JWA rs7038功能性变异与鳞状细胞食管癌发病的相关性

施东辉 刘国锋 黄利荣 王林毛 宋 曙

(南通大学第四附属医院 盐城市第一人民医院胸心外科，江苏 盐城 224001)



JWA rs7038功能性变异与鳞状细胞食管癌发病的相关性

施东辉 刘国锋 黄利荣 王林毛 宋 曙1

(南通大学第四附属医院 盐城市第一人民医院胸心外科，江苏 盐城 224001)

目的 探讨环境应答基因JWA基因多态性对食管鳞癌易感性的影响。方法 采用1∶1配对病例对照研究，应用条件LOGISTIC回归模型，探讨JWA 基因rs7038功能性变异对食管鳞癌易感性的影响。结果 三种不同遗传模型下JWA基因SNP位rs7038与食管鳞癌发生均无关联。未发现rs7038与吸烟饮酒间未存在交互作用。结论 虽然未发现JWA基因rs7038功能性遗传变异与食管鳞癌的相关性，但是不排除该单核苷酸多肽性(SNP)位点可能与其他SNP位点或环境因素联合作用共同影响肿瘤发生的可能。

JWA基因；单核苷酸多态性；食管鳞状细胞癌

环境应答基因，也称为环境易感基因，是人体对不利环境刺激产生特定反应的基因，其多态性可造成人群遗传易感性的差异。目前国际上普遍认同的环境应答基因包括DNA修复基因、代谢酶基因、细胞周期调节基因等。JWA基因是周建伟〔1〕发现的新环境应答基因，外界环境的刺激通过影响JWA基因表达，继而参与细胞的分化和凋亡过程。汤唯艳等〔2，3〕报道在中国江苏人群中JWA基因启动子-76G/C突变会增加人群中患消化道肿瘤的危险性，尤其是在男性吸烟患者当中风险更大。朱慧〔4〕也报道了JWA-76G/C和454C/A突变会增加罹患宫颈癌的风险，该结论与Li等〔5〕研究结果一致。本课题对JWA基因单核苷酸多态性(SNP)是否与食管鳞癌发生有关进行探索。

1 资料与方法

1.1 一般资料 福建医科大学附属漳州市医院经食管癌组织病理诊断确诊为食管鳞癌的新发病例295例作为病例组。按1∶1频数匹配的方式选择与病例同性别、年龄相差≤3岁、同居住地，且来自医院同时期的健康体检者295例作为对照组。两组在性别、民族方面均衡可比(P>0.05)，而在婚姻状况，文化程度，人均收入，职业方面差异有统计学意义(P<0.05)。

1.2 调查方法 采用统一编制的调查表，由经过培训考核合格的调查员采用面对面问卷及由调查员填写的方式来收集调查表资料。

1.3 实验方法 经患者及其家属知情同意后，静脉采集食管鳞癌患者外周血样本，经过乙二胺四乙酸(EDTA)抗凝处理，-80℃冰箱保存。下载对应中国人JWA基因的SNP数据，运用Haploview软件的tagger程序挑选标签SNPs(tagSNPs)。采用北京百泰克公司的DNAzol试剂提取全血DNA；对全血提取的DNA用MALDI-TOF-MS质谱检测SNPs。

1.4 统计学方法 采用SPSS18.0统计软件进行Logistic回归模型分析和协方差分析。

2 结 果

2.1 JWA基因5个SNP位点分型结果 SNP位点rs7038三种分型两组间分布无统计学意义。见表1。SNP位点rs6803501、rs11542221、rs11542218、rs1802400均未发现存在多态位点。

表1 两组JWA基因SNP位点分型结果〔n(%),n=295〕

2.2 JWA基因SNP位点rs7038与食管鳞癌的关联性 对照组中基因型实际频率与基因型理论频率无统计学意义(χ2=2.261，P=0.133)，说明该人群中JWA 基因rs7038基因型频率符合Hardy-Weinberg遗传平衡定律，具有人群代表性。将吸烟、饮酒、饮茶，喜食烫食、硬食、食用粗粮，食用新鲜蔬菜，食用新鲜水果，肿瘤家族史及rs7038变量拟合多因素条件Logistic 回归方程，分析3种不同遗传模型下JWA基因SNP位rs7038与食管鳞癌的关系，结果显示，3种不同遗传模型下JWA基因SNP位rs7038与食管鳞癌发生无相关性。见表2。

2.3 JWA基因rs7038与环境交互作用 JWA基因作为新的环境应答基因，对其rs7038多态性与吸烟、饮酒的交互作用进行协方差分析，结果提示rs7038与吸烟、饮酒间无交互作用。见表3、表4。

表2 3种遗传模型下SNP位点rs7038与食管鳞癌的关系

1)经性别、年龄、民族、婚姻、文化程度、收入、职业调整，下表同

表3 吸烟与rs7038的交互作用

3 讨 论

JWA基因是从人原代气管、支气管上皮细胞中分离克隆得到的新细胞骨架样基因，在其启动子序列含有佛波酯(TPA)反应元件、热休克反应元件、Hemin反应元件、核转录因子(NF)κB反应元件和维甲酸反应元件半位点〔6〕。曹海霞等〔7〕发现，在全反式维甲酸、三氧化二砷和TPA等诱导分化剂处理后的NB4细胞中JWA蛋白表达均上调，同时经JWA反义核酸处理后的经TPA诱导的NB4细胞中JWA基因表达和细胞分化凋亡能力均受到抑制，提示诱导分化剂可作用于JWA基因启动子区域的顺式元件调节JWA基因表达，从而影响细胞的分化和凋亡。

