糖尿病足溃疡伴感染患者创面渗液中MMP-2 2及其抑制因子的水平变化

孙梦菊，赵鹏飞，李黎

（1莱阳市第二人民医院，山东莱阳265202；2烟台市莱阳中心医院）

糖尿病足溃疡伴感染患者创面渗液中MMP-2 2及其抑制因子的水平变化

孙梦菊1，赵鹏飞2，李黎2

（1莱阳市第二人民医院，山东莱阳265202；2烟台市莱阳中心医院）

目的 观察糖尿病足溃疡伴感染患者创面渗液中基质金属蛋白酶2（MMP-2）及其抑制因子（TIMP-2）的水平变化。方法 选择糖尿病足溃疡并创面感染患者24例（观察组），其中单一感染18例（单一感染组）、混合感染6例（混合感染组），根据Wagnar分类标准Ⅱ级溃疡9例、Ⅲ级溃疡15例。选择同期糖尿病足溃疡非感染患者20例作为对照组。采用ELISA法测定创面渗液中MMP-2及TIMP-2水平，并计算MMP-2／TIMP-2。结果 与对照组比较，观察组创面渗液中MMP-2水平高，TIMP-2水平低，MMP-2／TIMP-2高（P均＜0.05）。与混合感染组比较，单一感染组MMP-2水平低（P＜0.05）；两组TIMP-2水平、MMP-2／TIMP-2比较，P均＞0.05。与Ⅲ级溃疡比较，Ⅱ级溃疡MMP-2、MMP-2／TIMP-2均低（P均＜0.05）；两者TIMP-2比较，P＞0.05。结论 糖尿病足溃疡伴感染患者创面渗液中MMP-2水平升高，TIMP-2水平降低；且细菌感染种类越多、溃疡级别越高，MMP-2水平越高，但TIMP-2水平与细菌感染种类、溃疡级别无关。

糖尿病足；糖尿病足溃疡；基质金属蛋白酶2；基质金属蛋白酶2抑制因子

有15%～20%的糖尿病患者发生下肢溃疡［1］，其中85%的下肢截肢糖尿病患者归因于足溃疡。而糖尿病足溃疡伴感染（DFI）是常见且较严重的一种并发症。研究结果显示，基质金属蛋白酶2（MMP-2）与基质金属蛋白酶2抑制因子（TIMP-2）水平的变化对糖尿病足感染创面及组织创伤具有重要作用［2］。2012年8月～2013年7月，我们观察了DFI患者创面渗液中MMP-2、TIMP-2水平变化。现报告如下。

1　资料与方法

1.1临床资料 选择莱阳市第二人民医院DFI患者24例（观察组），均符合1999年WHO的DFI标准［3］，均为2型糖尿病。其中男14例、女10例，年龄28～79（56.32±6.84）岁，病程均＞1个月。根据溃疡局部分泌物细菌培养结果显示，单一感染18例（单一感染组）、混合感染6例（混合感染组）；根据Wagnar分类标准Ⅱ级溃疡9例、Ⅲ级溃疡15例。选择同期接受诊治的糖尿病足溃疡非感染患者20例作为对照组，均为2型糖尿病。其中男10例、女10例，年龄27～75（55.44±7.56）岁，病程均＞1个月。两组性别、年龄比较差异无统计学意义。两组均排除严重肝肾功能不全、免疫缺陷疾病、下肢静脉性溃疡及中途退出手术治疗者。

1.2创面渗液中MMP-2及TIMP-2水平检测 收集渗出液前晚不再进食，第2天清晨将患者创面采用无菌半透明塑料膜进行覆盖，患肢下垂，每次间隔1 h在塑料膜下进行抽液，置于管中。将收集到的液体离心，以3 000 r／min离心15～20 min，收集上清液于消毒的干燥EP管中，放于-80℃冰箱中保存备用。采用ELISA法检测MMP-2及TIMP-2，并计算MMP-2／TIMP-2。

1.3统计学方法 采用SPSS17.0统计软件。计量资料以±s表示，比较采用t检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

2　结果

2.1两组创面渗液MMP-2、TIMP-2水平及MMP-2／TIMP-2比较 与对照组比较，观察组创面渗液中MMP-2水平高，TIMP-2水平低，MMP-2／TIMP-2高（P均＜0.05）。见表1。

表1　两组创面渗液中MMP-2、TIMP-2水平及MMP-2／TIMP-2比较（±s）

表1　两组创面渗液中MMP-2、TIMP-2水平及MMP-2／TIMP-2比较（±s）

注：与对照组比较，*P＜0.05。

组别nMMP-2（ng／mL）TIMP-2（ng／mL）MMP-2／TIMP-2观察组2484.13±14.92*13.04±2.67*6.97±2.48*对照组2035.24±5.1731.16±4.011.03±0.31

