸、腹腔积液的敏感性、特异性、阳性预测值和阴性预测值明显低于石蜡包埋。结论 细胞块石蜡包埋切片鉴别良恶性胸腹腔积液具有较好的应用价值。

细胞块石蜡包埋切片； 胸腹腔积液； 细胞脱落病理学检查

一直以来，细胞脱落病理学检查被认为诊断胸腹腔积液性质的“金标准”[1]，然而H.Motherby[2]研究指出，其诊断恶性积液的阳性率仅为17.5%。对已知恶性积液的阳性诊断率为56%～65%，之所以出现较高假阴性原因可能与细胞学的制片技术有关[3]。常规细胞制片易受标本质量、涂片厚度、染色技术等影响[4]。细胞块石蜡包埋切片利用组织团块，聚集病变细胞，有效染色进行观察，主要应用在组织病理学诊断中[5]。本研究通过比较这两种技术在鉴别胸腹腔积液性质的价值，为临床诊断提供新思路。

注：A、B为腺癌细胞；C、D为鳞癌细胞；A、C为石蜡包埋HE染色；B、D为细胞涂片巴氏染色。图1 两种检测技术诊断恶性胸腹腔积液(400×)

1 材料与方法

1.1 材料来源 连续选择2014年1月至2016年1月入我院行病理诊断，高度怀疑恶性胸腹腔积液标本共68份，标本无污染，采集后立即送检。标本来源男性41例，女性27例；年龄37～76岁，平均(52.5±13.3)岁；胸腔积液35份，腹腔积液33份。

1.2 标本处理 52A 型医用低速离心机(北京六一机械厂)，脱水机(ASP300，LEICA，德国)，包埋机(EG1160，LEICA，德国)，切片机(RM2235，LEICA，德国)，Olympus 光学显微镜(BX51，Olympus，日本)。

1.2.1 细胞脱落病理学检查 预处理：标本至少100 mL、静置15 min、弃上清、取沉淀2 500 r/min离心5 min、弃上清、取沉淀；涂片：取中间层细胞；固定：95%乙醇固定 15 min；巴氏染色：蒸馏水水洗2 min×2次、苏木素染色5 min、流水冲洗1 min，放置盐酸酒精中5 s、流水冲洗分色，放置饱和碳酸锂溶液中返蓝，梯度酒精脱水，放置橘黄 G6 中 10 s、95%乙醇迅速冲洗 3 次、放置EA50 中2min、95%乙醇冲洗2min×2 次，无水乙醇2 min×2 次脱水、二甲苯透明、中性树脂封片。

1.2.2 细胞块石蜡包埋切片 预处理同上、取沉淀震荡与离心管分离、两层擦镜纸包裹放入脱水盒中，10%福尔马林浸泡 3～4 h固定，梯度酒精脱水、酒精和二甲苯透明、浸入纯石蜡2次、每次 2～3 h、温度54～56 ℃，包埋、切片、苏木素伊红染色。染色步骤：脱蜡、水化、染核(苏木精液染色 5 min、流水2～4 s，盐酸乙醇 2～4 s、稍水洗 15～30 s、流水 11～16 min、蒸馏水 2～4 s)、染浆(0.5%伊红液染色 1～5 min、蒸馏水快速冲洗 1～2 s)、脱水、透明、封片。

1.3 光学显微镜下阅片 均采用双盲法，由两名细胞病理学医师同时阅片，并做出一致性诊断。依据《浆膜腔积液细胞病理学诊断》标准，诊断报告采用3 级分类法，即找到恶性细胞(鳞状细胞癌、腺癌、小细胞未分化癌、大细胞未分化癌、腺鳞癌、癌型未定)，可疑恶性细胞和未找到恶性细胞。综合多种检查方法如生化、影像、临床表现为最终确诊结果。

