一种简易小鼠尾静脉注射固定法——笼盖压制法

李轶倞，张 娜，田 枫

(北京大学医学部实验动物科学部，北京 100191)



技术方法

一种简易小鼠尾静脉注射固定法
——笼盖压制法

李轶倞，张 娜，田 枫

(北京大学医学部实验动物科学部，北京 100191)

目的 介绍一种简便易行的小鼠尾静脉注射固定方法。方法 20只BALB/C雄性荷瘤裸鼠，由实验员A和实验员B用笼盖压制法固定小鼠进行尾静脉注射,观察注射完成时间和成功率。结果 两位实验员100%均可完成尾静脉注射。结论 笼盖压制法为小鼠进行尾静脉注射提供了一种简易方法，特别对于特殊形态的小鼠进行尾静脉注射更加有效。

小鼠；尾静脉注射；固定；笼盖压制法

大、小鼠尾静脉注射是一种常用的动物技术，注射工作顺利完成与否和固定方法的选择密切相关。而且如果要在短时间内对大量动物同时给药，特别是对尾静脉注射而言，方便、恰当的动物固定方法是非常重要的[1]。一般情况下，大多实验者选择使用商品化的固定器固定小鼠，见图1，是将固定器打开，左手拎鼠尾至于固定器中，关闭固定器。在实际工作摸索出一种简便易行的小鼠尾静脉注射固定方法，即笼盖压制法，亦有相关文献对此方法进行过报道[2]。笼盖压制法是用右手打开笼盖，左手持鼠尾，将动物放在鼠盒中只留鼠尾，关闭笼盖，右手涂抹酒精对鼠尾注射部位消毒，并进行静脉注射，见图2。本文以荷瘤裸鼠实验为例，介绍笼盖压制法在小鼠尾静脉注射中的应用。

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1 实验动物：SPF级BALB/C裸鼠，20只，雄性，16 g～20 g，购自北京大学医学部实验动物科学部，实验动物生产许可证号：SCXK(京)2011-0012。饲养于北京大学医学部实验动物科学部屏障环境中，使用许可证号：SYXK(京)2011-0039。饲喂全价SPF 级大、小鼠繁殖饲料，由北京科澳协力饲料有限公司生产。20只裸鼠腋下接种肺癌细胞，待肿瘤长到约80 cm3时开始进行尾静脉注射，

1.1.2 试剂:0.9%氯化钠注射液，石家庄四药有限公司，批号为141231425。BD 1 mL一次性使用无菌注射器带注射针，碧迪医疗器械(上海)有限公司经销，批号为4345295。

1.2 方法

实验分为2组，每组10只小鼠，分别由技术熟练的实验员A和实验员B按标准操作规程应用笼盖压制法对小鼠进行尾静脉注射，每次每只小鼠注射100 μL 0.9%氯化钠注射液，注射完成注意用干棉球压迫止血。每次注射记录完成尾静脉注射的时间，并观察注射成功率。完成时间数据以时间的均值及标准差表示。实验操作过程中按实验动物使用的3R原则给予人道的关怀。

2 结果

实验员A和实验员B 使用笼盖压制法均能100%完成尾静脉注射，完成时间见表1。

组别Groups注射所用时间Timeofinjection成功率(%)Successrate实验员ATechnicianA300.7±8.1100实验员BTechnicianB295.3±7.2100

3 讨论

动物实验中最基本的实验技术，如抓取与固定方法、给药方法等，虽然已经有较完整的实验方法，但在实际工作中操作者往往会摸索出更有效的实验技巧[3-5]。

大、小鼠尾静脉注射法由于其在体内吸收快，剂量明确等优点，往往被实验者所选用。尾静脉注射操作过程中，选对良好的固定方法，是保证实验顺利完成的重要基础。有关动物实验的相关教材中通常将固定器固定法作为常用的方法介绍给读者[1]，但是小鼠传统固定器多采用金属或有机玻璃等制成，自已加工制做不易，购买成本较高，部分文献报道的新型小鼠固定装置则制作较为复杂，且不易清洗[6]。而且我们在以往的工作中发现传统固定器固定方法存在一些弊端，如由于每次注射，要开关固定器就相对耽误时间。而且固定器相对单一的尺寸设计对于不同品系、不同模型的小鼠适应性也较差。在操作过程中，固定过松，小鼠容易调转身体起不到固定作用，而固定过紧又容易造成小鼠窒息死亡。另外，有的固定器为不锈钢材质，不利于观察小鼠注射药物后的状态。

由于工作中经常需要对大量小鼠进行尾静脉注射，简便快捷的固定方法是非常重要的。亦有其他文献报道一些改进的或自制的尾静脉注射装置供大家参考[7-8]。为此，我们探索使用笼盖压制法固定小鼠，由于不需要开关固定器，达到了省时省力的目的，能够在短时间内对大批实验小鼠进行安全，快速的尾静脉注射。同时对于个别体重过大DB/DB小鼠或荷瘤鼠等特殊形态的小鼠亦可以起到良好的固定效果，并便于观察被试动物对于药物的应激反应。本文的实验结果仅我们每年数万次小鼠尾静脉操作中的一个实例。

