急性小动脉闭塞性脑卒中病人脑微出血与血清转化生长因子-β1的相关性研究

张 金，郝冬琳，何国平



急性小动脉闭塞性脑卒中病人脑微出血与血清转化生长因子-β1的相关性研究

张 金，郝冬琳，何国平

目的 分析急性小动脉闭塞性脑卒中(SAO)病人脑微出血(CMBs)与血清转化生长因子-β1(TGF-β1)的关系。方法 连续选择江苏大学附属武进医院神经内科住院的SAO病人110例，并进行磁共振检查，其中包括常规序列及磁敏感(SWI)序列，详细记录病人的临床资料，检测血清TGF-β1水平。根据SWI序列上无有CMBs分为两组，根据CMBs的程度分组，分析TGF-β1与CMBs的关系。结果 110例SAO病人中，CMBs有40例(36.4%)，其中轻度10例，中度14例，重度16例。CMBs组TGF-β1(70.9±15.6)ng/mL水平高于无CMBs组(51.2±13.2) ng/mL，根据CMBs的程度分组，Spearm相关分析发现,CMBs病变程度与血清TGF-β1呈正相关(r=0.565，P<0.001)；根据Logistics回归分析，矫正年龄、高血压混杂因素，发现TGF-β1(OR=0.281，P=0016)是CMBs的独立相关因素。结论 血清TGF-β1水平与SAO病人CMBs的发生发展有关。TGF-β1的过度表达参与了CMBs病人的血管重构过程。检测血清TGF-β1水平对CMBs的诊断和治疗有重要意义。

小血管闭塞性脑卒中； 脑微出血；转化生长因子-β1；血管重构

脑微出血(CMBs)是颅内微小血管病变所致的，以微小出血为主要特征的一种脑实质亚临床损害[1]。CMBs有较高的发病率，在各类脑血管病病人甚至健康老年人中均有发生，其中，在出血性卒中发生率可达60%；缺血性卒中病人中发生率30%[2-3]。病理学研究证实磁共振上的脑微出血低信号是小血管周围含铁血黄素或吞噬有含铁血黄素的单核细胞沉积，并且CMBs旁的小血管发生了不同程度的结构改变，主要表现为血管壁的增厚[4-5]。血管壁主要由皮细胞，平滑肌细胞及细胞外基质(胶原蛋白、非胶原糖蛋白和蛋白多糖)构成。细胞外基质通过与细胞间的相互作用参与血管重构。CMBs的发病机制目前尚不清楚，可能与颅内小血管的重构有关，然而血清转化生长因子-β1(TGF-β1)是血管重构过程中的关键因子[6]。目前关于血清TGF-β1水平是否与CMBs的发生发展有关，国内外尚无相关报道。本研究选取急性小动脉闭塞性脑卒中(SAO)病人为研究对象，分析SAO病人中CMBs的发病特点及与血清TGF-β1的关系，探讨CMBs的可能发病机制。

1 资料与方法

1.1 研究对象 选择2016年1月—2016年8月于江苏大学附属武进医院神经内科住院的SAO病人110例。男性78例，女性32例，年龄 40岁～80岁。急性小动脉闭塞性脑卒中诊断标准参照2006年韩国改良版TOAST (Trial of ORG 10172 in Acute Stroke Treatment)分型[7-8]，定义为急性发病，临床表现为单纯运动障碍，构音障碍-手笨拙综合征，单纯感觉障碍，共济失调轻偏瘫；头颅磁共振DWI序列上显示深穿支供血区直径小于15 mm 的腔隙性病灶，边界清楚，并且病灶与神经功能缺失一致。所有SAO病人根据SWI序列检查有无CMBs分为两组，CMBs组及无CMBs组。进一步根据CMBs发生数量分别予以计数，轻度：CMBs 1个～2个；中度组CMBS 3个～10个；重度：CMBs >10个，并进一步分为轻度CMBs组，中度CMBs组，重度CMBs组。CMBs诊断标准：SWI序列上质地均一的，圆形或椭圆形直径为2 mm～10 mm低信号缺失，边界清楚、周围无水肿，并排除颅内钙化灶、海绵状血管瘤、小血管流空影及铁沉积等。由一位经验丰富的影像科高年资医师阅片。

排除标准：大动脉粥样硬化病变所致脑梗死；心源性栓子脱落导致的梗死；合并梅毒、结核、结缔组织疾病等病因所致的血管炎性脑损伤； 药物、毒物、各类恶性肿瘤等所致的脑血管病损；因心理因素及幽闭恐惧症等原因不能完成磁共振检查；生命体征不平稳。

1.2 影像学方法及分析 采用西门子公司1.5T 磁共振扫描采集。常规SE(自旋回波)序列TlWI、T2WI、DWI及SWI扫描，TR/TE=300 ms/40 ms，偏转角度20°，层厚(5～7) mm，扫描(16～18)层，FOV 23 cm，220×256矩阵。SWI处理：采用Inline 实时在线技术自动生成SWI强度图和SWI相位图，最小密度投影重建，重建层厚为12 mm。

1.3 血清TGF-β1水平测定 所有病人血样分别在SAO发病后3 d内空腹采集。2 mL静脉血置EDTA抗凝管中，4℃下离心分离血浆。放置-80℃贮存备用。血清TGF -β1水平使用酶联免疫吸附剂测定(enzyme linked immunosorbent assay，ELISA)测定，试剂盒购自上海西唐生物科技有限公司，按操作说明书进行。