1.4 统计学方法 采用SPSS 20.0软件对数据进行分析处理，计数资料采用%表示，组间比较采用(校正)χ2检验；以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 恶性胸腹腔积液阳性率的比较 35例恶性胸腔积液中，细胞涂片诊断出阳性20例，阴性15例，阳性率为57.1%，而最终确诊结果为阳性30例，阴性5例，阳性率为857.1%，石蜡包埋诊断出阳性28例，阴性7例，阳性率为80.0%，细胞涂片诊断的阳性率低于最终诊断结果，差异有统计学意义(χ2=7.000，P=0.008)，也明显低于石蜡包埋(χ2=4.242，P=0.039)，石蜡包埋与最终确诊结果比较，差异无统计学意义(χ2=0.402，P=0.526)；33例恶性腹腔积液中，细胞涂片诊断出阳性21例，阴性12例，阳性率为63.6%，而最终确诊结果为阳性30例，阴性5例，阳性率为90.9%，石蜡包埋诊断出阳性28例，阴性5例，阳性率为84.8%，细胞涂片诊断的阳性率低于最终诊断结果，差异有统计学意义(χ2=6.988，P=0.008)，也明显低于石蜡包埋(χ2=3.882，P=0.049)，石蜡包埋与最终确诊结果比较，差异无统计学意义(χ2=0.142，P=0.706)。见图1。

2.2 诊断敏感性、特异性、阳性预测值和阴性预测值的比较 细胞涂片诊断恶性胸腔积液的敏感性为62.5%、特异性为53.8%、阳性预测值为82.6%、阴性预测值为52.9%，诊断恶性腹腔积液的敏感性为66.9%、特异性为57.2%、阳性预测值为87.4%、阴性预测值为62.3%。石蜡包埋诊断恶性胸腔积液的敏感性为86.3%、特异性为72.9%、阳性预测值为88.4%、阴性预测值为72.0%，诊断恶性腹腔积液的敏感性为89.9%、特异性为80.1%、阳性预测值为88.6%、阴性预测值为83.3%。[敏感性=真阳性人数/(真阳性人数+假阴性人数)×100%，特异性=真阴性人数/(真阴性人数+假阳性人数))×100%，阳性预测值=真阳性人数/(真阳性人数+假阳性人数)×100%，阴性预测值=真阴性人数/(真阴性人数+假阴性人数)×100%]。

3 讨 论

目前临床中用于鉴别良恶性积液的检查方法主要有影像学如CT、PET，恶性积液 CT 常见结节状增后的胸腹膜，增厚常达 10 mm，多为不规则，若伴器官肿块及淋巴结肿大，多提示为恶性[6]；常规生化检查，如颜色、透明度、比重、凝固性、蛋白的定性与定量、糖、积液中的细胞数及细胞分类、pH 测定等[7]；肿瘤标志物，如糖类蛋白为广谱肿瘤标志物，癌胚抗原多见于肺癌、结肠癌和乳腺癌等[8]；细胞 DNA 倍体分析可测定细胞内的 DNA 含量，是一种可靠的检测手段；细胞脱落病理学检查等[9]。

胸、腹腔积液中细胞成分较为复杂，良性积液中常见细胞主要有间皮细胞、淋巴细胞、中性粒细胞及嗜酸性粒细胞等，恶性积液中可见腺癌细胞(89.2%)、鳞癌细胞(5.7%)或恶性淋巴瘤细胞(3.1%)，偶见未分化癌和恶性间皮瘤[10]。细胞脱落病理学检查优点是省时、费用低、方法简单，但影响因素多、可控性差、诊断阳性率低，使之不能成为鉴别恶性积液的唯一手段[11]。石蜡包埋切片技术通过离心沉淀、聚集更多病变细胞，经甲醛固定液形成细胞块、然后经石蜡包埋、切片和染色[12]。通过该研究得出：细胞涂片诊断恶性胸、腹腔积液的阳性率明显低于最终结果，也明显低于石蜡包埋，差异均有统计学意义；石蜡包埋与最终结果比较，差异无统计学意义。细胞涂片诊断恶性胸、腹腔积液的敏感性、特异性、阳性预测值和阴性预测值明显低于石蜡包埋。

(本文图1见封三)

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R730.4

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