2.2单一感染组与混合感染组创面渗液MMP-2、TIMP-2水平及MMP-2／TIMP-2比较 与混合感染组比较，单一感染组MMP-2低（P＜0.05）；两组TIMP-2水平、MMP-2／TIMP-2比较，P均＞0.05。见表2。

表2　单一感染组与混合感染组创面渗液中MMP-2、TIMP-2水平及MMP-2／TIMP-2比较（±s）

表2　单一感染组与混合感染组创面渗液中MMP-2、TIMP-2水平及MMP-2／TIMP-2比较（±s）

注：与混合感染组比较，*P＜0.05。

组别nMMP-2（ng／mL）MMP-2／TIMP-2单一感染组1880.07±13.49*TIMP-2（ng／mL）13.01±2.436.42±2.30混合感染组697.36±12.2512.73±2.167.61±1.45

2.3Ⅱ级溃疡与Ⅲ级溃疡创面渗液中MMP-2、TIMP-2水平及MMP-2／TIMP-2比较 与Ⅲ级溃疡比较，Ⅱ级溃疡MMP-2、MMP-2／TIMP-2均低（P均＜0.05）；两者TIMP-2比较，P＞0.05。见表3。

表3　Ⅱ级溃疡与Ⅲ级溃疡创面渗液中MMP-2、TIMP-2水平及MMP-2／TIMP-2比较（±s）

表3　Ⅱ级溃疡与Ⅲ级溃疡创面渗液中MMP-2、TIMP-2水平及MMP-2／TIMP-2比较（±s）

注：与Ⅲ级溃疡比较，*P＜0.05。

溃疡分级nMMP-2（ng／mL）MMP-2／TIMP-2Ⅱ级溃疡974.18±9.61*13.73±2.945.68±1.42 TIMP-2（ng／mL）*Ⅲ级溃疡1592.85±16.79 12.56±2.117.97±2.38

3　讨论

糖尿病足溃疡是糖尿病的一种严重慢性并发症，导致糖尿病足溃疡主要因素是血管病变与神经病变，而继发感染则会引起溃疡加重，是导致截肢与坏疽的重要因素［4］。DFI非常常见，近七成以上的糖尿病足溃疡合并感染，而一旦发生感染，往往导致病情迅速恶化，使溃疡面向深部发展，并导致溃疡面长期无法愈合［5］。DFI造成感染创面，随着细菌数量的增多，炎症的浸润程度也将加重。由于机体炎性反应的持续存在，容易形成“瀑布效应”，使创面上的炎性因子含量明显增加，并诱导中性粒细胞、成纤维细胞、淋巴细胞以及巨噬细胞等产生MMP及TIMP［6］。MMP是含有Zn2+的一类内源性蛋白水解酶［7］，也是降解细胞外基质的一种主要酶，其能够降解除了多糖之外的细胞外基质成分，同时能够激活其他MMP从而形成级联放大效应［8］。在MMP的众多成员之中，MMP-2为明胶酶A，属于明胶酶类，主要的水解底物为明胶，Ⅳ、Ⅴ型胶原蛋白以及纤维黏连蛋白等，是基质降解的一种关键酶，由于其能够降解动脉壁基底膜的主要成分之一——Ⅳ型胶原，因此MMP-2又被称为Ⅳ型胶原酶的基质金属蛋白酶［9］。TIMP是金属蛋白酶组织抑制因子，它是MMP的内源性特异性抑制因子，主要功能为抑制MMP，从而调节正常细胞外基质的代谢以及各种病理过程。其中TIMP-2是MMP-2的一种特异性抑制剂，它随着MMP-2的表达而表达，同时很少受细胞因子的诱导。若MMP水平上升和（或）TIMP水平下降，将使创面形成一种过度的蛋白水解环境，从而造成大量创面基质水解，进而导致DFI患者的伤口愈合失败。

本研究结果显示，与对照组比较，观察组创面渗液中MMP-2水平高；TIMP-2水平低，MMP-2／TIMP-2高（P均＜0.05）。与混合感染组比较，单一感染组MMP-2低（P＜0.05）；两组TIMP-2水平、MMP-2／TIMP-2比较，P均＞0.05。与Ⅲ级溃疡比较，Ⅱ级溃疡MMP-2、MMP-2／TIMP-2均低（P均＜0.05）；两者TIMP-2比较，P＞0.05。与叶林等［10］研究结果相符。提示DFI患者MMP-2、TIMP-2水平均发生了变化，随着感染细菌种类的增加、溃疡级别的升高，MMP-2水平升高。不同感染细菌种类及溃疡级别DFI患者TIMP-2水平差异并无统计学意义，其原因有待进一步探讨。

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10.3969／j.issn.1002-266X.2016.21.031

R587.2

B

1002-266X（2016）21-0077-02

赵鹏飞（E-mail：307798055＠qq.com）

（2016-04-25）