液相色谱-串联质谱测定法测定火锅调料中5种生物碱成分

黄　鑫　哈密地区食品药品检验所

液相色谱-串联质谱测定法测定火锅调料中5种生物碱成分

黄鑫哈密地区食品药品检验所

随着我国社会经济的不断发展，人们对于食品安全问题逐渐重视，也提出了一系列的快速检测方法以保证食品的安全。近年来很多商家为了经济利益，会在火锅调料添加多种生物碱成分，尤其是添加微量的罂粟类生物碱成分，会引起消费者出现精神失常等问题，对此采取了液相色谱-串联质谱方法，对火锅调料中的吗啡、可待因、婴粟碱、那可丁、蒂巴因生物碱成分进行检测。

本文采用Q uECHERS样品前处理技术，提取火锅调料中的5种生物碱成分，利用液相色谱-串联质谱对其含量进行测定，结果显示生物碱成分的线性关系、精密度良好，回收率在73.1%～95.7%，检测限都在0.01 m g/ kg范围内。表明采取该检测方法，不仅检测效率高同时也十分精准，值得推广和研究。

材料方法

仪器与试剂

质谱仪、液相色谱仪、离心机与超纯水机；试剂吗啡、磷酸可待因、盐酸婴粟碱、那可丁、标准品蒂巴因；乙睛、甲酸、甲酸铵均为色谱纯。

色谱条件

将含0.1%甲酸的乙腈作为流动相A相，将100 m m ol/L甲酸氨水溶液与乙腈（1+1）调制成pH=3的溶液为流动相B相，按照0 m in，90%A相、10%B相；0.30 m in，90%A相、10%B相；0.31 m in，80%A相、20%B相；0.25 m in，80%A相、20%B相；2.50 m in，80%A相、20%B相；2.51 m in，90%A相、10%B相；5 m in，90%A相、10%B相的流动相条件进行洗脱，流速控制在0.3 m L/m in。

质谱条件

表1　样品回收率的试验

以上五种生物碱成分的去簇电压分别为97、90、92、95、52；碰撞能量为50、34、38、30、38；其次还包括定量离子、定性离子参数等。标准曲线制备

标准溶液分别称取吗啡、可待因、婴粟碱、那可丁、蒂巴因标准品适量，然后利用0.5%的甲酸溶液，配制成0.1m g/m L的标准储备溶液，将标准储备溶液用含0.5%甲酸的甲醇溶液稀释成0.1μ g/m L的标准溶液。

样品处理

称取2g试样置于50 m L离心管中，分别加入5 m L水、15 m L乙腈、6 g无水硫酸镁、1.5 g的无水醋酸钠，以4 000 r/m in离心1 m in，将上层清夜移至另一只离心管中，加入50 m gPSA、150 m g无水硫酸镁，再以5 000 r/m in离心1 m in，最后由C18小柱进行上层液脱洗，制备合成洗脱液。

结果

5种生物碱成分在指定线性范围内进行回归分析，相关系数都超过0.999 9，表明线性关系良好，见表1。

在3∶1信噪比条件下，五种生物碱成分的检测限均为10 μ g/kg。基质标准溶液（5 ng/m L）持续进行6次进样，峰值面积在0.5%～2.5%范围内的精密度良好；且样品溶液经过稳定性试验较为稳定。

最后通过抽检96批市场火锅调料，一共有6批样品检测出一种或多种吗啡、罂粟类等生物碱成分，对此加强生物碱成分的执法检测非常必要。

3 讨论

针对于火锅底料中生物碱成分的检测，TLC、HPLC等受到方法自身性质的影响，最终检测的灵敏度、准确性等也不同。采取C18小柱净化法，显示5种生物碱成分干扰严重，影响测定效果，最终采取调整A相中的乙腈比例，继而实现色谱条件的优化。

通过对于液相色谱-串联质谱测定法测定火锅调料中5种生物碱成分的分析，发现采取Q uECHERS样品前处理技术对于生物碱成分的提取，要比以往的氯仿萃取法要优化的多，结合PSA净化法可更有效的去除脂肪酸、色素和甾醇等，也大大地降低基质对样品溶液的干扰。