金匮肾气丸联合胰激肽原酶治疗弱精子症

管凤刚，孙大林，金保方

金匮肾气丸联合胰激肽原酶治疗弱精子症

管凤刚1，孙大林2，金保方2

目的：探讨金匮肾气丸联合胰激肽原酶治疗弱精子症的疗效及可能机制。方法：将75例弱精子症患者随机分成对照组（35例）和治疗组（40例），对照组口服VitE胶囊，治疗组服用胰激肽原酶、金匮肾气丸；分别在治疗前和治疗3个月后检测精液量、精子浓度、前向运动精子比率、精浆超氧化物歧化酶，并观察配偶妊娠情况。结果：对照组治疗前、后的精液量为（3.15±1.13）m L、（3.68±1.24）mL，前向运动精子活动率为（26.54±4.52）％、（31.56±5.46）％，精浆SOD为（98.73±13.81）μmol/mL、（152.07±28.65）μmol/mL，组内差异具有统计学意义（P＜0.05）；治疗组治疗前、后的精液量为（3.02±0.95）mL、（4.25±1.53）mL，精子浓度为（20.59±2.86）×106/mL、（28.97±4.25）×106/mL，前向运动精子活动率为（25.58±4.36）％、（48.76±9.38）％，精浆SOD为（102.95±12.74）μmol/mL、（203.43±37.86）μmol/mL，组内差异具有统计学意义（P＜0.05）；且治疗组的改善程度优于对照组（P＜0.05）。结论：金匮肾气丸联合胰激肽原酶能显著改善弱精子症患者的精液活动率和精浆SOD，其作用机制可能是通过降低生精环境中的氧化应激损伤，改善精子活动率。

弱精子症；金匮肾气丸；胰激肽原酶；氧化应激；超氧化物歧化酶

男性不育症是指夫妻同居有正常性生活，未避孕超过1年，由于男方因素致使女方未能受孕。约有15％的夫妇在结婚1年内因不能怀孕而寻求治疗，男性精液参数异常者占50％，其中弱精子症占据较大比例，其病因包括精索静脉曲张、隐睾、内分泌疾病、生殖道感染、遗传疾病、免疫异常、理化因素等[1]。目前弱精子症仍缺乏特异性的治疗手段，仍以经验为主。金匮肾气丸由温补肾阳的药物组成，

可以提高睾丸内的睾酮水平，而胰激肽原酶是改善男性精子质量的常用药物。我们临床发现，两者合用可以显著改善精子质量。因此于2012年5月—2014年9月，我们通过临床研究，观察金匮肾气丸联合胰激肽原酶治疗弱精子症的疗效，报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料本组共75例，按随机数字表法，分为对照组35例和治疗组40例。

1.2 入选标准⑴婚后未避孕不育1年以上。⑵性生活正常。⑶女方生育能力基本正常。⑷标准的精液分析2次以上，均有精子浓度＞15×106/mL，前向运动精子比例＜32％。

1.3 排除标准⑴死精子症。⑵勃起功能障碍或射精障碍。⑶泌尿生殖系统先天畸形、感染。⑷近期有服用抗癫痫、抗肿瘤等影响生精功能和精子活力的药物。⑸染色体或精子发生基因异常。⑹合并心血管、肝、肾、造血系统严重原发性疾病者。

1.4 检测指标⑴精子质量分析：禁欲2～7 d，取精液于广口瓶，置于37℃恒温水浴箱内，孵育30min检测精液量、精子浓度、前向运动精子比例，并记录女方妊娠情况。⑵精浆超氧化物歧化酶（SOD）：采用黄嘌呤氧化酶法测定，SOD试剂盒为南京凯基有限公司产品。⑶观察并计算女方妊娠情况。

1.5 治疗方法对照组服用VitE胶囊（浙江医药股份有限公司新昌制药厂），100 mg/次，2次/d。治疗组口服胰激肽原酶（怡开，江苏常洲生化千红制药有限公司），120 U/次，3次/d；联用金匮肾气丸（北京同仁堂股份有限公司），5 g/次，2次/d。共3个月。本次实验经河南信合医院伦理委员会批准，并征得患者的知情同意。

1.6 统计学分析所有数据采用SPSS 17.0统计软件处理。数据用均数±标准差(±s)的格式表示。计量资料用t检验，计数资料用χ2检验。所有的检验均为双侧检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 一般资料两组年龄和病程相比较，无明显差异（P＞0.05），具有可比性。见表1。

表1 两组患者一般资料比较(n±s)

