茶汤中啶虫脒残留及其安全性评估

杨永梅，陈 琦

（1.黄山学院 化学化工学院，安徽 黄山245041；2.黄山出入境检验检疫局，安徽 黄山245000）

茶汤中啶虫脒残留及其安全性评估

杨永梅1，陈 琦2

（1.黄山学院 化学化工学院，安徽 黄山245041；2.黄山出入境检验检疫局，安徽 黄山245000）

选择啶虫脒含量超出欧盟限量的茶叶为样品，模拟人们日常泡茶过程，采用沸水浸泡的方法，讨论茶叶浸泡的时间对农药溶出量的影响，以溶于茶叶水中啶虫脒的最大浓度，计算出人通过饮用此类茶汤而进入人体的最大农药残留量，考察饮茶是否安全。实验结果表明，啶虫脒的计算数值为0.003mg/kg，远小于欧盟食品安全局对啶虫脒的ADI数值（0.06mg/kg）。

茶汤；溶出浓度；农药残留

0 前 言

茶叶作为一种饮品历史悠久。近年来，茶叶对外贸易不断扩大，随着生活水平的不断提高，人们越来越重视食品的质量安全和卫生，而茶叶作为出口量较大的食品，其安全性备受国外消费者的关注。同时，茶叶进口国家对茶叶农药残留限量的要求日益增高[1]。中国、越南和日本等国茶叶欲出口到欧盟，受到其茶叶委员会的监控也越来越严格。欧盟在2014年8月25日正式生效实施了法规EU87/ 2014。此法规把茶叶中的异丙隆和啶虫脒等多种农药的残留限量要求严格程度又增加了一倍。我国茶叶出口企业由于欧盟等国外市场不断提高的要求而造成了巨大的经济损失[2]。数据显示我国茶叶在2014年出口仅为30.1万吨，而2013年为32.4万吨。2015年各茶类出口继续出现全面的下降趋势[3]。这使得我国出口欧盟的茶叶量大幅度缩减，同时我国也会因为农残超出标准将被逼迫退出欧盟市场。茶叶是一种日常饮料，人们并不是将其全部食用入人体，而只是饮用其茶叶汤，只有在茶汤中的农药、重金属及其他有害物质才会真正危害人体健康，这是茶叶作为食品的特殊之处。所以在考察茶叶的安全性时就应采取不同的方式，除了对其最终残留量，消解动态以及安全使用标准的研究外，还应考察真正溶入茶汤中的农药量。目前，对于茶叶、土壤和水等基质中农药残留量的研究比较多，本文对人们冲泡茶的过程进行模拟，研究茶汤中农药溶出浓度及其影响因素，并对饮用茶汤的安全性进行评估，此类的报道相对还比较少。

1 实验部分

1.1 实验药品仪器

实验药品见表1。

表1 药品及纯度

有机茶购于安徽黄山茶城；实验用水为超纯水。实验仪器见表2。

1.2 实验过程

1.2.1 茶叶样品啶虫脒前处理步骤

（1）提取

分析天平称取2个茶叶样品2.000g在称量纸上，倒在80.0mL塑料带塞子的离心管中，分别标记为样品1和样品2。加入40.00mL乙睛，15000r/min振荡提取1.0min，加人5.0g氯化钠，再均匀搅拌提取1.0min，5000r/min离心机上离心分离5.0min，一次性吸管吸取上层澄清溶液20.00mL于洁净塑料离心管中，在旋转蒸发仪中（40℃水浴）使溶液浓缩到大约1.0mL，备用。

表2 仪器及来源

（2）净化

取两只Sep-Pak Vac净化柱，上部加入大约2.0g无水硫酸钠，把净化柱放在鸡心瓶上，先用4.00mL乙腈：甲苯(3:1)溶液对柱子进行活化，当液面到达Na2SO4的最上部时，用一次性吸管把样品1和2的浓缩液滴加到净化柱上，再用新的鸡心瓶接洗脱液。然后每次用2.00mL乙腈：甲苯(3:1)溶液洗涤3次，把洗涤液也转移到柱中。柱子分别加上50.0mL储液器，用25.00mL乙腈：甲苯(3:1)溶液提取农药等，将这些提取液都合并在鸡心瓶里，然后在旋转蒸发仪 （40℃水浴）上浓缩至溶液剩余约0.50mL。将浓缩液在氮吹至干燥，快速加入1.00mL的乙腈：水（3：2）的溶液溶解此提取物质，振荡均匀，过0.2μm有机过滤头，用液相色谱串联质谱仪检测。

（3）测定条件

a.色谱柱：Agilent XDB-C18 4.6μm×50mm。

b.液相的洗脱程序见表3。

表3 液相洗脱程序

1.2.2 茶汤浸泡步骤

另取上述两个茶叶样品，分别称取2.000g，倒在50.0mL带塞子的塑料离心试管中，加入25.0mL沸水，放置1.0min，盖上盖子用5000转/min的转速在离心机上分离5min，移液枪吸取上层澄清液1.0ml，作为样品1；茶渣中再用移液枪补加1.0ml沸水浸泡0.5h，5000转/min离心分离5min，移液枪吸取上层清液1.0ml，作为样品2；茶渣中再加入1.0ml沸水浸泡0.5h，5000转/min离心分离5min，再用移液枪取上层清液1.0ml，作为样品3；重复上述操作并放置过夜，作为样品4。用0.22μm水相过滤头过滤，用液相色谱-串联质谱仪检测。此实验均平行测定3次。

