保定市及周边地区圆环病毒2型免疫情况调查
2016-11-29范京惠左玉柱邸晶美刘宝京罗尚星李清艳
代 飞,范京惠,左玉柱,邸晶美,刘宝京,罗尚星,李清艳
( 河北农业大学动物医学院,河北 保定 071001)
保定市及周边地区圆环病毒2型免疫情况调查
代 飞,范京惠,左玉柱**,邸晶美,刘宝京,罗尚星,李清艳*
( 河北农业大学动物医学院,河北 保定 071001)
从保定市周围9个已免疫过猪圆环病毒2型疫苗的不同规模大小的猪场,共采集431份血清,其中,阳性抗体的血清数为266份,抗体阳性率为62.18%。阴性血清的血清数为113份,抗体率为26.22%。可疑血清数为50份,占收集血清的11.6%。由此可以得出,保定市周边猪场的圆环疫苗免疫情况不理想。
保定;猪圆环2型;免疫情况
猪 圆 环 病 毒(PorcineCircovirus,PCV)属于圆环病毒科(Circoviridae),圆环病毒属(Circovirus),是目前发现最小的动物病毒之一[1,2]。为无囊膜单股环状DNA病毒。PCV 可分为PCV1 和PCV2两种基因型。PCV2能导致猪群发病,PCV1不具有致病性。PCV2是引起断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)、猪皮炎与肾病综合征(Porcine dermatitis and nephropathy syndrome, PDNS)、猪先天性震颤(Congenita1 tremor of swi)、母猪繁殖障碍(Reproductivefai1ure)、猪呼吸道疾病综合征(Porcine respiratory disease comp1ex, PRDC )的主要病原[3],自1991年加拿大首次报道PMWS以来,该病已波及世界各地,在我国猪群中十分流行,临床上常与猪高致病性繁殖与呼吸综合征、猪口蹄疫以及猪细小病毒等混合感染、继发感染,给全世界养猪业造成了重大的经济损失[4-5];PCV 病毒粒子呈二十面体对称,无囊膜,PCV2 基因组全长为 1 767 bp (PCV2b)或 1 768 bp(PCV2a),PCV 基因组含有11 个开放阅读框ORF1~ORF11,其中ORF1 和 ORF2 是最大的两个开放阅读框。ORF1编码与病毒复制相关的两个蛋白Rep 和 Rep’蛋白有关,ORF2 基因编码病毒唯一的结构蛋白 Cap 蛋白,Cap 蛋白能够诱导机体的免疫应答构成病毒的核衣壳。本文利用ELISA方法对采集保定周边的已免疫过猪圆环病毒疫苗的血清,调查了解猪圆环病毒疫苗的免疫情况,并评估发生猪圆环病毒病的潜在风险。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 实验用猪血清来源
保定市及其周边9个已免疫过猪圆环病毒疫苗的猪血清。
1.1.2 实验仪器酶标仪(美国Thermo Scientific mu1tiskan FC型),离心机(美国Hea1 Force Neofuge 13R型),猪圆环病毒2型ELISA试剂盒,购自于深圳芬德生物技术有限公司。其他实验用品和耗材均有河北农业大学动物医学院免疫与微生物实验室提供。
1.2 方法
1.2.1 材料的采集与处理
采集各阶段猪的全血,做好记录(见表1),然后2 292 r/min离心5 min,冰箱4 ℃保存。
1.2.2 ELISA抗体检测
依照PCV2的ELISA抗体检测试剂盒的说明书进行操作。
1.2.3 结果判定
加完终止液后,10 min内在酶标仪上测量各空的OD450值。OD450值大于等于0.38为阳性,样品OD450值小于0.1为阴性。样品值在0.1和0.38之值,判定为可疑。
2 结果
对9个养猪场431份血清,用ELISA试剂盒检测抗体水平,结果发现阳性抗体的血清数为268份,抗体阳性率为62.18%。阴性血清的血清数为113份,抗体率为26.22%。可疑血清数为50份,占收集血清的11.6%(表2)。其中,经产母猪的抗体阳性率为64.47%,后备母猪的抗体阳性率为52.63%,哺乳仔猪的抗体阳性率为61.31%,保育仔猪的抗体阳性率为65.88%(表3)。
表1 血清来源
表2 检测结果
表1 血清来源
3 结论与讨论
猪圆环病毒病是由猪圆环病毒感染引发的,以免疫抑制为主要特征的病毒性传染病。目前,市场上还没有有效的药物来治疗猪圆环病毒病,主要还是以预防为主。目前,市场上疫苗的类型主要是灭活疫苗和PCV2亚单位疫苗。猪群抗体水平低,可能有以下几个原因;首先,可能是疫苗的运输、储存、使用环节出现问题,疫苗要按说明书规定进行储存。猪场技术人员在注射疫苗的过程中出现操作失误,注射器械不经过严格的消毒。也可能猪群中感染了某些能够引起免疫抑制的疾病。比如PRRS能破坏机体的免疫系统导致疫苗的免疫失败。再有就是免疫程序不当也会导致疫苗的免疫失败。如果猪群在免疫疫苗之前使用了抗菌药物,如:糖皮质激素、链霉素、四环素等药物。这些药物能够抑制动物体内抗体的产生,影响免疫效果。
从检测结果来看,保定市周边猪场的猪圆环病毒疫苗的免疫情况不够理想,抗体阳性率只有50%~60%。抗体水平过低不足以给猪群提供有效的免疫保护。
[1]TISCHER I,MIELDS W,WOLFF D,et a1.Studies on epidemio1ogy and pathogenicity of porcine circovirus[J].Arch Viro1,1986,91:271-276.
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2016-09-02)
河北农业大学百名青年学术带头人培养计划(编号0318011)
代飞(1990.08— ),河南邓州人,预防兽医学硕士研究生,主要从事猪传染病防控研究