COX-2和C-myc在胃癌发生发展中的表达及其相关性研究①

朱艳丽，刘 亮，张天英，黄 展

(佳木斯大学附属第一医院，黑龙江 佳木斯 154003)



COX-2和C-myc在胃癌发生发展中的表达及其相关性研究①

朱艳丽，刘 亮，张天英，黄 展

(佳木斯大学附属第一医院，黑龙江 佳木斯 154003)

目的：研究胃癌中的COX-2及C-myc蛋白的表达及相互关系，初步探讨它们在胃癌的侵袭转移中的生物学意义。方法：应用免疫组化SABC法,检测46例胃癌组织、20例 正常胃黏膜组织中COX-2及C-myc蛋白的表达情况,比较COX-2蛋白表达与临床病理指标的关系及其与C-myc蛋白表达的相关性。结果：①胃癌组织COX-2蛋白表达的阳性率(63.04%)明显高于正常胃黏膜组织(30%),组间比较差异有显著性(P<0.05),其表达水平与胃癌的分化程度、淋巴结转移、浸润深度有关(P<0.05)。②胃癌组织C-myc蛋白表达的阳性率(67.39%)明显高于正常胃黏膜组织(35%),组间比较差异有显著性(P<0.05)，其表达水平与胃癌的分化程度、淋巴结转移、浸润深度有关(P<0.05)。③COX-2蛋白与C-myc蛋白的表达呈正相关(r=0.62，P<0.05)。结论：提示COX-2的表达与胃癌生物学行为密切相关；在胃癌发展过程中，COX-2蛋白与C-myc共同作用，参与细胞的癌变过程，并促进癌变细胞的浸润、转移。

COX-2；C-myc；蛋白表达；胃癌；免疫组织化学

胃癌是我国最常见的恶性肿瘤之一 在我国其发病率居各类肿瘤的首位，肿瘤的浸润转移是导致胃癌患者治疗失败的主要原因之一，也是治愈率得不到提高的主要影响因素，肿瘤的浸润和转移是多步骤的复杂过程，其确切的机制尚不清楚。近年来，胃癌的分子生物学研究进展较快，可在不同水平检测基因的变化，这种变化包括癌基因、抑癌基因、细胞周期调节蛋白及细胞增殖相关基因等的改变。

1 资料与方法

1.1 一般资料

实验标本均为2010-01～2013-06年在佳木斯大学附属第一医院，佳木斯市肿瘤医院及黑龙江省森工总医院经普外科手术切除及腔镜中心取材后并经病理科检查证实的原发性胃腺癌患者共46例。浸润深度未超过肌层者27例，超过肌层者19例。高分化者14例；中低分化者32例。淋巴结转移28例,无淋巴结转移18例。所有标本术前均未做化、放疗，临床资料完善齐全，发病过程中并无长期使用非甾体类抗炎药或糖皮质激素类药物的病史。

1.2 主要试剂

鼠抗人COX-2单克隆抗体购自北京博奥森生物技术公司产品(浓缩型)，工作浓度为1：100；鼠抗人C-myc单克隆抗体(即用型)、SABC法通用型二抗、氨基联苯胺(DAB)显色试剂盒均购自福州迈新生物技术开发公司。其他辅助试剂由医院病理科提供。

1.3 实验方法

采用免疫组化SABC法,严格按照说明书进行操作。

1.4 结果判断及标准

在光镜下观察COX-2主要分布于细胞膜和/或细胞浆中，C-myc主要分布于细胞膜或细胞核中。表达阳性的细胞可在细胞中发现棕黄色颗粒。于高倍镜下计数表达阳性的细胞的数量并计算其所占的百分比，同时评定细胞的染色强度，最终得出实验结果。

1.5 病理组织学诊断标准

按1990世界卫生组织(WHO)分类诊断标准，经两位病理专家认定胃癌的分化和浸润深度。

1.6 统计学方法

采用SPSS13.0统计软件包分析两独立样本χ2检验，P<0.05有统计学意义。

2 结果

2.1 COX-2、C-myc在正常黏膜及胃癌组织中的表达

COX-2表达主要定位胞浆和/或细胞膜中,呈棕黄色颗粒和/或网络状分布。COX-2在正常黏膜、胃癌组织中阳性率分别为30%(6/20)、63.04%(29/46)，组间比较有显著性差异(P<0.05),即COX-2在胃癌组织中表达增高。C-myc表达定位于胞核中,呈棕黄色,胞膜中少量表达， C-myc在正常黏膜、胃癌组织中阳性率分别为35%(7/20)、67.39%(31/46)组间比较有显著性差异(P<0.05),即C-myc在胃癌组织中表达升高。见表1。