2 结果与讨论

2.1 茶叶样品的液相色谱-质谱检测结果

图1 样品1液相色谱-质谱图

图2 样品2液相色谱-质谱图

通过观察样品的液质谱图可知，此2个样品经相同的前处理方法，在相同的色谱条件下同一批次检测，其中啶虫脒含量分别为207.08ng/ml，38.00ng/ ml，而欧盟对我国茶叶中啶虫脒限量为0.05mg/kg[5]，检测结果表明此两个样品中啶虫脒含量均超出欧盟限量，不能出口。

2.2 茶叶的浸泡时间对溶于水中啶虫脒量的影响

图3 啶虫脒浓度随茶叶浸泡时间变化曲线图

分别将样品1、2、3和4以Aglient1200-6410B高效液质检测，察看不同浸泡时间的茶叶样品茶汤中的啶虫脒含量，并作图3。由图可知浸泡时间为1min时，茶汤中啶虫脒的含量为11.014ng/ml和0.974ng/ml。浸泡时间小于0.5h时，啶虫脒的含量有较明显的增加，由于浸泡时间较少时还有农药未浸泡溶出。但农药残留浓度总体都有随浸泡时间的延长逐渐降低的趋势，浸泡放置过夜之后茶汤中农药含量极低，这可能是啶虫脒在沸水及长时间浸泡的共同影响下发生了水解[6]。所以建议饮茶时初次30min浸泡的茶汤弃去不予饮用。

2.3 安全性评价

表4 茶叶安全性评价计算表

英国为世界茶叶日消费量最高国家，按照其用量即每人每天饮茶13.0g计算，每天每人喝10杯茶，每杯250ml，以样品茶汤中啶虫脒最高溶出浓度为参考，计算出通过饮茶可能进入人体的农药最大量（1人/日）。把数据再与欧盟食品安全局农药的毒性资料中每日允许摄人量（ADI值）进行比较，则可以对饮用此种茶叶的安全性进行评估。从表4可知啶虫脒的计算数值为0.003mg/kg，远小于欧盟食品安全局对啶虫脒的ADI数值（0.06mg/kg）[7]。

3 结 论

采用沸水浸泡的方法，模拟人们日常泡茶过程，考察了茶叶浸泡时间对溶出浓度的影响，以茶汤中啶虫脒的最大溶出量，进而计算出通过饮用茶汤而进入人体的最大农药残量。结果表明啶虫脒的计算数值为0.003mg/kg，远小于欧盟食品安全局对啶虫脒的ADI数值（0.06mg/kg）。因此，饮用此类茶叶是安全的，并且建议饮茶时初次30min浸泡的茶汤弃去不予饮用。

[1]陈宗懋,姜亚萍.欧食品安全局对吡虫啉和啶虫脒的新评价[J].中国茶叶,2014(2):1.

[2]马维,刘树兴,等.茶叶中啶虫脒残留基体标准样品的制备及测定[J].食品科学，2016,37(2):182-186.

[3]项丽.茶汤中农药残留及其安全性评估研究[D].合肥：安徽农业大学,2005:3-5.

[4]王运浩,万海滨,等.拟除虫菊酯农药在茶叶中应用的安全性评价[J].中国环境科学，1997，17（2）：176-179.

[5]Anoop Kumar Barooah.Pesticide Residues in Tea and TheirIntake AssessmentUsing Brew Factor[J].Tea Science,2011，31（5）：419-426.

[6]谢国红,刘国光.啶虫脒水解动力学研究[J].Anhui Agri Sci. 2007,35(30):9629-9630.

[7]庄无忌.最新欧盟茶叶中农药最高残留限量[J].农药科学与管理,2000,21(4):24-28.

责任编辑：胡德明

Safety Assessment of Acetamiprid Residues in Tea

Yang Yongmei1,Chen Qi2
(1.School of Chemistry and Chemical Engineering,Huangshan University,Huangshan 245041,China; 2.Huangshan Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau,Huangshan 245000,China)

In this paper,tea with an acetamiprid concentration beyond the detection limit of EU (European Union)is chosen as samples.The tea is soaked in water under the condition of 100℃,which is the same as daily tea making.The influence of the infusing time on the pesticide concentration is discussed.And based on the maximum concentration of acetamiprid dissolved in the tea,the maximum pesticide residue absorbed by the body is calculated to evaluate its safety.It is shown that the sum of acetamiprid is 0.003 mg/kg,and the amount is far less than acetamiprid’s ADI value (0.06mg/kg)set by European Food Safety Authority(EFSA).

tea;dissolution rate;pesticide residue

TS207.7

A

1672-447X(2016)05-0032-03

2016-05-27

黄山学院教学研究项目（2015JXYJ13）；安徽省教育厅自然科学研究项目（KJHS2016B05）

杨永梅（1979-），黑龙江五常人，硕士，黄山学院化学化工学院讲师，研究方向为分析化学。