两种血小板聚集分析仪检测结果的分析比较

楚杜武，任军伟，丛玉隆

（1.北京世纪坛医院检验科，北京100038；2.兵器工业北京北方医院检验科，北京100089；3.解放军总医院西院检验科，北京100853）

两种血小板聚集分析仪检测结果的分析比较

楚杜武1，任军伟2，丛玉隆3

（1.北京世纪坛医院检验科，北京100038；2.兵器工业北京北方医院检验科，北京100089；3.解放军总医院西院检验科，北京100853）

目的 通过PL-11血小板分析仪（结果用最大聚集率，maximum aggregation rate，PL-MAR%表示）与光比浊法血小板聚集仪（light transmittance aggregometry，LTA，结果用血小板最大聚集率，LTA-MAR%表示）检测结果的比较分析，探讨两种方法的优略。方法 利用二磷酸腺苷（adenosine phosphate，ADP）诱导LTA的血小板聚集实验，ADP诱导PL-11血小板分析仪的血小板聚集实验。结果 ①对照组与患者组对比，LTA-MAR%，PL-MAR%参数有统计学差异（P＜0.01）；②PL-MAR%与LTA-MAR%呈正相关（r=0.889）。结论 ①氯吡格雷有抗血小板聚集的药物效果。②PL-11作为一种新型的血小板分析仪，检测结果与LTA检测结果相关性好，精密度高，可作为血小板聚集功能检测的新途径。

血小板聚集； PL-11； 光比浊血小板聚集仪； ADP

目前我国心血管疾病患者已超过2.7亿，按全国人口14亿计算，近5个中国人中就有1人患心血管疾病。随着心血管病患者抗血小板药物的广泛使用，如何更有效、更准确地掌握个体患者的服药效果，科学地进行个体化治疗，就需要有更好的临床检验监测手段。目前，光比浊法血小板聚集仪（light transmittance aggregometry，LTA）在临床上的使用率超过95%，是公认的血小板聚集检测的金标准［1］。当前，市场上新推出了一种以电阻抗法连续监测血小板数量判断聚集情况的新型仪器PL-11。本文通过PL-11与LTA在血小板聚集功能方面的平行检测、分析与探讨，达到对PL-11检测性能和方法学的深入了解，为临床医生提供一个抗血小板药物药效监测及血小板功能检测的新途径。

材料和方法

1 仪器及试剂

CHRONO-LOG MODEL700血小板聚集分析仪及其配套试剂（美国CHRONO-LOG公司）；PL-11血小板分析仪及配套试剂（南京神州英诺华医疗科技有限公司）；Thermo IEC CL40离心机（美国Thermo公司）；SYSMEX XE-2100血细胞分析仪及其配套试剂（日本 Sysmex公司）；枸橼酸钠抗凝管（美国 BD公司）。

2 观察对象及标本采集

①随机选取37例健康志愿者作为对照组，男性25例，女性12例；使用简单随机化（随机数字表法）选取单服用氯吡格雷（75mg/d）10天以上的心脑血管病患者32例作为患者组，男性23例，女性9例（同时未服用其他抗血小板聚集类药物）。②用3支3.8%枸橼酸钠抗凝真空采血管采集静脉血，分别采集3mL。2支3mL样本进行LTA实验；1支3mL样本进行英诺华PL-11血小板分析仪实验。

3 方法

3.1比浊法血小板聚集仪实验［2］（light transmmitance aggregometry） 使用10μmol/L二磷酸腺苷（adenosine diphosphate，ADP）作为诱导剂，用血细胞分析仪测定富血小板血浆（platelet rich plasma，PRP）的血小板浓度，用贫血小板血浆（platelet poor plasma，PPP）调整PRP血小板浓度为（200～300）× 109/L［3］，检测ADP诱导血小板聚集率。

