太原市无偿献血者抗-HIV结果确认和带型分析

陕柏峰，原维宇，冯 泽，张柳明

(山西省血液中心检验科，太原 030024)



·论 著·

太原市无偿献血者抗-HIV结果确认和带型分析

陕柏峰，原维宇，冯 泽，张柳明

(山西省血液中心检验科，太原 030024)

目的 分析研究太原市无偿献血者人类免疫缺陷病毒(HIV)抗体(抗-HIV)阳性标本的确认结果和带型。方法 采用蛋白印迹(WB)对185例初筛阳性献血者标本进行确认试验，采用SPSS13.0分析试验结果和带型。结果 确认阴性128例，不确定15例、阳性42例。确认阳性标本中，gp120、gp160、p24带型阳性率为100.00%，p31、p51和p66阳性率均大于90.00%。不确定标本中，p24阳性率最高，有12例，占80.00%；其次为gp160，有3例，占20.00%。随着S/CO值增大，带型出现率逐渐增高，最高为S/CO值>6.00组(χ2=35.16，P=0.009)。结论 HIV筛查试验存在假阳性。确认阳性标本多为病毒感染期。初筛阳性标本必须进行追踪确认试验，确认其是否感染。

艾滋病病毒； 蛋白印迹； 确认试验； 带型

目前，我国无偿献血者人类免疫缺陷病毒(HIV)检查方法主要有筛查和确认2种。无偿献血者血液标本必须经过筛查和确认试验才能确定是否感染HIV。无偿献血是公益性服务，其发现HIV感染者的原因，一方面是患者自身被感染且不知情，另一方面可能其存在高危行为故意隐瞒但被发现。若感染HIV血液流向临床，将产生重大损失。由于众多检测方法对人类感染HIV均存在检测“窗口期”，易导致“漏检”现象发生，所以要求血液中心提高检测技术，并在献血者招募和征询中严格把关。因此，笔者对无偿献血者中确认HIV阳性标本进一步分析和研究，为血液安全提供理论基础，现将结果报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2014年6月至2015年6月山西省血液中心185例HIV抗体(抗-HIV)筛查结果为阳性的无偿献血者标本进行蛋白印迹(WB)确认研究。

1.2 方法 确认试验采用WB进行。试剂为HIV 1+2型抗体检测试剂盒 (IMT HIV-1/2 Blot确认试剂盒)，严格参照试剂说明书进行试验。判断标准参考《全国艾滋病检测技术规范(2009年版)》。确认试剂由上海英旻泰生物技术有限公司提供，经国家食品药品监督管理局注册并在有效期内使用。

1.3 统计学处理 采用EXCEL 2003进行录入，SPSS13.0进行统计分析，计数资料采用%表示，组间比较采用χ2检验，以P<0.05表示差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 初筛阳性标本确认结果及带型分布 185例初筛阳性标本确认阴性128例(69.19%)，阳性42例(22.71%)，不确定15例(8.11%)。42例阳性标本中gp120、gp160、p24带型阳性率为100.00%，p31、p51、p66和gp41阳性率均大于90.00%。不确定标本中，p24阳性率最高，有12例，占80.00%；其次为gp160，有3例，占20.00%；gp41、p51、p31，p17各1例，各占6.67%。见表1。

表1 初筛阳性标本确认结果和带型分布[n(%)]

2.2 不同S/CO值标本的确认结果和带型分析 185例初筛阳性标本中出现阳性带型共57例，其中有40例S/CO值大于6.00，有14例S/CO值大于1.00且小于或等于3.00，有3例S/CO值大于3.00且小于或等于6.00。阳性带型出现率最高为S/CO值大于6.00组，不同S/CO值的3组间，带型出现率差异有统计学意义(χ2=35.16，P=0.009)。见表2。

表2 不同S/CO值初筛阳性标本确认结果和带型分布[n(%)]

3 讨 论

本次研究结果显示，185例阳性标本中，确认阳性42例，真阳性比例为22.71%，低于辽阳、遵义等地的报道[1-2]，高于长治、邯郸等周边地区的报道[3-4]。这可能与本中心自2014年起缩小“灰区”设置，采用第4代酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂进行抗-HIV筛查有关。科学制订“灰区”能有效减少假阳性发生，第4代ELISA试剂在检测传统抗体的同时，还能检测p24抗原，提高敏感性和特异性，但存在交叉反应等非特异性反应，仍有一定假阳性[5]。

