雷公藤凝胶剂的制备工艺研究

马鑫斌王利胜巴文强

雷公藤凝胶剂的制备工艺研究

马鑫斌1王利胜2巴文强2

目的 优选雷公藤凝胶剂制备工艺并进行初步质量考察。方法 采用单因素方法，以凝胶剂的外观、黏稠性、涂展性和稳定性为指标，考察基质的种类、用量和甘油用量；通过体外透皮试验，确定雷公藤甲素最佳接收液；采用正交试验法筛选处方，确定最佳制备工艺；并对雷公藤凝胶剂进行初步质量考察。结果 以凝胶剂的外观、黏稠性、涂展性和稳定性为考察指标，筛选出最佳的凝胶基质为卡波姆940（2%），甘油用量5%；通过体外透皮试验，确定雷公藤甲素最佳接收液为50%甲醇生理盐水；正交试验筛选出凝胶剂的最佳处方为载药量3%，氮酮用量1%，丙二醇用量10%，并确定最佳制备工艺为：“将卡波姆940撒在适量水中，静置待充分溶胀成凝胶基质；将雷公藤提取物溶于乙醇中，加入甘油、氮酮、丙二醇、尼泊金乙酯和亚硫酸氢钠，搅拌均匀，缓慢加入凝胶基质中并混合均匀，加三乙醇胺调节pH值至6～7，并加蒸馏水至100 g，搅拌均匀”；对雷公藤凝胶剂进行了体外透皮考察，体外透皮过程以零级动力学方程拟合最优，符合零级方程，透皮速率常数Js为0.6712 μg·cm-2·h-1，时滞Tlag为2.61 h。结论 该制备工艺操作简单，所得凝胶稳定性好，释放速率高。

雷公藤；凝胶剂；制备工艺；质量考察

中药凝胶剂系指药材提取物与能形成凝胶的辅料制成的稠厚液体或半固体制剂。根据基质组成不同，可分为水性凝胶和油性凝胶，由于水性凝胶易涂展和洗除，无油腻感，故较为常用。凝胶剂具有良好的生物相容性和缓控释作用[1]，将雷公藤制成凝胶剂可以减少药物损失，提高局部药物浓度，避免口服产生的首过效应，降低雷公藤毒性。周洁等[2]对雷公藤凝胶剂治疗大鼠佐剂型关节炎治疗效果和肝脏毒性研究发现，雷公藤凝胶剂对佐剂型关节炎大鼠能够起到明显的抗炎消肿作用，能有效保护关节软骨组织，并且不会引起明显肝脏毒性反应。本研究参考文献[3-11]，采用改良的Franz扩散池对雷公藤凝胶剂的处方进行了优化筛选，并对优化的处方进行了透皮性能考察。

1 仪器与试剂

1.1 药品与试剂 雷公藤甲素对照品，中国药品生物制品检定所，批号：111567～200502；雷公藤提取物（雷公藤甲素含量0.45%），桂林市三菱生物制品有限公司，批号：130613；卡波姆-940，德国BASF公司；色谱纯甲醇，迪马公司；水为超纯水，其他试剂均为分析纯。

1.2 仪器 Waters高效液相色谱仪（美国Waters公司）；N3000色谱工作站（浙江大学）；AUW120D分析天平（日本岛津）；KQ-500型超声清洗仪（昆山市超声仪器有限公司）；TG1650-WS离心机（上海卢湘仪离心机仪器有限公司）；TK-12A型透皮扩散试验仪（上海锴凯科技贸易有限公司）；8.2 ml立式玻璃扩散池（接口面积3.46 cm2）（上海锴凯科技贸易有限公司）。

1.3 动物 雄性SD大鼠，由广州中医药大学实验动物中心提供，合格证号：SCXK（粤）2008-0020，体量200～250 g。

2 方法与结果

2.1 基质种类考察 以凝胶外观、黏稠性、涂展性和稳定性为考察指标，对CP-940、CP-980、HPMC和CMC-Na进行考察。结果显示，HPMC和CMC-Na在此浓度情况下并不能形成凝胶，黏度小，成液体状；而CP-940和CP-980成型性较好，但CP-980形成的凝胶较稠，不易涂展，且表面相比于CP-940略显粗糙，故CP-940最适合作为雷公藤凝胶剂的基质。见表1。

表1 不同基质对凝胶剂的影响

2.2 考察CP-940用量 以凝胶的外观、黏稠性、涂展性和稳定性为考察指标，对CP-940的用量（0.5%、1.0%、2.0%）进行考察。结果显示，卡波姆用量为0.5%和1.0%时，制成的凝胶黏稠性不够，而且涂展性不佳，用量2.0%时无论是在黏稠性还是涂展性方面均优于用量在0.5%和1.0%，故本研究选择卡波姆用量为2.0%，见表2。

