音乐电针头穴透刺法对缺血性脑卒中后抑郁大鼠行为学及脑组织NE、5-HT含量的影响*

梅 成,赵晶媛，段国相,章一鸣,邹天雨

(黑龙江省中医药科学院，黑龙江 哈尔滨 150040)



音乐电针头穴透刺法对缺血性脑卒中后抑郁大鼠行为学及脑组织NE、5-HT含量的影响*

梅 成,赵晶媛，段国相,章一鸣,邹天雨

(黑龙江省中医药科学院，黑龙江 哈尔滨 150040)

目的：对比研究音乐电针头部透穴针刺法对缺血性卒中后抑郁(PSD)大鼠脑内去甲肾上腺素(NE)及5-羟色胺(5-HT)表达的影响，为临床治疗卒中后抑郁患者提供诊疗思路。方法：选取健康大鼠，随机分为针刺组、西药组、模型组和空白组。应用线栓法联合孤养和慢性应激刺激制备复合型卒中后抑郁大鼠模型。针刺组采用百会透刺太阳连接音乐电针治疗。西药组采用盐酸氟西汀溶液灌胃治疗。治疗3周后处死，进行指标检测，观察各处理方法对模型大鼠NE、5-HT的影响。结果：治疗前各PSD模型组大鼠神经功能评价无明显差异。治疗后检测大鼠脑内5-羟色胺、去甲肾上腺素含量均改善明显，针刺组与模型组对比具有显著性差异(P<0.05)，且针刺组与西药组对比无明显差异(P>0.05)。结论：本实验中两种治疗方法均能够调节PSD模型大鼠脑内去甲肾上腺素与5-羟色胺之间的平衡,证明音乐电针头部透穴针刺疗法对脑卒中后抑郁症模型大鼠具有确定疗效。

缺血性脑卒中;抑郁；音乐电针；头穴透刺法

卒中后抑郁症(Poststrokedepression，PSD)属于脑血管意外后经常出现的症状。这种症状在脑血管意外后出现率为20%～50%。PSD的发生可以使神经功能恢复的速度减缓，提高病患的死亡率，严重影响脑卒中患者的生存质量。有研究证明，PSD的出现与去甲肾上腺素(NE)、5-羟色胺(5-HT)两者之间的平衡失调有关[1]。卒中后抑郁动物模型的制备技术逐步完善，为精确研究卒中后认知功能损害奠定了基础。

本研究通过线栓法联合孤养和慢性应激刺激制备复合型卒中后抑郁(PSD)大鼠模型。模型制备成功后对PSD模型大鼠的行为学变化以及脑内海马区NE和5-HT含量变化进行观察。经仪器测出含量变化后，对比观察通过音乐电针头穴透刺处理对于PSD大鼠的作用，为临床治疗提供依据。

1 材料与方法

1.1 实验动物

选取健康的雄性清洁级SD大鼠80只，体质量(200±20)g，合格证编号：SCXK(鲁)2014-0019。将新购进的SD大鼠饲养于恒温饲养室内。调整温度区间(18℃～25℃)、湿度区间(35±2)%。采用自然光，允许大鼠自由食水。观察饲养7天，各笼大鼠反应正常，准备开始实验。为提高术后存活率，各组大鼠于手术前后12h内禁食不禁水。

1.2 模型制备

参照相关文献，采用线栓法[2]联合孤养和慢性应激刺激制备复合型卒中后抑郁(PSD)大鼠模型。应用浓度为10%的水合氯醛(体质量10ml/kg)，将麻醉药物注射于腹腔内，麻醉成功后开始制备大鼠局灶性脑缺血模型。

复合模型制备方法：将成功制备的局灶性脑缺血大鼠模型转入小鼠笼内，继续为期16天的单独饲养。在术后7天内相继给予中度不可预测应激处理。刺激方法包括：电击足底，热、冰刺激，钳尾，断食、水，昼夜颠倒，摇摆，以制备脑卒中后抑郁大鼠复合模型[3]。模型评定标准：Longa5分法[4]。评定完毕后，依据评分结果，对模型动物低于2分者进行筛选剔除。将符合实验标准的模型大鼠进行随机分组。分为针刺组、西药组、模型组、空白组，每组各20例。

1.3 实验材料

安迪牌针灸针：规格：0.25mm×25mm。音乐电针仪：ZJ-12H型音乐电针仪,中国针灸学会，哈尔滨致厚医疗器械有限公司[5]。盐酸氟西汀胶囊:百优解,国药准字J20080016,礼来苏州制药有限公司分装。多样品超声波细胞粉碎机：宁波新艺超声设备有限公司。高效液相色谱仪：Waters510，WATERS公司。电化学检测器测定仪：Waters464，WATERS公司。

1.4 治疗方法

针刺组采用“百会”穴透刺“太阳”穴。穴位选择根据《大鼠穴位图谱》[6]确定，“百会”穴位于大鼠顶骨中点、“太阳”穴位于大鼠眼外眦与耳之间连线近1/3处。将模型大鼠置于固定器中，单手扶住大鼠背部，使大鼠处于安静、清醒状态，不加束缚带固定[7]。去除大鼠穴位周围体毛，消毒，用毫针由“百会”穴向“太阳”穴方向斜刺5～10mm，完成另外一侧针刺后将两支针柄通过导线与音乐电针仪相连接，选取抗抑郁音乐处方。刺激强度以针灸针柄微微颤动、大鼠不嘶叫、挣扎，保持安静为度，每日1次，每次20min。