3.2PL-11血小板分析仪实验 将样本置于仪器的待测试位置，按“检测”键，等待测试完毕，打印结果。

4 主要观察指标

ADP诱导LTA测得血小板最大聚集率（LTAMAR%）；PL-11测 得 最 大聚 集率（maximum aggregation rate，PL-MAR%）。

5 统计学处理

用EXCEL2007整理数据，用SPSS13.0软件包进行对照组与患者组的配对t检验以及所有观察对象2种测试方法测得参数的双变量相关性分析。P＜0.05表示差异有统计学意义。

结果

1 对照组与患者组观察指标（参数）

LTA 测得的LTA-MAR%；PL-11测得的MAR%。请参见表1。

表1　LTA，PL-11测得对照组与患者组组参数对比（±s）

表1　LTA，PL-11测得对照组与患者组组参数对比（±s）

注：*代表非正态分布，用中位数表示，并用 Mann-Whitney两独立样本秩和检验法；其余参数值均服从正态分布，用配对t检验

项目对照组患者组P 值结果LTA-MAR%71.4±13.844.5±14.2＜0.01有统计学差异PL-MAR%70.1±9.051（P50）*＜0.01有统计学差异

2 PL-MAR%，LTA-MAR%参数双变量相关性分析

所有观察对象的参数首先通过单变量方差分析进行斜率差异性检验，结果均为P＞0.05，即直线斜率、截距无差异；然后进行PL-MAR%，LTA-MAR%两个参数双变量相关性分析，得到r=0.889，即两个参数相关性良好。

讨论

血小板是血栓形成的重要因素，检测血小板聚集功能对于早期血栓形成的风险评估，阐明相关疾病的病理机制及临床选择正确的治疗方案等有重要意义。

光学比浊血小板聚集功能检测是将PRP置于比色杯中，加入诱导剂后，用涂硅小磁粒进行搅拌，血小板逐渐聚集。光探测器接收这一血小板聚集反应体系中连续变化的光信号，经过转换，最终将透射光的强度变化通过光强度-时间变化曲线描绘出来，就可直接通过图表观察到血小板聚集的全过程，以此反映出血小板聚集的速度、程度、血小板解聚等方面的参数和信息［4］。PL-11血小板分析仪是通过在抗凝全血中加入诱聚剂使血小板发生聚集，仪器均匀选取若干测试点测定非聚全血中的血小板数量，通过与ADP诱聚前最开始测得的两次血小板数量平均值对比得出血小板聚集率，以此反映血小板聚集功能，所测参数有血小板最大聚集率（MAR%）、血小板最大聚集点（MAP%）、血小板平均聚集率（AAR%）、血小板数量、平均血小板体积（MPV）、红细胞数量、平均红细胞体积（MCV）7个参数。

本实验中，首先，从表1结果可以看出健康对照组与患者组相比：LTA-MAR%、PL-MAR%参数在2组之间都有显著性差异；这说明：①氯吡格雷具有一定的抗血小板聚集功能，只是药效不是很强［5］。造成这种情况的原因很多，如遗传变异性、患者依从性差、氯吡格雷剂量不足以及CYP3A4相关的药物间相互作用等；②PL-11作为新型血小板分析仪，测得患者PL-MAR%结果的中位数是51（P50），与对照组MAR%结果70.1±9.0相比，约减低27%，同时LTA测得的LTA-MAR%约减低38%，两者结果有可比性。分析可能的原因：①LTA使用的是离心血浆，它的检测状态与体内全血的凝集状态有一定差异，因为它去除了红细胞参与聚集所产生的效果，而红细胞对于体内血栓的形成是十分重要的。

PL-11测得的PL-MAR%与LTA测得的LTAMAR%相关性良好（r=0.889），与关杰等［6］的结果一致。而目前国际上仍公认LTA是血小板聚集功能检测的金标准［1］。所以，两种仪器检测结果各参数之间的良好相关性证明了PL-11检测结果的准确性。