当暴露于不利外界环境时，机体细胞水平会发生应激反应，诱导合成热休克蛋白(Hsp)抵抗不利环境的刺激。体外实验发现在诱导分化剂及热应激状态下，JWA和Hsp70蛋白表达上调，并且两种蛋白变化趋势一致〔8〕。王南平等〔9〕同样发现在氧化应激作用下，JWA蛋白和Hsp27同步增加。Zhu等〔10〕的研究结果也证实了JWA参与机体对外界不利环境刺激的调控。那么，JWA基因是通过何种机制参与细胞应激反应呢？有研究认为JWA可能与Hsp70蛋白相似，参与细胞损伤修复〔11〕。在苯并芘诱导的细胞损伤修复过程中，与正常HeLa细胞对比，JWA蛋白表达缺陷细胞的DNA修复速率较慢，推测，JWA可能参与细胞损伤后修复〔12〕。JWA基因的作为环境应答基因，其序列的变异有可能影响机体对环境刺激的应答。另有研究发现JWA基因与肿瘤转移有关联〔13〕，也有研究发现术后生存情况较差的食管癌患者，食管癌组织中JWA蛋白表达下调〔14〕。由此可见，关于JWA基因rs7038多态性与肿瘤的关系尚存在争议。王卓等〔15〕对有关JWA基因的SNP位点与食管癌的易感性进行研究，结果报道在JWA基因723T/G(rs7038)多态性会增加罹患食管癌的危险性。然而，本研究中尚未发现JWA基因rs7038多态性与漳州地区食管鳞癌发生有关，同样，在基因-环境交互作用中也未发现rs7038与吸烟饮酒间存在交互作用。在朱慧〔4〕的研究中也未发现JWA基因723T/G(rs7038)突变与宫颈癌发病有关。同样，在结直肠癌的研究中未发现723T/G(rs7088)突变与肿瘤的发病有关，也没有发现吸烟饮酒与JWA基因多态性的交互作用〔16〕。

1 周建伟.JWA基因通过NFI结合位点特异性应答氧化应激所致的DNA损伤〔J〕.毒理学杂志,2005;19(S1):181-3.

2 汤唯艳,宋 雪,朱立伟,等.JWA基因多态性与紫杉类药物对晚期胃癌化疗疗效相关性的研究〔J〕.实用临床医药杂志,2012；16(23):12-4.

3 Tang WY，Wang L，Li C，etal.Identification and functional characterization of JWA polymorphisms and their association with risk of gastric cancer andesophageal squamous cell carcinoma in a Chinese population〔J〕.J Toxicol Environ Health A，2007；70(11)：885-94.

4 朱 慧.JWA基因-76G>C和454C>A与宫颈癌的相关性研究〔D〕.南京：南京医科大学，2008.

5 Li CP，Zhu YJ，Chen R，etal.Functional polymorphisms of JWA gene are associated with risk of bladder cancer〔J〕.J Toxicol Environ Health A，2007；70(11)：876-84.

6 夏 薇.对JWA基因功能和结构的初步研究〔D〕.南京：南京医科大学，2001.

7 曹海霞，夏 薇，叶 健，等.JWA参与维甲酸、佛波酯和三氧化二砷诱导急性早幼粒细胞性白血病细胞分化和凋亡的可能机制〔J〕.科学通报，2001；46(23)：1979-84.

8 茆文革,李爱萍,叶健,等.诱导分化联合热休克处理对K562细胞JWA和热休克蛋白70表达的影响〔J〕.中华劳动卫生职业病杂志,2004；22(1):60-3.

9 王南平,周建伟,李爱萍,等.JWA基因参与细胞氧化应激的机制研究〔J〕.中华劳动卫生职业病杂志,2003；21(3):212-5.

10 Zhu T，Chen R，Li AP，etal.Regulation of a novel cell differentiation-associated gene，JWA during oxidative damage in k562 and mcf-7 cells〔J〕.J Biomed Sci，2005；12(1)：219-27.

11 Zhu T，Chen R，Li A，etal.JWA as a novel molecule involved in oxidative stress-associated signal pathway in myelogenous leukemia cells〔J〕.J Toxicol Environ Health A，2006；69(15)：1399-411.

12 顾灯安,李爱萍,朱 婷,等.苯并(a)芘作用下人胚肺细胞JWA基因的表达及其与DNA损伤修复的关系〔J〕.中华预防医学杂志,2005；39(3):187-90.

13 Chen Y，Huang Y，Huang Y，etal.JWA suppresses tumor angiogenesis via Sp1-activated matrix metalloproteinase-2 and its prognostic significance in human gastric cancer〔J〕.Carcinogenesis，2014；35(2)：442-51.

14 史国振，谈永飞，葛志军，等.JWA基因对食管鳞癌Ecal09细胞增殖、凋亡及侵袭的影响〔J〕.江苏医药，2013；39(20)：2383-5.

15 王 卓,高长明,吴建中,等.JWAT723G多态性与胃癌易感性〔J〕.中国肿瘤外科杂志,2012；4(03):148-50.

16 杨 桓.主要乙醇代谢酶编码基因及JWA基因单核苷酸多态性与结直肠癌遗传易感性的关联研究〔D〕.重庆：第三军医大学，2009.

〔2015-02-28修回〕

(编辑 苑云杰)

江苏省科技项目(No.BK2012670)

施东辉(1968-)，男，硕士，副主任医师，主要从事食管肿瘤、肺部肿瘤研究。

R735.1

A

1005-9202(2016)22-5610-03；

10.3969/j.issn.1005-9202.2016.22.052

1 病理科