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不同酸提取对维生素C测定结果的影响

2016-12-08徐新娟孙海燕李勇超付聪聪

湖北农业科学 2016年18期
关键词:相关维生素C滴定法

徐新娟++孙海燕++李勇超++付聪聪++冯洋洋

摘要:试验以4种酸作为提取剂,研究不同浓度酸提取下维生素C含量的变化,并进一步探讨混酸对测定结果的影响。结果表明,草酸、盐酸和醋酸均以2%浓度提取效果最好,磷酸则以8%浓度最佳,其中2%草酸测定结果最高;2%草酸-8%磷酸测定结果显著高于其他混合酸处理,但低于单酸处理。相关分析结果显示,3种最佳浓度单酸之间相关显著,2%草酸-8%磷酸混合酸与2%草酸和2%盐酸显著相关。

关键词:维生素C;滴定法;酸提取;相关

中图分类号:TQ460.7+2 文献标识码:A 文章编号:0439-8114(2016)18-4799-03

DOI:10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2016.18.042

维生素C(Vitamin C)又名L-抗坏血酸,是新鲜水果和蔬菜中含量非常丰富的一种水溶性维生素。维生素C可以增强机体免疫力,在机体新陈代谢中起着重要的作用,其含量常常作为衡量果蔬品质的重要指标之一。维生素C含量测定的方法有滴定法、比色法和色谱法,经典的滴定法有碘量法和2,6-二氯酚靛酚法,无需特殊仪器且操作简便、快速,测定结果准确可靠,在教学及科研分析中广泛应用。

维生素C还原性很强,在空气中很容易被氧化,提取时可通过加入弱酸的方法增加其提取液的稳定性。常用的酸有醋酸[1,2]、草酸[3-5]和盐酸[5],也有用两种酸的混合液进行提取的报道,如偏磷酸-醋酸[1]和草酸-盐酸[6],鉴于偏磷酸有剧毒,且室温下易水合成磷酸从而影响其对维生素C的稳定作用。因此,本试验选择草酸、磷酸、盐酸和醋酸4种酸,设置5种浓度梯度,研究不同酸提取浓度对滴定法测定维生素C含量的影响,在此基础上筛选出最佳酸浓度,采用两两混合的方法,进一步探讨混合酸对测定结果的影响。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

选择维生素C含量较高的猕猴桃和柿子椒作为供试材料。

试剂:碘酸钾、碘化钾、淀粉、盐酸、2,6-二氯酚靛酚、碳酸氢钠、维生素C、草酸、磷酸、盐酸、醋酸,均为分析纯,活性炭。

1.2 方法

维生素C含量的测定参考王秀奇等[7]的方法。材料清洗擦干后,去皮去子,用搅拌机快速打成匀浆,称取5 g置于不同酸提取液中,0.5 g活性炭脱色10 min,然后分别用两种滴定方法进行维生素C含量测定。滴定时以颜色持续5 s不退为终点,整个滴定过程不超过2 min。另取相应提取酸酸化的蒸馏水做空白对照滴定。每种提取酸均设置5种浓度:1%、2%、4%、8%、10%。混酸选择单酸最佳浓度,按1∶1(V/V)混合后进行提取。各处理均重复3次。

碘量法计算公式:VC(mg/100 g)=■×■×100

式中,V为样品滴定所用KIO3体积减去空白滴定所用体积;B为滴定时样品液体积;b为样品提取液体积;a为样品质量。

2,6-二氯酚靛酚法计算公式:VC(mg/100 g)=■×100

式中,VA为滴定时所用2,6-二氯酚靛酚体积;VB为空白所用2,6-二氯酚靛酚体积;S为1 mL 2,6-二氯酚靛酚溶液相当于维生素C量,详见表1;W为10 mL样品提取液中含有样品量。

1.3 数据分析

所有数据均为测定平均值,数据采用SAS 9.0 软件进行统计分析,LSD法多重比较。

2 结果与分析

2.1 不同酸提取浓度对维生素C测定结果的影响

如表2所示,猕猴桃和柿子椒的测定结果较为一致,碘量法的测定数据均高于2,6-二氯酚靛酚法,表明测定方法会影响测定结果。从提取酸浓度来看,草酸、盐酸和醋酸浓度都在2%时最大,然后呈显著下降趋势。随着酸浓度的增加,磷酸的测定结果不断增加,在8%时取得最大值,10%则显著降低。在碘量法中,猕猴桃用2%草酸、2%盐酸、2%醋酸和8%磷酸提取的结果分别是效果最差组的1.08、1.39、1.18和1.30倍。