HIV感染人体后，不同抗体在人体内产生的时间和作用并不相同。原发性抗体水平在感染后2～4周开始上升，3～6个月后达到高峰并持续整个潜伏期。血清抗体种类包括中和抗体、抗-p24和针对病毒不同组分的抗体。本次研究显示，WB确证阳性者均为HIV-1型感染，全带型阳性为41例，占97.62%；出现8条及以上带型者19例，占45.24%。其中，gp160、gp120、p24出现率为 100.00%，p31、p51、p66带型出现率均大于90.00%，与俞根龙等[6]的报道相似。出现全带型提示患者正处于感染期，且其将持续整个潜伏期，表明本地区无偿献血者抗-HIV阳性者多数处于感染期未进入获得性免疫缺乏综合征(AIDS)期。由于HIV结构蛋白水平、抗原性强弱和产生相应抗体时间不同，且不同个体对不同抗原成分的免疫应答强度存在差异，导致WB带型存在一定差异，但也预示了疾病感染的进展程度。本次研究阳性标本中，Env gp41缺失率最高，有41例，占97.62%。gp41带作为外膜蛋白带，出现晚于gp160和gp120带，在病毒侵入靶细胞时才会大量存在。gag p55带型缺失22例，占52.38%。其可能因机体免疫功能严重受损，免疫应答能力减弱，使某些抗体产生量下降，缺失率增高，提示疾病进展速度较快[7]。p31缺失3例，占7.14%，其中2例为全带型，1例仅出现gag基因表达的p17、p24和Env基因表达的gp120带型。p31带型缺失可能预示患者为早期感染[8]，尤其是伴随Env区带型的缺失。此外，阳性标本中还有2例出现p39带，抗-p39出现可能与不同人群的免疫力差异有关[9]。

由于含有较ELISA试验更全面的HIV特异性抗原成分，WB试验可以确定参与反应的抗原，广泛应用于HIV感染确认试验。但是，由于病毒抗体产生时间和试验敏感性等问题，该试验结果存在不确定性，需要进一步追踪确认。本次研究显示，15例不确定结果中，p24带型阳性率最高，为80.00%；其次为gp160和p17，为20.00%，与前期报道相似[10]。虽然有报道认为gag 类大部分为非特异性反应[11]，但也有部分为感染早期患者，需要进一步追踪确认[12]。而本次试验的不确定结果以p24带最多，需引起进一步重视。

本结果还对S/CO值和带型出现率的关系进行了研究，发现随着S/CO值增高，确认符合率逐渐增高，除p24和gp41外，其余带型出现率逐渐增高，表明随着病毒增殖活跃，机体产生的抗体水平逐渐增高，ELISA和WB试验对抗体的检出率也逐渐增高。试验中有5例单试剂阳性标本(S/CO值大于6.00)和2例双试剂阳性结果(S/CO值为1.31、1.00，5.26、1.02)确认为阴性，2例单试剂阳性(S/CO值为3.89和1.73)确认为阳性，表明并不能以初筛S/CO值判断是否感染，必须进行确认试验。

综上所述，山西省血液中心无偿献血者HIV筛查试验存在一定假阳性结果，HIV阳性献血者多数处于感染期，随着初筛S/CO值增高，带型出现率逐渐增高，但须进行追踪确认试验，确认其是否感染。

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[12]朱荣华,向信春.37例HIV不确定结果随访观察及WB带型分析[J].皮肤病与性病,2014,36(1):46-47.

Analysis of the confirmation results and banding patterns of the HIV antibody of unpaid blood donors in Taiyuan City

SHANBaifeng,YUANWeiyu,FENGZe,ZHANGLiuming

(DepartmentofClinicalLaboratory,ShanxiBloodCenter,Taiyuan,Shanxi030024,China)

Objective To analyze the confirmation results and banding patterns of the HIV antibody of unpaid blood donors in Taiyuan city.Methods Western blot was used to confirm the positive samples of 185 blood donors in primary screening.SPSS 13.0 analysis was used to analyze the experimental results and banding patterns.Results A total of 128 negative cases were confirmed,15 cases were not confirmed and 42 cases were positive.The positive rates of banding patterns of gp120,gp160 and p24 were all 100.00%,and which of p51,p66 and p31 were all higher than 90.00%.In the undetermined samples,there were 12 positive cases of p24,which accounted for 80.00%,followed by gp160,3 positive cases and accounted for 20.00%.With the increase of S/CO value,rates of banding patterns gradually increased,and the highest rate group was the S/CO higher than 6.00(χ2=35.16,P=0.009).Conclusion There are some false positive results in the HIV screening test.The specimens which are confirmed positive are mostly in the virus infection period.Positive samples in primary screening must be conducted confirmed test so as to determine whether the cases are infected.

HIV; Western blot; confirmed test; banding patterns

陕柏峰，男，主管技师，主要从事病原微生物及血液免疫学方面的研究。

10.3969/j.issn.1673-4130.2016.21.025

A

1673-4130(2016)21-3017-03

2016-04-11

2016-06-22)