由于实验选择的有特殊代表性的荷瘤小鼠，结果显示笼盖压制法的确对于体积较大或荷瘤小鼠的固定更显示其独有的优点，与固定器法相比，不再受固定器尺寸的影响。但是笼盖压制法对于需多次重复尾静脉注射实验不太适宜。由于多次尾静脉注射时，此种固定方法尾静脉不易看清，影响注射效果。另外需要指出的是笼盖压制法的使用也可能与实验人员的习惯性有关，若比较习惯使用这种方法，则会比较便捷；若不习惯使用笼盖压制法则可能在完成尾静脉注射的时间上比传统固定器法要慢。由于我们实验技术人员均能较适应这种固定方法，因此在用时上较短。如果新的操作人员可能需要一定的时间磨合才可在较短的时间完成静脉注射。

这里将最常使用的固定器固定法与本实验应用的笼盖压制法从安全性、观察性、适用范围、消毒性、交叉污染、费用、快捷性、多次注射的重复性八个方面进行了比较，见表2，供实验人员试具体实验条件选择应用。

图1 固定器固定法Fig.1 Traditional fixing device

图2 笼盖压制法Fig.2 Cage lid pressing method

固定方法Fixingmethods安全性Safty对小鼠Formice对操作者Foroperator观察性Observability适用范围Applicability消毒性Disinfection交叉污染Crosscontamination费用Expenses快捷性Rapidity多次注射重复性Repeatability固定器固定法TraditionalFixingdevice固定过紧易窒息Tootightfixingmaycausesuffocation安全Safe固定过紧,不利于观察应激反应Inconvenientobservation适用范围相对较小Relativelysmallapplica-bility易于消毒Easytodis-infect不会交叉污染Nocrosscon-tamination较贵Moreex-pensive相对费时Rela-tivetime-consuming最佳Best笼盖压制固定法Cagelidpressing安全Safe安全Safe利于观察反应convenientob-servation适用范围较为宽泛Relativelywideapplica-bility易于消毒Easytodis-infect不会交叉污染Nocrosscon-tamination无额外费用Nomoreex-pense简便Simple不好Notgood

4 结论

综上所述，笼盖压制法用于小鼠的尾静脉注射的固定是切实可行的，特别是对特殊形态的小鼠进行尾静脉注射时可起到较好的固定效果。

[1] 郑振辉，周淑佩，彭双清. 实用医学实验动物学 [M]. 北京：北京大学医学出版社，2008: 289.

[2] 王玖恒，张 园，谭乐诚，等. 一种小鼠尾静脉注射的新方法 [J]. 广西中医学院学报，2012，15(2): 155-156.

[3] 姜骊, 陈辉, 何勇. 一种新的大鼠灌胃方法——侧抓灌胃法 [J]. 实验动物科学, 2011, 28(6): 62-63

[4] 陈霆，李枫棣，邓巍，等. 小鼠内眦静脉丛注射与尾静脉注射比较 [J]. 中国比较医学杂志, 2014, 24(1): 72-73.

[5] 刘保新,陈廖斌,汪晖.介绍一种简易的大鼠固定装置 [J]. 中国比较医学杂志, 2008, 18(3): 75-76.

[6] 刘辉，康白. 小鼠固定器的制作与应用 [J]. 临床和实验医学杂志，2010，9(3): 227- 228.

[7] 施文, 孙永强. 小鼠尾静脉注射和采血简易固定装置的制作和使用方法 [J]. 免疫学杂志，2011，27( 9): 807-808.

[8] 苏丽娜，郭剑伟，饶光玲. 小鼠尾静脉注射与断头取血实验技术的改进 [J]. 大理学院学报，2010，9(6): 25-27.

A simple fixing method for tail vein injection in mice—cage lid pressing method

LI Yi-jing, ZHANG Na, TIAN Feng

(Department of Laboratory Animal Science, Peking University Health Center，Beijing 100191, China)

Objective To introduce a simple fixing method for tail vein injection in mice. Methods Twenty tumor-bearing male BALB/c nude mice were used in this study. Tail vein injection was performed to these mice by two laboratory technicians A and B, respectively. The injection time and success rate were recorded and analyzed. Results Mouse tail vein injection was successfully completed by the two technicians with the cage lid pressing method. Conclusions Cage lid pressing method is a simple method for tail vein injection in mice, especially provides a more efficient method for those special form of mice.

Mice; Tail vein injection; Fixing method; Cage lid pressing method

北京高等学校青年英才计划项目(编号：YETP0057)。

李轶倞(1984-)，女，技师，专业：动物实验及管理。E-mail: 434362038@qq. com。

田枫 (1973-)， 女，博士，副主任技师，研究方向：实验动物研究与管理方面研究。E-mail: fengtian_38@163. com。

R-33

A

1671-7856(2016)10-0079-03

10.3969.j.issn.1671-7856. 2016.10.015

2016-08-15