血小板结果异常时作人工镜检的必要性

董文婷

(夏县人民医院，山西夏县　044400)

血小板结果异常时作人工镜检的必要性

董文婷

(夏县人民医院，山西夏县044400)

目的:探讨血细胞分析仪检测血小板假性增高或假性减低的原因。方法:对150例血小板结果异常的病例进行分析，通过血细胞分析仪，人工计数，血涂片3种方法进行对比。结果:血小板中度减低的标本3种方法结果有差异。结论:细胞分析仪检测血小板虽然方便、快捷且重复性好，但对于低于正常值的标本，必须要引起足够重视，要采取血细胞分析仪和血涂片、人工计数相结合的方式进行报告，以免引起医疗事故和纠纷。

血细胞分析仪;假性减低;假性增高

1　资料与方法

1.1一般资料

收集夏县人民医院2013年8月～2014年7月血细胞分析仪测定血小板结果异常150例(血小板大于800×109/L或小于100×109/L)，年龄11～72岁，平均61岁，其中内科100例，儿科13例，骨科15例，外科15例，皮肤科7例。血小板数目和人数统计见表1。

表1　异常血小板数目和人数分布

1.2仪器与试剂

1.2.1仪器迈瑞BC5500全自动血细胞分析仪，双筒显微镜，计数板。

1.2.2试剂迈瑞原装配套试剂，瑞—姬氏染液，草酸铵稀释液，质控物(中值，高值)。

1.3方法

1.3.1患者取坐位进行静脉采血2 mL，放入乙二胺四乙酸二钾(EDTA-K2)真空采血管中，立即混匀5～8次，在1 h内上机测定，每份标本检测3次，取平均值，进行患者检测前质控中值、高值都必须在控。

1.3.2用EDTA-K2全血制备血涂片将标本进行上机测定后，取干净无油腻的玻片一张，取混匀的全血一滴于玻片的一端，用标准推片置于血滴前端，血滴沿推片散开后，匀速前进，取得厚薄适宜，头，体，尾分明的标准血涂片，制备完成后，立即在空气中晃动几下，加快干燥，以防细胞皱缩，待自然干燥后进行瑞姬氏染色，15 min后，冲洗待干镜检。需要注意的是:冲洗时不能先倒掉染液再冲，应该平端玻片，用自来水从一端缓缓冲洗1 min，待干镜检。

1.3.3人工计数取草酸铵稀释液0.38 mL，加入混匀全血20 μL，擦去管尖外附着血液，置于血小板稀释液内，立即充分混匀，待完全溶血后再次混匀1 min，取上述混匀的血小板悬液1滴，冲入计数池内，静置10～15 min，使血小板下沉后，开始计数，每份标本冲池2次，取平均值。

2　结果

血细胞分析仪计数，人工计数及血涂片情况见表2。

表2　三种血小板检测方法结果对比

3　讨论

血液分析仪检测血小板虽然方便，快捷和重复性好，但低于正常值的标本，甚至中度减低的标本，必须要引起足够重视。

阅片过程中发现有血小板附着在中性粒细胞四周(血小板卫星现象)，被误认为白细胞而使血小板计数假性减低［1］。某些血液系统疾病可导致血小板体积偏大，血细胞分析仪在血小板与红细胞计数时，只识别颗粒大小而不识别颗粒性质，致使这些体积偏大的血小板不被纳入血小板计数范围，使血小板计数结果偏低。大血小板，巨大血小板体积和小淋巴细胞，小红细胞大小相似，也是导致血小板假性减低的原因之一。本次研究发现(80～100)×109/L组及(50～80)× 109/L有差异，有10%～15%可见血小板聚集现象(卫星现象)，或有大血小板及巨大血小板，这可能是造成血小板数量不符合的内在因素，这可以说明血小板仪器法产生误差的原因不是与血小板数量有关，而是与血小板聚集情况和体积异常有关［2］。退化的白细胞碎片，红细胞碎片及杂物被误认为血小板而使血小板计数假性增高。

本次研究过程中发现一位肺癌患者，多次化疗血小板一直还在正常范围，在130×109/L左右，突然有一次化疗后血小板低至9×109/L，血涂片也符合，患者情况危机，输注几个治疗量的血小板后，稍有好转，和临床联系，是患者本次化疗换药物所致，现在患者血小板又恢复正常。这个案例说明检验要经常与临床联系，这样才能掌握患者的真实状态，等患者停药后再采集标本送检，因为这不代表患者的真实结果，以免造成不必要的浪费和恐慌。

在以后的工作中，必须要注意以下几点:a)血小板检测前的质量控制:基本原则，避免血小板被激活、破坏、并避免污染。采血是否顺利很关键，因采血过程中因操作缓慢，穿刺不顺，组织液混入，可因血流不畅可导致血小板破坏过多，采血后混匀不及时可引起血小板聚集等均可使血小板假性减低。抗凝剂是否合适也很重要，因为肝素抗凝，肝素可使血小板表面结构发生改变，形成肝素—血小板复合体，引起血小板在较短时间内聚集，使血小板计数结果偏低，所以推荐使用EDTA-K2。采血后立即混匀5～8次以防发生小的凝集，混匀时动作应缓慢，力度大可引起血小板破坏增加。采血后1 h内血小板趋于稳定平衡。标本应放于室温保存，因低温可激活血小板，使血小板聚集引起血小板假性减低。采集后放置时间不能过长。试剂应避免污染，否则，杂质微粒会使本底增高，导致计数结果偏高。采血时血液和抗凝剂的比例也会影响检测质量，所以必须按照采血管上采血量的要求规范操作。定期对临床护士进行分析前质量控制的培训，对检验结果的准确性也起到重要作用。b)检测中，手工计数，应定期检查稀释液质量，先做稀释液空白计数，以确认是否存在细菌污染或杂质，空白计数应该为零。血细胞分析仪使用前，必须检查各个试剂是否足够，废液是否清空，并查看试剂的质量是否有异常，然后才能开机运行，调试好后，必须是质控(包括中值，高值)在控后才能进行患者标本检测。c)检测后，对于过高或过低结果的标本，应该充分重视，遇到过高或过低的结果，特别是中度偏低的结果，不能马虎，必须采用血细胞分析仪和血涂片检查，人工计数相结合的方式进行复核，当遇到血小板减低的病例时，应先做血涂片染色进行显微镜检查，有不符合者再用手工计数进行复核，有些特殊病例最终以人工计数结果报告给临床，这样无论是血小板成堆聚集或围绕在白细胞四周，还是大体积血小板造成的假性减低都能及时报出结果，并在备注栏中说明血涂片血小板的分布情况，形态特征，供临床医生参考，以尽量减少医疗事故及纠纷。

［1］熊立凡，刘成玉，主编.临床检验基础［M］.4版.北京:人民卫生出版社，2008.

［2］李胜发，程大林.血小板可逆性聚集在血细胞分析仪中的影响［J］.临床检验杂志，2003，21(1):37.

本文编辑:王霞

R446.11

B

1671-0126(2016)02-0032-03

董文婷，女，主管检验师，从事临床检验工作