肺鳞癌中磷脂酶Cε和核因子-κB p65的表达及意义

吕红琼 谢 玲 倪明立

(郑州大学附属洛阳中心医院肿瘤二科，河南 洛阳 471000)



肺鳞癌中磷脂酶Cε和核因子-κB p65的表达及意义

吕红琼 谢 玲 倪明立

(郑州大学附属洛阳中心医院肿瘤二科，河南 洛阳 471000)

目的 应用免疫组化方法检测肺鳞癌术后组织中磷脂酶Cε1(PLCE1)、核因子(NF)-κB p65的表达，探讨其临床价值。方法 63例行肺鳞癌根治手术患者的临床资料及术后蜡块组织作为研究组，无肿瘤的支气管断端22例作为对照组。应用免疫组化方法检测两组中PLCE1和NF-κB p65的表达。结果 研究组PLCE1和NF-κB p65表达的阳性率明显高于对照组。研究组PLCE1和NF-κB p65的表达均与分化程度、肿瘤最大径和增殖细胞核抗原(PCNA)标记的增殖指数密切相关。研究组NF-κB p65的表达与淋巴结转移明显相关性，而PLCE1与淋巴结转移无明显相关性。相关分析显示研究组PLCE1和NF-κB p65的表达无相关性。结论 肺鳞癌术后组织中PLCE1和NF-κB p65高表达，二者对肿瘤的形成和进展可能具有一定作用。PLCE1和NF-κB p65之间无明显协同作用。

肺鳞癌；磷脂酶Cε(PLCE)1；核因子(NF)-κB p65；免疫组化

肺鳞癌病变的形成与多种蛋白表达失调有关。磷脂酶Cε1(PLCE1)是PLC基因编码的一种正向同源蛋白，是磷脂酰肌醇信号通路中的关键酶〔1,2〕；近年研究发现其在肿瘤中异常表达，可能对肿瘤的多种功能有一定的调节作用〔3,4〕。核因子(NF)-κB p65的异常表达对促进肿瘤进展有一定作用〔5,6〕。本研究观察肺鳞癌中PLCE1和NF-κB p65的表达，分析其临床价值及相关性。

1 资料与方法

1.1 一般资料 2012年1月至2015年12月我院行肺鳞癌根治手术的患者作为研究组，共63例，术后留取蜡块组织，临床资料完整。其中男34例，女29例；年龄43～85岁，平均61.3岁。均经再次切片并经病理医师证实。无肿瘤的支气管断端的22例黏膜组织作为对照组，其中男11例，女11例；年龄46～78岁，平均59.8岁。两组常规资料无明显差别。

1.2 免疫组化方法检测PLCE1和NF-κB p65的表达 应用免疫组化SP法进行检测，应用二氨基联苯胺(DAB)显色，操作中做好质量控制工作。

1.3 PLCE1和NF-κB p65结果判定方法 PLCE1和NF-κB p65的阳性定位在细胞质，选择上皮细胞集中且染色密集的区域进行观察，共选择5个高倍视野(400倍)。阳性根据以下两个方面：①阳性细胞数：<5%为0分；5%～25% 1分，26%～50% 2分，51%～75% 3分，≥76% 4分。②染色强度：无色为0分，浅棕黄色为1分，棕黄色为2分，棕褐色为3分。两者相乘作为最终判定结果。0～4分为阴性，5～12分为阳性。

1.4 统计学方法 应用SAS6.12统计软件进行χ2检验、线性相关分析。

2 结 果

2.1 两组中PLCE1和NF-κB p65表达的比较 两组中PLCE1和NF-κB p65表达的阳性率差别有统计学意义。见表1。

表1 两组中PLCE1和NF-κB p65表达的比较〔n(%)〕

2.2 研究组中PLCE1和NF-κB p65在不同临床特征中的比较 研究组中PLCE1和NF-κB p65的表达均与分化程度、肿瘤最大径和增殖细胞核抗原(PCNA)标记的增殖指数密切相关。研究组中NF-κB p65的表达与淋巴结转移密切相关，而PLCE1与淋巴结转移无明显相关性。见表2。

表2 研究组中PLCE1和NF-κB p65在不同临床特征中的比较〔n(%)〕

2.3 研究组中PLCE1和NF-κB p65的相关性 研究组中PLCE1和NF-κB p65的表达无明显相关性(P>0.05)。

3 讨 论

肺鳞癌是最具代表性的多发生于吸烟人群的恶性肿瘤。目前的研究对鳞癌分子病理学改变及相关调控蛋白的认识远远落后于腺癌〔7〕。近来研究已发现了少数具有潜在临床指导意义基因和蛋白〔8〕。PLCE1是磷脂酶C家族的一种同工酶，具有位于C端的RAS结构域和位于N端的CDC25结构域〔9,10〕。PLCE1其激活后可能在胞膜到胞核的信号转导过程中发挥作用，并有效调节细胞的生长、分化和增殖，同时细胞骨架也有一定的影响〔11,12〕。有研究认为PLCE1能通过催化多磷酸肌醇如磷脂酰肌醇4,5-二磷酸盐水解，产生第二信使三磷酸肌醇和二脂酰甘油，促进钙离子从细胞内释放，并能引起蛋白激酶C的过度表达，实现细胞信号的转导，调控基因的表达〔13,14〕。NF-κB最初是从B细胞核的抽提物中发现的免疫球蛋白，是Rel蛋白家族的成员，其家族共有5个成员，包括P65、RelB、C-Rel、P50/P105、P52/P100，这些蛋白质都有一个大约由300个氨基酸组成的氨基末端〔15,16〕。NF-κB p65是家族中的典型功能蛋白，也是转录复合体。有研究认为NF-κB p65结合位点可以接受多种免疫刺激，并通过一个或多个信号途径激活蛋白激酶，同时激活相关级联基因〔17〕。NF-κB p65在部分肿瘤中高表达〔5〕。 本研究提示PLCE1和NF-κB p65异常表达可以促进肿瘤的发生。肺鳞癌的发生与腺上皮的鳞化有关，鳞化主要源于多种外源性刺激，如吸烟、粉尘吸入等，腺上皮鳞化后，上皮异型增生，发生鳞癌，此过程伴有PLCE1和NF-κB p65异常表达的调节。本文结果提示PLCE1和NF-κBp65二者参与肿瘤的分化进程、肿瘤生长及细胞增殖〔18,19〕。PLCE1包含几种Ras的结合区，此区域可以结合Ras家族的小G蛋白，成为GTP的效应器，进而有效地调节肿瘤细胞的增殖、分化、凋亡和血管再生〔20〕。分化是肿瘤内在的因素，因此二者高表达可以在一定程度上阻止细胞的成熟进程，肿瘤处于幼稚分化的某一阶段，此时肿瘤细胞异型性增加，肿瘤失控性增生明显，肿瘤处于活跃状态中。NF-κB p65异常表达可能是转移相关的蛋白，而PLCE1可能与转移的关系不明显。Cui等〔21〕认为PLCE1上调后可以促进NF-κB p65的高表达，二者是否具有协同作用可能与肿瘤的特异性有关。也有研究认为PLCE1可能与P53等基因表达的作用具有相关性〔22〕，但是PLCE1的具体调节有待更多实验证实。

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〔2015-03-25修回〕

(编辑 苑云杰)

吕红琼(1978-)，女，硕士，主治医师，主要从事恶性肿瘤研究。

R734

A

1005-9202(2016)22-5626-03；

10.3969/j.issn.1005-9202.2016.22.060