综上所述，PL-11作为新型的血小板聚集分析仪，通过对与LTA平行测定结果的研究分析，发现其有一定特点：①采用“自动连续检测”的方法，直接对血样中诱聚剂加入后血小板数量、体积的变化进行持续监测，测得聚集前、后血小板数量的变化，计算得出血小板聚集功能水平，与LTA依靠光浊度变化间接信息推断相比，检测信号更加直接，干扰因素少，不受溶血、脂血、黄疸等标本浊度的影响；②采用抗凝全血作为测试样本，基本保持与体内血液组成状态一致，白细胞、红细胞参与检测过程，更符合体内真实的血小板聚集状况；③PL-11仪与LTA相比，准确性较好，精密度更高；④仪器同时还能提供血小板平均体积（MPV）、红细胞数量、平均红细胞体积（MCV）等参数，一次测定，便可对样本多个方面分析评价，更加全面。⑤仪器操作简便、快速、检测费用低廉。以上几点，说明PL-11可以作为临床医生进行抗血小板药物药效监测，血小板聚集功能检测的新途径。

［1］任军伟，张艳萍，丛玉隆，等.血栓弹力图与光电比浊法检测氯吡格雷抗血小板功能.现代检验医学杂志，2014，29（6）：48-51.

［2］吴涛，刘景汉，李卉，等.亚硝基谷胱甘肽对冰冻血小板聚集及一氧化氮.中国实验血液学杂志，2012，20（2）：386-389.

［3］谭大伟，朱平，李小鹰.氯吡格雷抑制血小板功能的两种检测方法比较：血小板聚集实验与血小板膜糖蛋白检测.中国组织工程研究与临床康复，2007，11（11）：2021-2024.

［4］邹雄，丛玉隆，陈瑜，等.临床检验仪器.北京：中国医药科技出版社，2010，110-116.

［5］蒋娟娟，田蕾，韩璐璐，等.CYP2C9和CYP2C19基因多态性对健康中国人口服氯吡格雷后药效动力学的影响.中国新药学杂志，2011，20（13）：1217-1221.

［6］关杰，李莉，朱远，等.PL-11两种诱导剂监测健康人服用氯吡格雷后的血小板功能变化.解放军医学院学报，2014，35（3）：238-241.

（潘子昂编辑）

Evaluation and Comparison of a Newly Developed Platelet Function Analyzer with Light Transmission Aggregometry

CHU Du-wu1，REN Jun-wei2，CONG Yu-long3
（1.Department of Clinical Laboratory，Beijing Shijitan Hospital，Beijing 100038，China；2.Department of Clinical Laboratory，Beijing North Hospital of China North Industries Group Corporation（CNGC），Beijing 100089，China；3.Department of Clinical Laboratory，West Building of Chinese PLA General Hospital，Beijing 100853，China）

Objective To evaluate the performance of PL-11 platelet function analyzer and compare it with LTA（light transmittance aggregometry）.Methods Use LTA（results shown as LTA-MAR%）and PL-11（results expressed as PL-MAR%）to test the platelet aggregation function in control group and clopidogrel patient group（patient group）at the same time.In the test，ADP were used as the agonist for PL-11<A system.Results①the results between control group and patients group were statistically different with both analyzers（P＜0.01）；② all the results of PL-MAR%and LTA-MAR%were positively correlated（r= 0.889）.Conclusion①Clopidogrel is effective drug in anti-platelet therapy.②The PL-11 platelet analyzer is a new platelet function analyzer，the results have a high correlation with the results of LTA.

Platelet aggregation； PL-11； Light transmittance aggregometry； ADP

10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2016.09.031

2016-04-22；

2016-06-11

楚杜武、任军伟为并列第一作者。楚杜武（1976—），男，主管技师，专业：医学检验。E-mail：1575265282@qq.com；任军伟，男，硕士研究生，主管技师，专业：临床检验诊断学，免疫学。Tel：13661149064；E-mail：renjw678@126.com

丛玉隆，主任医师，教授，博士生导师，主要研究血液学、血栓与止血学。E-mail：yulongc@263.net