西药组给予药物灌胃治疗[8]，将盐酸氟西汀胶囊生理盐水溶液按2mg/kg·d-1剂量给药，每日1次；模型组给予等量生理盐水灌胃，每日1次；空白组不做任何处置[1]。

1.5 疗效评价

1.5.1 糖水消耗实验 训练各组大鼠饮用蔗糖水，浓度10g/L，初始48h用10g/L蔗糖水替换自来水，接着禁食、水20h，继而予10g/L蔗糖水饮用后计算24h饮用量。神经功能评价时间：脑卒中后第7、14、21天[9]。

1.5.2 敞箱实验 评价各组大鼠在5min中的活动情况。评价项目选择：中央格内停留的时间。方格间穿行次数标准：3足以上踏入邻格。起立修饰次数标准：双前肢离开地面1cm以上。评价时间：模型制备成功后第7、14、21天。

1.5.3NE和5-HT的含量测定 各组大鼠处理3周后用断头法处死。冰盘上迅速分离脑组织，提取左侧海马[10]，称重后加入0.1mol/LHClO4300μL(4℃预冷)，应用超声粉碎器在冰浴条件下超声匀浆30s，转速为11 000转/min，完毕取上清液20μL进样。采用Waters510泵高效液相色谱系统、Waters464电化学检测器测定NE和5-HT含量。

1.6 统计学处理

2 结果

模型组大鼠各个时间点对比，糖水摄入减少，证明造模成功。西药组和针刺组与模型组比较，糖水摄入增多，有差异性(P<0.05)，证明治疗方法有效。针刺组与西药组比较治疗效果无明显差异(P>0.05)。见表1。

表1 各组大鼠蔗糖水消耗量的变化

模型组大鼠各个时间点对比，运动量减少，证明造模成功。西药组和针刺组与模型组比较，水平、垂直运动增多，有差异性(P<0.05)，证明治疗方法有效。针刺组与西药组比较治疗效果无明显差异(P>0.05)。见图1。

图1 各组大鼠运动能力评分的比较

模型组大鼠与空白组对比，具有差异性(P<0.05)，证明造模成功。西药组与针刺组与模型组比较，NE含量具有差异(P<0.05)，证明治疗方法有效。针刺组与西药组比较NE含量无明显差异(P>0.05)。见表2。

表2 各组大鼠脑组织NE含量的比较

模型组大鼠与空白组对比，具有差异性(P<0.05)，证明造模成功。西药组与针刺组与模型组比较，5-HT含量具有差异(P<0.05)，证明治疗方法有效。针刺组与西药组比较5-HT含量无明显差异(P>0.05)。见表3。

表3 各组大鼠脑组织5-HT含量的比较

治疗前各PSD模型组大鼠量化分级评分无明显差异，治疗后检测去甲肾上腺素、5-羟色胺含量，各治疗组大鼠均有明显改善，针刺组与模型组对比有显著性差异(P<0.05)，且针刺组与西药组对比无明显差异(P>0.05)。

3 讨论

现代医学认为大脑神经突触间的递质浓度相对或绝对不足，而导致整体精神活动和心理功能的全面性低下状态[11]。本研究通过对大鼠经过21天的应激刺激后制备出的抑郁症模型大鼠海马NE、5-HT的测定，发现其NE、5-HT及代谢产物总量减少。

电针疗法以传统针刺疗法为基础，加入电极刺激。现在常用的脉冲电针仪能够形成周期性波形，电刺激机体，以增强针感。但在临床治疗中后期，患者机体会因对电针刺激频率逐渐适应而出现疗效衰减。音乐电针疗法通过将电针治疗与音乐治疗结合起来，把音乐的节律转化为不停变化的频率和波形。故音乐电针效果稳定，无疗效衰减的现象。而且由音乐电刺激产生的针感舒适、疗效显著，患者乐于接受。将音乐从被动欣赏转化为生理效应的主动治疗。通过音乐电波激发穴内和经上的经气，使之沿经而行，配合透刺疗法，使气至病所达到更佳的治疗目的。

本实验采用音乐电针结合头穴透刺法治疗中风后抑郁症，其机理可能是电流形成的电场、磁场，通过兴奋5-HT能神经元上行纤维，激活“边缘系统-中脑功能环路”[12]，使该环路形成一个良性循环，使杏仁核、下丘脑、海马、前额叶皮质等与情绪相关部位的5-HT持续释放增加，达到了改善抑郁状态的目的。本研究证实了音乐电针透刺疗法治疗中风后抑郁症模型大鼠具有确定疗效，这对以后临床治疗疾病、提高疗效具有重要参考意义。

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黑龙江中医药中青年科技攻关项目，编号：ZQG-008(2014年)。

梅成(1970-)，男，主任医师，从事神经系统疾病康复研究。

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2016-05-15