表1 两组患者一般资料比较(n±s)

n对照组治疗组P值35 40年龄29.11±2.77 28.7±3.71 0.59病程3.55±1.40 3.39±1.12 0.58

2.2 疗效对照组精液量、前向运动精子、精浆SOD均有显著提高（P＜0.05）。治疗组精液量、精子浓度、前向运动精子、精浆SOD均有显著改善，且提高程度由于对照组（P＜0.05）。治疗组妊娠率为17.5％，优于对照组的5.7％（P＞0.05）。见表2。

表2 两组患者治疗前后精液参数及妊娠率比较(n，±s)

表2 两组患者治疗前后精液参数及妊娠率比较(n，±s)

注：与同组治疗前比较，aP＜0.05；与同时刻对照组比较，bP＜0.05

n 精液量（mL）浓度（106/mL）前向精子活动率（％）SOD（μmol/mL）妊娠例数（％）对照组治疗前治疗后治疗组治疗前治疗后35 3.15±1.13 3.68±1.24a21.35±3.84 22.42±3.67 26.54±4.52 31.56±5.46a98.73±13.81 152.07±28.65a2（5.7）40 3.02±0.95 4.25±1.53a、b20.59±2.86 28.97±4.25a、b25.58±4.36 48.76±9.38a、b102.95±12.74 203.43±37.86a、b7（17.5）

2.3 不良反应治疗组2例服药初期出现口干、轻度腹泻，嘱其多饮水，注意饮食后自行缓解。未出现其他不良事件。

3 讨论

适量的活性氧有利于维持细胞的正常功能，过量的活性氧则会引起氧化应激，损伤机体的氧化防御系统。精子膜含有大量多聚脂肪酸，这一特殊结构使精子膜对活性氧的水平变化尤其敏感，极易受到活性氧的攻击而发生氧化应激损伤[2]。正常人精浆中还存在对抗活性氧的酶清除系统，如SOD，有维持精子正常形态和功能的作用。研究表明[3]，SOD参与精子活动力的调节，在男性不育症尤其是弱精子症发病中起着重要的作用。Sanocka等[4]用化学荧光法测定147例正常及不育者精液标本中SOD的活性，发现弱精子症患者精浆SOD水平降低。

目前针对弱精子症的治疗还缺乏特异性的方法，在抗氧化应激损伤方面主要运用维生素E、维生素C等。维生素E是细胞膜的结构成分，能与自由基结合成维生素E-自由基，将自由基阻挡在细胞质以外，并可以有效减少自由基的浓度，保护细胞膜上多不饱和脂肪酸免受自由基攻击和过氧化损伤，同时还有固定细胞膜、增加其稳定性的作用[5]。本研究也表明，维生素E能提高精浆抗氧化物SOD的含量，进而改善精液量和精子活动率。

怡开又名胰激肽原酶、胰激肽释放酶，是激肽系统的一个重要组成部分，属蛋白水解酶类，普遍存在于人体的胰腺、颌下腺与唾液中，其中以胰腺中含量最高。胰激肽原酶在治疗弱精子症中也取得了良好效果，有研究表明，147例例弱精子症每天用胰激肽原酶600 IU治疗，精子活动性有显著提高，受孕率37％[6]。但是其具体的作用机制仍不清楚。有报道，胰激肽原酶能减轻过氧化损伤，逆转心肌纤维化[7]。但是其能否改善生精过程的氧化应激损伤少有报道。

中医药很早就记载了对生殖的认识，早在《素问·上古天真论》“丈夫二八肾气盛，天癸至，精气益泻，阴阳和，故能有子。三八，肾气平均，筋骨劲强，故真牙生而长极。四八，筋骨隆盛，肌肉满壮。五八，肾气衰，发堕齿槁。六八，阳气衰竭于上，面焦，发鬓颁白。七八，肝气衰，筋不能动。八八，天癸竭，精少，肾脏衰，形体皆极则齿发去。肾者主水，受五脏六腑之精而藏之，故五脏盛，乃能泻。今五脏皆衰，筋骨解堕，天癸尽矣，故发鬓白，身体重，行步不正，而无子耳”，奠定了肾与生殖的密切关系。精子的正常与否取决于肾的功能，肾气充足则精液盈满，精子活泼；肾气不足，必然导致不能藏精，精液改变而影响生育[8]。大量研究表明，补肾方能提高在体和离体睾丸间质细胞合成睾酮的能力，并能缓解生精环境的氧化应激损伤[9]。根据临床观察以及微观辨证，弱精子症不育患者多属于肾阳虚证型[10]。金匮肾气丸为中医经典的温补肾阳方剂，由附子、肉桂、熟地黄、山药、山茱萸、牡丹皮、茯苓、泽泻等组成。临床观察报道，金匮肾气丸治疗肾阳虚不育有效，并且能显著改善氧化应激损伤，提高精子活动率[11-12]。在临床中，运用金匮肾气丸联合胰激肽原酶治疗弱精子症效果明显，但是仍缺乏临床数据和研究的支持，未见两者连用的研究报道。基于此，本研究确立了研究方案。