2.3 考察甘油用量 参考文献[12]，以凝胶的外观、黏稠性、涂展性、稳定性和保湿性为考察指标，对甘油的用量进行了考察。由表3可知，所制备的3批凝胶剂黏稠性、涂展性及稳定性相似；但从表4可知，含5%的甘油凝胶比含10%和15%的甘油凝胶的失水率要低，即含5%甘油凝胶的保湿性能更加优越，

所以将甘油的含量定为5%。

表2 CP-940不同用量的考察(%)

表3 甘油不同用量考察(%)

表4 不同时间甘油含量凝胶的失水率(n=3,±s)

表4 不同时间甘油含量凝胶的失水率(n=3,±s)

2.4 接收液的考察 参考文献[13-15]，选择50%甲醇生理盐水，30%PEG 400生理盐水，30%乙醇生理盐水3种不同接收介质，以Q-t方程和透皮速率常数作为指标，考察这3种不同接收液对雷公藤凝胶剂透皮速率的影响，选出适合雷公藤甲素的接收液。

2.4.1 凝胶剂的制备 先将2%卡波姆940用蒸馏水溶胀24 h后，将2%雷公藤提取物溶解于10%乙醇中，将5%甘油、0.1%尼泊金乙酯、0.1%亚硫酸氢钠加入至雷公藤提取物乙醇溶液混匀后，一起加入基质中并搅拌均匀，采用三乙醇胺调节pH至6.0～6.5，加水至100 g，即得。

2.4.2 离体皮肤的处理 取雄性SD大鼠（200～250 g），先用电推子剃除大鼠腹部毛，剩余毛用6%硫化钠溶液进行脱毛，脱毛后正常饲养24 h。颈椎脱臼处死，剥离腹部皮肤，仔细剥离皮下脂肪组织，直至透明，再用0.9%氯化钠注射液冲洗干净，直至无浑浊为止，放入-20 ℃冰箱中保存备用。1周内使用，使用前应检查皮肤有无破损，有破损者弃用。

2.4.3 离体透皮试验 先将磁搅拌子放入接收池内，再将自然解冻的离体大鼠腹部皮肤平放置于接收池上端，角质层面向上，然后用夹子固定于接收池上。在接收池中注入经超声脱气处理的接收液8.2 ml，确保皮肤与接收液之间无气泡，放在恒温水浴中（32±0.2）℃，磁搅拌子转速为205 rpm，预平衡1 h，倒掉接收液注入空白接收液。释放池上涂凝胶剂2 g，在1、2、4、6、8、12、24 h后取样1 ml，每次取样后立即补充同体积同温度的空白接收液，取上述溶出液用0.22 μm微孔滤膜滤过，取续滤液进样测定雷公藤甲素含量，结果见表5。

表5 不同接收液中雷公藤甲素的含量(n=3，±s)

表5 不同接收液中雷公藤甲素的含量(n=3，±s)

时间(h) 接收液1 接收液2 接收液3浓度(μg/ml) 1 0.53±0.06 未检测到 0.37±0.07 2 0.69±0.18 0.49±0.03 0.50±0.05 4 1.06±0.15 0.72±0.07 0.68±0.11 6 1.08±0.13 0.75±0.05 0.79±0.08 8 1.20±0.18 1.03±0.11 0.97±0.12 12 2.15±0.14 1.26±0.27 1.24±0.11 24 3.75±0.23 2.37±0.15 2.13±0.15

2.4.4 数据处理 将得到的数据按下面公式处理，计算各时间点单位面积累积透过量Q及透皮速率。

式中，Cn为第n个取样点测得的药物浓度（μg/ml），Ci为第i（i≤n－1）个取样点测得的药物浓度（μg/ml），A为有效透过面积（3.46 cm2），V为接收液体积，Vi为第i次取样体积。以凝胶剂中雷公藤甲素的Q（μg/cm2）对t（h）分别按零级、一级与Higuchi动力学方程进行线性回归。所得直线斜率J（μg·cm-2·h-1）即为稳态透皮速率常数，直线与X轴的交点即为时滞Tlag（h），以相关系数r2作为方程拟合的判断标准。由表6和图1中可以得出以Q-t方程拟合最好的是零级方程，以50%甲醇生理盐水作为接收液时，雷公藤甲素透皮速率最大，所以50%甲醇生理盐水最适合作为雷公藤甲素的接收液。

