高效液相色谱法测定洗手液中的3-甲基-4-异丙基苯酚的含量

王娟，于文

（西安开米股份有限公司，陕西西安，710075）

高效液相色谱法测定洗手液中的3-甲基-4-异丙基苯酚的含量

王娟，于文

（西安开米股份有限公司，陕西西安，710075）

介绍了高效液相色谱检测洗手液中3-甲基-4-异丙基苯酚的方法。该方法有较高的准确度和可靠性。标准溶液在浓度1mg/ml～200mg/ml内呈线性关系。洗手液样品的最低定量检测限为10mg/kg。

洗手液；3-甲基-4-异丙基苯酚；高效液相色谱

现在市场上的许多洗手液会加入一些杀菌剂成分，他们宣称有杀菌抑菌效果，其中很多产品中添加有杀菌剂3-甲基-4-异丙基苯酚。该物质是一种广谱的杀菌剂，应用广泛。目前，文献中大多采用气相色谱-质谱联用的检测方法，少有其他仪器检测，或者是对该物质本身及其消毒液的检测方法，如气相色谱-质谱法测定洗手液中多种防腐剂[1]、气相色谱-质谱法分析检测莳萝酊的挥发成分[2]和甘肃产柴胡挥发油化学成分GCMS分析[3]。洗手液中含有一定量的表面活性剂和其他成分，对分析干扰较大。本方法采用高效液相色谱仪来检测洗手液中3-甲基-4-异丙基苯酚的含量。该方法操作简单、准确快速，可以直接配制样品溶液检测，不需要样品前处理。其回收率在98%～100%，其相对标准偏差（RSD）为1.125%（n=6），相关系数R2=0.9997。表明该方法有很好的准确度和可靠性，适用于洗手液中3-甲基-4-异丙基苯酚的含量检测。

1 实验部分

1.1 实验仪器及试剂

1.1.1 实验仪器

高效液相色谱仪（HPLC），美国赛默飞世尔公司（原热电集团TSP公司）；工作站：ChromQuest工作站；检测器：UV6000LP 二极管阵列式紫外可见光检测器。

1.1.2 实验试剂

甲醇：色谱纯；纯水：超纯水；3-甲基-4-异丙基苯酚：标准品；测试样品：市售洗手液（表面活性剂、保湿因子、水、杀菌剂等）。

1.2 色谱条件

色谱柱：KR-100-5，C18，150×4.6mm

流动相：甲醇：水=80∶20

流速：1mL/min

图1　3-甲基-4-异丙基苯酚标准色谱图

图2　3-甲基-4-异丙基苯酚的紫外吸收曲线

图3　样品在237nm吸收波长的色谱图

进样量：20mL（阀进样）

波长：265nm

柱温：30℃

3-甲基-4-异丙基苯酚保留时间：3.23min（标准色谱图见图1） 。

1.3 波长的选择

3-甲基-4-异丙基苯酚的标准色谱图如图1所示，保留时间3.23分钟，其紫外吸收光谱图如图2所示，最大吸收波长为237nm和262nm，但在洗手液的体系中，因含有一定量的表面活性剂和其他成分，这些成分的紫外吸收波长大都在200～240nm，在该波段下对目标组分有很大的干扰，如图3所示，而选择265nm波长作为定量吸收波长，会减少干扰，如图4所示，紫外吸收系数相对较小，检测灵敏度和检测限会有所降低，但不影响对样品的含量测定，故选择265作为检测波长。

图4　样品在265nm吸收波长的色谱图

1.4 实验步骤

1.4.1 流动相的配制：量取800mL色谱甲醇于1200mL烧杯中，加入200mL超纯水，搅拌均匀，用0.45mm有机相滤膜过滤，超声震荡，脱气10分钟，备用。

1.4.2 标准溶液的制备

1.4.2.1 标准储备液的配制：精确称量0.1000g（精确到0.0001g）3-甲基-4-异丙基苯酚标准样品于100mL容量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀备用，此溶液浓度为1000mg/mL。以此储备液配制一系列不同浓度（1mg/mL、10mg/mL、20mg/mL、40mg/mL、80mg/mL、100mg/mL、150mg/mL、200mg/mL），备用。

1.4.3 样品的配制：精确称量2.0000g（精确到0.0001g）样品于50mL容量瓶中，用流动相稀释，超声震荡，定容至刻度，备用。

1.4.4 回收率溶液的配制：分别精确称量0.5000g和1.0000g（精确到0.0001g）洗手液样品于50mL容量瓶中，各自加入1mL标准储备液，用流动相稀释，超声震荡，定容至刻度，备用。（这两个溶液相当于1+1，1+2溶液）

1.4.5 标准曲线的测定：在上述色谱条件下，待仪器基线稳定后，将8个标准溶液按浓度由小到大的顺序依次进样检测，计算标准曲线、线性关系；

1.4.6 样品溶液的测定：精确配制6个样品溶液，依次进样，采用浓度—峰面积外标法定量，计算重复性。

1.4.7 回收率的测定：按浓度由小到大的顺序依次进样检测，计算回收率。

2 结果和讨论

2.1 标准曲线及相关系数：y=3E-05x-1.3172，R²=0.9997

图5　标准曲线及回归方程（1mg/mL、10mg/mL、20mg/mL、40mg/mL、80mg/mL、100mg/mL、150mg/mL、200mg/mL）

相关系数>0.999，说明在1mg/mL～200mg/mL内线性相关。按信噪比十倍计算其定量限为1mg/mL。以样品稀释10倍进样计算，样品最低定量检测浓度为10mg/kg。

2.2 重复性：对样品进行六次检测，其结果见表1。

2.3 回收率： 结果见表2。

其回收率在98%～100%，该方法有很好的准确性。

表1　重复性结果

表2　回收率结果

2.4 结论

本方法的回收率在98%～100%，其相对标准偏差为1.125%（n=6），相关系数R2=0.9997，在1mg/mL～200mg/mL内线性相关，样品最低定量检测浓度为10mg/kg。本方法简单、快速、可排除洗手液中干扰，准确度，精密度均能满足检测要求，可作为洗手液生产车间和质量控制中心检测3-甲基-4-异丙基苯酚含量的方法。

[1]李英,刘丽,刘志红.气相色谱-质谱法测定洗手液中多种防腐剂[J].色谱,2003,21(2):170-173.

[2]詹家芬,陆舍铭,等.气相色谱质谱法分析检测莳萝酊的挥发成分[J].精细化工,2007,24(8):805-819.

[3]孙宗喜,吕晓慧,等.甘肃产柴胡挥发油化学成分GCMS分析[J],中国实验方剂学杂志,2012,18(9):75-78.

Determination of 3-methyl-4-isopropyl phenol in hand cleanser by High Performance Liquid Chromatography

Wang Juan, Yu Wen
（Xi'an Kaimi Co., Ltd., Xi'an 710075, Shaanxi, China）

HPLC detection method of 3-methyl-4-isopropyl phenol in hand cleanser is introduced with higher accuracy and reliability. Standard solution has a liner relationship in the range of 1 mg/ml to 200 mg/mL. The minimum quantitative detection limit of hand cleanser sample is 10 mg/kg.

hand cleanser；3-Methyl-4-isopropyl phenol；HPLC

TQ658.2

A

1672-2701（2016）11-38-04