而本研究的结果也证实，金匮肾气丸联合胰激肽原酶能显著提高弱精子症患者的精液量、精子活动率及精子浓度，并可增加精液中SOD的含量，增强抗氧化能力，增加受孕率，且效果优于维生素E组。治疗组妊娠率为17.5％，优于对照组，但无明显统计学差异，可能是样本量较少的缘故。研究结果说明了金匮肾气丸和胰激肽原酶能改善生精过程的氧化应激损伤，且具有协同作用。同时以方测证，验证了弱精子症患者中肾阳虚证型占有较大的比例[10]。

多糖是一类广泛存在于动植物、微生物细胞中的重要的生物大分子物质。随着分子生物学研究的进展，人们逐渐发现不同来源的多糖具有广泛而复杂的生物学活性。近年来，研究发现，多糖具有显著的抗氧化作用[13]。金匮肾气丸中的君药是熟地，量最大，为八两。其化学成分主要是地黄多糖，具有抗氧化作用，可以提高血SOD、过氧化氢酶及谷胱甘肽活力，降低血浆、脑匀浆及肝匀浆中过氧化物脂质水平[14]。据报道，山药多糖、山茱萸多糖、丹皮多糖、茯苓多糖和泽泻多糖均具有抗氧化作用[15-17]。因此，我们推测金匮肾气丸发挥抗氧化作用可能是通过其组方中的多糖成分，这还有待于进一步的研究证实。

综上所述，金匮肾气丸联合胰激肽原酶能改善弱精子症的精子活动率和浓度，提高妊娠率，增加生精环境中抗氧化能力，具有较好的临床疗效，且未见不良反应，可以作为临床上治疗弱精子症不育症的选择方案。由于本研究未使用盲法，可能存在一定的偏倚。并且弱精子症的病因复杂，怡开存在改善微循环，金匮肾气丸还能影响内分泌等因素，因此，本研究还有待于深入研究。

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（收稿：2016-04-10修回：2016-07-20）

（责任编辑 张亚强）

Study of Jinkui Shenqi Pill combined Kallidinogenase on Treating Asthenosperm ia

GUAN Feng-gang, SUN Da-lin,JIN Bao-fang Henan Xinhe Hospital,Xinyang（465200）,China

Objective To investigate the clinical efficacy of Jinkui Shenqi and kallidinogenase in treating asthenospermia patients and its possible mechanism.M ethods According to the inclusion criteria,75 patients with asthenospermia were random ly divided into control group(35 cases)and treatment group(40 cases).The control group was treated with oral vitamin E capsules,100 mg,2 times/day,while the treatment group took both taking 120u kallidinogenase,3 times/day and Jinkui Shenqi Pill,5 g per time,2 times/day.In both groups,sperm concentration and superoxide dismutase were detected before and after three months of treatment respectively.And the pregnantwomen were observed.Results In the control group,before and after treatment,the semen volumes were(3.15±1.13)mL vs(3.68±1.24)mL,activity ratio of prorsad spermatozoa (26.54±4.52)％vs(31.56±5.46)％,seminal SOD(98.73±13.81)μmol/mL vs(152.07±28.65)μmol/mL.It had statistical difference between the group(P＜0.05).In the treatment group,before and after treatment,the semen volumes were(3.02±0.95)mL vs(4.25±1.53)mL,sperm concentrations(20.59±2.86)×106/mL vs(28.97±4.25)× 106/mL,sperm forward movement ratio(25.58±4.36)％vs(48.76±9.38)％,seminal SOD(102.95±12.74)μmol/ m l vs(203.43±37.86)μmol/mL.It had statistical difference between the groups(P＜0.05).Besides,it was obviously ameliorated compared to the control group(P＜0.05).Conclusion Jinkui Shenqi Pill combined with kallidinogenase can obviously improve sperm activity rate and increase SOD in seminal plasma of asthenospermia patients.Its mechanism may involve reducing the oxidative stress injury in the environment of the sperm,and improving sperm motility.

Asthenospermia;Jinkuishenqi pill；kallidinogenase；oxidative stress；superoxide dismutase

R697+.4

A

1007-6948(2016)05-0424-04

10.3969/j.issn.1007-6948.2016.05.002

国家自然科学基金（81473678）；国家自然科学青年基金（81403402）

1.河南信合医院生殖医学科（信阳465200）

2.东南大学附属中大医院中西医结合男科（南京210009）

金保方，E-mail:hexiking@126.com