2.5 处方优化

2.5.1 正交试验优选处方 根据处方前研究的工作及结合预试验结果，参考文献[16-22]，选择卡波姆940作为雷公藤凝胶剂的基质，氮酮和丙二醇作为透皮促进剂，由于雷公藤提取物大部分为脂溶性成分，在水溶性基质中难以溶解及分散均匀，故选择乙醇用来溶解雷公藤提取物。在实验中，选择雷公藤提

t（h）分别按0级、1级与Higuchi动力学方程进行线性回归，结果见表11。由表10、11可知，雷公藤凝胶剂体外透皮过程以零级动力学方程拟合最优，其符合零级方程，透皮速率常数Js为0.6712 μg·cm-2·h-1，时滞Tlag为2.61 h。

表10 雷公藤甲素体外透皮数据(n=3)

表11 雷公藤甲素透皮数据拟合表(n=3)

3 讨论

通过单因素考察和正交试验优化的雷公藤凝胶剂最佳处方为：雷公藤提取物3 g，卡波姆940 2 g，乙醇10 g，甘油5 g，氮酮1 g，丙二醇10 g，尼泊金乙酯0.1 g，亚硫酸氢钠0.1 g，三乙醇胺适量，蒸馏水加至100 g。其制法为：将卡波姆940撒在适量水中，静置待其充分溶胀成凝胶基质；将雷公藤提取物溶于乙醇中，依次加入甘油、氮酮、丙二醇、尼泊金乙酯和亚硫酸氢钠，搅拌混合均匀，缓慢加入凝胶基质中并混合均匀，加三乙醇胺调节pH值至6～7，加蒸馏水至100 g，搅拌均匀。

卡波姆是一种引湿性较强的白色松散粉末，由于分子中存在大量的羧酸基团，可以在水中迅速溶胀，但不溶解，随着pH升高，黏度会随着增大。其分子结构中的羧酸基团使其在水中呈酸性，黏性较低。当用碱中和时，随大分子逐渐溶解，长键弥散伸展，形成空间网状结构，黏度也逐渐上升，在低浓度时形成澄清溶液，在浓度较大时形成半透明状凝胶。在pH值为6～11时黏度和稠度最大，而皮肤表面的pH值为4.2～5.6，偏酸性。为了使凝胶剂有较好的黏度和稠度，也为了避免凝胶剂对皮肤造成刺激，本实验选取凝胶剂的pH值为6～7。

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Study on preparation of Tripterygium wilfordii gels

Ma Xinbin Wang Lisheng Ba Wenqiang

Objective To optimize the Preparation of Tripterygium wilfordii gels.Methods With the appearance of the gel, viscosity, malleable and stability as examining index, the effects of the variety of matrix and the dosage and glycerin dosage of gels was investigated.By intro transdermal test to determine the best receiver solution of triptolide. By orthogonal select the best prescription gels and determine its optimal preparation. Finally, the best prescription Tripterygium wilfordii gels were investigated in vitro transdermal.Results In the appearance of gels,viscosity, spreadability

Tripterygium wilfordii;Gels;Preparation process;Quality evaluation

R942

A 【DOI】10.12010/j.issn.1673-5846.2016.11.006

1华南农业大学医院药剂科，广东广州 510642

2广州中医药大学中药学院，广东广州 510006

马鑫斌（1983-），硕士学位，药学专业，主管药师。主要从事药剂科工作。E-mail：maxinbin_HNYY@163.com

and stability as indexes,selecting the best gel matrix is carbomer 940,in an amount of 2%,glycerin in an amount of 5%.By transdermal test to determine the best reception triptolide solution of 50% methanol saline.By orthogonal select the best prescription for the drug gel 3%,1% of the amount of nitrogen ketone,propylene glycol 10% of the amount,and determine its optimal preparation of the carbomer 940 scattered on the amount of water,standing overnight,until the full swell into a gel matrix;would Tripterygium extract was dissolved in ethanol,glycerin,Azone, propylene glycol,ethyl paraben and sodium bisulfite,mixing evenly,then slowly add condensate plastic matrix and mixed evenly,and finally adjusting the pH with triethanolamine to 6-7,add distilled water to a final 100g,stirred evenly. Finally,the best prescription Tripterygium wilfordii gels were investigated in vitro percutaneous,transdermal gels result tripterygium process with zero-order kinetics equation was optimal,the zero-order equation.Transdermal rate constant Js is 0.6712μg·cm-2·h-1,Tlagis 2.61h.Conclusion The optimized preparation of Tripterygium wilfordii gels are characterized with simplicity, stable quality and good drug relaease rate.