寻常型银屑病患者外周血中白介素-35的检测

林 玲 张丽丹 刘炜钰 李 薇 龚叶青 罗 权

寻常型银屑病患者外周血中白介素-35的检测

林 玲 张丽丹 刘炜钰 李 薇 龚叶青 罗 权

目的: 检测寻常型银屑病患者外周血中白细胞介素35(IL-35)水平。方法: 应用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)检测30例寻常型银屑病患者外周血清中IL-35的水平。结果: 与正常人对照组相比，寻常型银屑病患者血浆IL-35水平显著降低，进行期患者组显著低于静止期患者组(P＜0.05)。IL-35血清水平与寻常型银屑病严重程度指数呈负相关(P＜0.05)。结论: IL-35在寻常型银屑病的发病中可能起重要作用。

银屑病； 白细胞介素35

银屑病是多基因遗传背景下T细胞失常的免疫性疾病，目前其发病机制尚不清楚。有研究表明T细胞活化在银屑病发病的免疫过程中起重要作用，在T细胞的调控中，调节性T细胞(Treg)的作用是研究的热点之一[1]。IL-35是2007年发现的IL-12家族的一个新成员，是由EB病毒诱导基因3(epstein-barr virus-induced gene 3，EBI3)亚基和p35亚基结合而成的异二聚体[2，3]。研究表明IL-35是与Treg有密切关系的新型免疫调控分子，具有重要的免疫调节功能。本研究通过对寻常型银屑病患者血清中IL-35表达水平进行分析，探讨IL-35在寻常型银屑病发病中的可能作用及其临床意义。

1 对象与方法

1.1 研究对象 2012年12月至2013年10月在我所门诊就诊的寻常型银屑病患者共30例。病例筛选标准:根据《临床皮肤病学》[4]诊断标准临床确诊者，其中有20例经病理活检明确诊断；所有银屑病患者近2个月内未系统应用维A酸、糖皮质激素、免疫抑制剂等药物；2周内未使用任何外用药物。病例中男20例，女10例，年龄25～70岁，平均40岁。根据《临床皮肤病学》[4]分期标准患者进行期18例，静止期12例，病程6个月～10余年。银屑病患者的皮损面积和严重程度PASI评分为7.6～30.4分，平均(12.06 ±3.48)分。另取30名正常人血清作为对照组，无免疫性疾病及系统性疾病，无银屑病家族史。正常人对照组与银屑病患者组在性别及年龄上无统计学差异。

1.2 标本收集 患者自肘静脉抽血5 mL，置于高压消毒的试管中，2000 r/min离心15 min，小心吸取上层血清置-20℃冰箱保存备用。对照组取正常人血清按同样条件保存备用。

1.3 检测方法 采用双抗体夹心酶联免疫技术(ELISA)方法，具体操作严格按说明书进行。IL-35试剂盒购自武汉博士德生物工程公司。

1.4 统计学方法 统计学处理利用SPSS 11.0软件包进行分析，各组间均数比较采用t检验。银屑病患者血清IL-35与寻常型银屑病严重指数PASI评分之间相互关系采用直线相关分析。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 血清IL-35浓度 寻常型银屑病患者血清IL-35的水平低于对照组(P＜0.01)。进行期与静止期的寻常型银屑病患者血清IL-35水平差异有显著性(P＜0.05)，见表1。

表1 各组血清中IL-35水平比较 (ng/mL)

2.2 血清IL-35水平与银屑病皮损面积和严重程度PASI评分的关系 寻常型银屑病患者血清中IL-35水平与银屑病严重程度PASI评分呈负相关，相关系数为:0.437(P＜0.05)。

3 讨论

-35血清浓度低于静止期组患者(P＜0.05)，提示IL-35作为一种抑制性细胞因子，可能在银屑病发病过程中起了抗炎作用。随病情控制，银屑病静止期患者组IL-35水平逐渐上升至正常，提示IL-35水平随着银屑病病情的缓解而恢复。相关性分析显示寻常型银屑病患者血清中IL-35水平与银屑病严重程度评分PASI呈负相关，提示寻常型银屑病患者血清中IL -35水平与银屑病病情轻重有关，这一结果可望成为评估寻常型银屑病严重程度的指标。我们的研究结果提示IL-35可能参与了寻常型银屑病的发病机制，在寻常型银屑病的发病中可能发挥免疫调节作用，具体作用机制还有待进一步研究。

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(收稿:2016-05-14 修回:2016-07-07)

目前普遍认为银屑病发病是一种多基因遗传多因素作用参与的T细胞免疫介导的多种致炎因子共同参与的炎症性、增生性皮肤病。既往研究表明，T细胞在银屑病发病的免疫过程中起到重要作用，研究发现Th1细胞分化偏态性，以IFN-γ为代表的Th1细胞因子在银屑病发病机制中起重要作用[5]。近年进一步研究发现两种与Th1细胞和Th2细胞不同的独立T细胞亚群Th17与Treg细胞在银屑病发病中亦起着重要作用，介导一系列炎症反应的Th17细胞与介导免疫耐受的Treg都来源于初始T细胞，Th17是产生IL-17的T细胞亚群，Treg则在体内执行免疫抑制功能，限制过度及错误的免疫应答，两者功能和分化过程相互对抗，在正常情况下两者保持平衡，有利于机体的免疫稳定状态的维持。Treg细胞作用机制主要包括通过分泌细胞因子IL-10、TGF-β和细胞间直接接触介导免疫抑制[6]。IL-35是近年来新发现的具有免疫抑制功能的细胞因子，为白介素-12家族新成员，它与TGF-β、IL-10一样，为CD4+CD25+Treg细胞发挥免疫调节作用所依赖的细胞因子，在CD4+CD25+Treg细胞参与下通过直接作用于效应性T细胞或者通过诱导产生IL-10诱导调节性T细胞，对效应性T细胞和炎性细胞因子分泌产生抑制作用，同时IL-35能显著抵制Th17细胞的分化和功能，从而影响IL-17的水平和作用[7，8]。我们研究结果显示，寻常型银屑病患者血清IL-35明显低于正常对照组(P＜0.01)，说明血清中IL-35水平变化与银屑病发病有着密切关系。我们的实验结果还显示在不同病期IL -35血清浓度差异有显著性，其中进行期组的患者IL

Detection of interleukin-35 in serum of the patients w ith psoriasis vulgaris

LIN Ling，ZHANG Lidan，LIUWeiyu，LIWei，GONG Yeqing，LUO Quan. Guangzhou Institute ofDermatology，Guangzhou 510095，China Corresponding author:LUO Quan，E-mail:luoquan666@126.com

Objective:To detect serum level of IL-35 in the patients with psoriasis vulgaris.M ethods: Serum level of IL-35 was measured by double antibody sandwich enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA)in 30 patients with psoriasis vulgaris.Results:The serum level of IL-35 was significantly higher than that in normal controls(P＜0.01)，and there was significant difference between the active stage and the resting stage of the disease(P＜0.05).The serum level of IL-35 was negatively correlated to PASI score. Conclusion:The IL-35 may play an important rale in the pathogenesis of psoriasis vulgaris.

psoriasis；IL-35

广东省卫生厅医学科研基金(编号:A2013545)广州市医药卫生科研项目(编号:20131A011129)

广州市皮肤病防治所，广东广州，510095

罗权，E-mail:luoquan666@126.com