对于同种浓度而言,不同酸提取的结果也存在显著差异,其中柿子椒的两种滴定法均为草酸效果最好,其次是醋酸和磷酸,盐酸的测定结果整体偏低。猕猴桃在草酸浓度为1%、2%和4%时测定结果较大,8%和10%的磷酸处理显著高于草酸,表明酸浓度和酸种类都显著影响维生素C提取量。综上所述,测定维生素C时提取效果较好的酸是2%草酸。

2.2 不同混酸提取对维生素C测定结果的影响

将2%草酸、2%盐酸、8%磷酸和2%醋酸进行两两混合,比较混酸提取对测定结果的影响。如表3所示,碘量法中猕猴桃和柿子椒结果一致,均为2%草酸-8%磷酸处理的测定结果最大,并显著高于其他处理。除2%草酸-8%磷酸外的5种混酸处理之间差异也达到显著水平,其中2%盐酸-8%磷酸提取效果最差,猕猴桃和柿子椒分别比2%草酸-8%磷酸少35%和16%。在2,6-二氯酚靛酚法中,2%草酸-8%磷酸提取效果最好,2%盐酸-8%磷酸最差。与猕猴桃各处理间差异均显著不同,柿子椒的2%盐酸-8%磷酸和2%醋酸-8%磷酸差异不显著,这可能是品种之间的差异所致。

2.3 不同酸提取测定结果的相关性分析

除盐酸外,混合酸的提取效果并不好于单酸。相关性分析结果(表4)表明,除8%磷酸外,2%草酸、2%盐酸和2%醋酸之间相关性均达到显著水平,即这3种单酸的提取效果较为一致。2%草酸-8%磷酸的混合酸处理与2%草酸和2%盐酸显著相关,但与8%磷酸和2%醋酸相关不显著。

3 结论与讨论

提取酸的种类和浓度均影响维生素C的测定结果。张淑民等[8]研究表明3%醋酸处理效果最好,本试验扩大了浓度梯度,并得出醋酸的较佳提取浓度为2%。与醋酸相同,草酸和盐酸均在较低浓度(2%)时提取效果较好,磷酸则在高浓度(8%)时达到最佳提取效果,其中草酸和醋酸测定结果较高,且显著相关,表明滴定法测定维生素C含量时可选择草酸或醋酸进行提取。用2%草酸-10%盐酸的混酸提取维生素C,其测定结果与2%草酸、4%醋酸并无显著差异[6],本试验中混酸的测定结果以2%草酸-8%磷酸最高,虽与2%草酸和2%盐酸显著相关,但在数值上低于单酸,可见混酸提取效果并不优于单酸。

参考文献:

[1] 宋秀丽,葛海龙.维生素C片中维生素C测定方法比较[J].太远师范学院学报(自然科学版),2013,12(4):132-137.

[2] 石东里,姚志刚,申保忠.枣品种抗坏血酸含量的测定与比较[J].滨州师专学报,2003,19(2):90-92.

[3] 李瑞国,郑 权.4种常见蔬菜维生素C含量测定[J].西南农业学报,2011,24(1):198-201.

[4] 万学闪,刘文革,阎志红,等.无籽西瓜果实不同部位维生素C和番茄红素含量测定[J].中国瓜菜,2009(3):4-9.

[5] 孙 鹏,王 宁,孙先锋.两种方法对苹果中维生素C含量测定的比较[J].湖北农业科学,2011,50(16):3386-3388.

[6] 武 文,詹秀环,宣亚文.碘量法测定蔬菜中维生素C的含量[J]. 安徽农业科学,2009,37(21):9845-9846.

[7] 王秀奇,秦淑媛,高天慧,等.基础生物化学实验[M].北京:高等教育出版社,2010.195-199.

[8] 张淑民,冯双庆.果品蔬菜中维生素C测定方法的研究[J].北京农业大学学报,1983,9(2):51-59.

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