1.4 统计学处理 应用 SPSS 17.0 统计软件。正态分布计量资料比较用独立样本 t检验，非正态分布计量资料的比较用秩和检验，计数资料的比较用χ2检验或精确的Fisher精确检验。多组的计量资料比较使用方差分析，多组的计数资料比较使用行乘列表的卡方检验分析。相关分析应用Spearman等级相关。以 P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 急性腔隙性脑卒中病人CMBs的发生率及分布特点 共收集急性首次腔隙性脑梗死病人110例。通过SWI序列检测发现CMBs病人40例，发生比例36.4%。按照程度分为轻度10例，中度14例，重度16例。单因素比较发现，与无CMBs组相比，CMBs组年龄(t=2.137，P=0.013)偏大，高血压(χ2=4.627，P=0.031)发生比例偏高，差异有统计学意义；CMBs组TGF-β1(70.9±15.6)ng/mL水平高于无CMBs组(51.2±13.2) ng/mL，差异有统计学意义(t=6.41，P<0.01)；性别、糖尿病、吸烟、饮酒、高脂血症、血糖、HDL、LDL、TG两组之间未见明显差异。详见表1。

表1 CMBs与无CMBs病人临床特征比较

2.2 CMBs等级与TGF-β1水平的关系 根据CMBs等级分组比较发现，轻度CMBs组血浆TGF-β1是(57.9±9.8) ng/mL，中度(72.6±7.5) ng/mL，重度(77.5±9.7) ng/mL，3组比较有统计学意义(F=14.9，P<0.01)，CMBs程度与血清TGF-β1水平呈正相关(r=0.595，P<0.01)。

2.3 Logistics多因素分析 使用Logistics回归分析，以CMBs为因变量，将年龄、高血压、TGF-β1作为自变量，连续变量直接纳入方程，调整年龄、高血压混杂因素，结果显示TGF-β1(OR=0.281，P=0.016)是CMBs的独立危险因素。详见表2。

表2 Logistics回归分析矫正年龄、高血压混杂因素

3 讨 论

CMBs的发病机制目前尚不清楚。既往研究发现，CMBs与年龄、高血压病、多发性腔隙性脑梗死、白质疏松等密切相关[9]。Lgase 等[10]发现，CMBs与无症状性腔隙性脑梗死同时发生的病人，收缩压水平高于对照组，提出CMBs的病因与腔隙性梗死病因相似。Fazekas等[11]对死于脑出血的11例CMBs病人进行了磁共振和脑组织病理学对照研究。病理学研究证实，在GRE序列上的低信号区域是直径小于200 μm的小血管周围含铁血黄素的沉积，这些小血管发生了不同程度的血管壁增厚，细胞外基质增生。CMBs的数目越多，血管壁也就越厚，颅内小血管发生了不同程度的结构改变[12]。因此，CMBs的病理学基础是颅内小血管的重构及细胞间质纤维化。然而，在细胞间质增生，血管纤维化过程中TGF-β1是关键细胞的因子[6，13]。TGF是一组新发现的细胞因子。人体内共有3个亚型，生物学特性类似，TGF-β1所占比例最大，活性也最强。

Tomspson等[6]推测TGF-β1可能在CMBs的发生发展过程中起关键作用。对比研究发现，CMBs病人TGF-β1水平显著高于无CMBs病人，血清TGF-β1水平与CMBs程度成正相关。进一步矫正年龄、性别、高血压等因素，TGF-β1仍然是CMBs的独立危险因素。既往研究表明[14]，TGF- β1基因变异与高血压及其靶器官损害的关系非常密切，血清TGF - β1的浓度与血压程度呈正相关。高血压病人中，TGF-β1的过度表达，会导致心、脑、肾等靶器官的损伤，主要表现为全身小血管的重构。血清高水平TGF-β1会促进细胞间基质的合成和沉积，减少细胞间基质的降解，并能直接刺激其下游介质如结缔组织生长因子的基因转录，从而调节成纤维细胞的生长以及成纤维细胞和系膜细胞外基质的分泌，最终导致靶器官损伤。TGF-β1是心室纤维化的始动因子[15]，并且与肾小球硬化和肾间质纤维化密切相关[16]。血管紧张素Ⅱ能刺激TGF-β1水平增加，血管紧张素Ⅱ通过与血管紧张素Ⅱ受体结合可以提高TGF-β1的 mRNA 水平，促使无活性的TGF-β1转化成活性状态，而整个过程均可被血管紧张素Ⅱ阻断剂(ACEI/ARB)阻断，延缓小血管纤维化进程。使用 ACEI/ARB 类药物可降低血清TGF-β1的水平[17]，延缓靶器官损伤。心、脑、肾均是长期高血压损伤的靶器官。因此推测TGF-β1不仅仅参与了心室纤维化及肾小球纤维化，同样在CMBs的发生发展中起重要作用，使用ACEI/ARB类药物可能会延缓CMBs的发生发展。

本研究显示，急性小血管闭塞性脑卒中病人CMBs的发生率是36.4%；CMBs的程度越严重，血清TGF-β1水平越高，呈正相关；并且在矫正年龄、高血压混杂因素后发现，血浆TGF-β1水平是CMBs的独立危险因素。

本研究在CMBs的治疗及预防方面有重要的价值，但也存在以下不足。第一，病例数量较少，需进一步扩大样本量证实；第二，没有测定CMBs病人血清TGF水平的动态变化，在今后的研究中将进一步完善。

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(本文编辑王雅洁)

江苏大学附属武进医院(江苏镇江 212013)

何国平，E-mail：guopinghe6@sina.com

R743.3 R255.3

B

10.3969/j.issn.1672-1349.2016.21.031

1672-1349(2016)21-2559-03

2016-09-05)

引用信息：张金，郝冬琳，何国平.急性小动脉闭塞性脑卒中病人脑微出血与血清转化生长因子-β1的相关性研究[J].中西医结合心脑血管病杂志，2016，14(21)：2559-2561.