2.2 COX-2、C-myc表达与胃癌临床病理因素的关系

高分化、中低分化二组中，COX-2阳性表达率分别为28.57%、78.13%，C-myc阳性表达率分别为28.57%、84.38%，组间比较差异有显著性(P<0.05)。T1～T2、T3～T4各组COX-2阳性表达率分别为48.15%、84.21%，C-myc阳性表达率分别为51.85%、89.47%，组间比较差异显著(P<0.05)。有淋巴结转移及无淋巴结转移组中COX-2阳性表达率分别为78.57%、38.89%，C-myc阳性表达率分别为82.14%、44.44%，组间比较差异有显著性(P<0.05)。见表2。

表1 COX-2、C-myc在正常黏膜及胃癌组织中的表达

表2 COX-2、C-myc表达与胃癌临床病理因素的关系

2.3 COX-2和C-myc蛋白表达在胃癌组织中的相关性

统计学分析表明，胃癌组织COX-2蛋白表达与C-myc蛋白表达呈正相关(r=0.62,P<0.05)，COX-2蛋白及C-myc表达均随着肿瘤淋巴结转移的发生，浸润深度的加深及分化程度的降低而增高。见表3。

表3 COX-2与C-myc在胃癌中表达的相互关系

3 讨论

胃癌作为严重威胁人类健康的恶性肿瘤之一,病死率居于恶性肿瘤前列。通过各种实验及临床观察研究出关于胃癌的典型并具有特征的诊断指标,尤其是检测出能反应肿瘤侵袭转移的客观指标。通过实验观察这些指标在胃癌发生浸润和转移时所起的生物学作用，将为临床阻断胃癌的浸润和转移提供可靠的理论依据。

环氧化酶 2(COX-2)作为体内前列腺素生物合成的限速酶，该基因的表达可受达到来源于体内和体外信号的诱导。正常状态下 COX-2 在人体多数组织中并不表达，而在被细胞内外各种刺激因子如白介素-1、肿瘤坏死因子、转移生长因子、表皮生长因子、内皮素及高渗状态等所诱导下表达[1]。COX-2 在正常组织中低表达或不表达，在多种肿瘤中高表达[2]。COX是前列腺素(PG)合成过程中的关键酶，在正常组织细胞中不表达或低表达，但在发生炎症和肿瘤时，其表达水平迅速上调[3]。COX-2参与肿瘤的发生和发展过程的机制复杂，具研究其主要是通过促进组织细胞的增殖，抑制细胞凋亡，增强肿瘤浸润转移能力，促进新生血管形成等机制从而发挥作用的[4，5]。本实验结果显示COX-2在胃癌组织中阳性率明显高于正常黏膜、组间比较有显著性差异(P<0.05)。在胃癌组织中COX-2阳性表达率与患者的性别，年龄及肿瘤大小比较，差异均不显著，无统计学意义(P>0.05)。但COX-2的阳性表达率在肿瘤的不同分化程度及淋巴结转移与否中的比较差异显著，具有统计学意义。

C-myc蛋白是一种转录因子，通常和细胞内其他蛋白质结合后再和DNA核心序列结合，控制DNA转录，通过调节目的基因表达，结合细胞所处的内外环境来影响细胞的生物学行为[6]，C-myc基因表达失调有利于凋亡形成。近来研究表明，C -myc基因在细胞恶性转化和增殖中起重要作用，其高表达与许多恶性肿瘤的发生、发展密切相关。本实验结果显示C-myc在胃癌组织中阳性率明显高于正常黏膜、组间比较有显著性差异(P<0.05)。在胃癌组织中C-myc阳性表达率与患者的性别，年龄及肿瘤大小比较，差异均不显著，无统计学意义(P>0.05)。但C-myc的阳性表达率在肿瘤的不同分化程度及淋巴结转移与否中的比较差异显著，具有统计学意义。COX-2、C-myc作为胃癌发展的相关性基因，其两者联合检测的报道较少，本实验通过免疫组化法对二者联合检测，结果显示：胃癌组织RhoA蛋白表达与C-myc蛋白表达呈正相关(r=0.62,P<0.05)，且两者的表达随着胃癌淋巴结转移的发生浸润深度的加深及分化程度的降低而增高。因此，检测胃癌组织中两者的表达，可能为胃癌综合治疗提供一种新的途径，从而有助于减少胃癌的复发和转移。

[1]Raspollini MR，AMunni G，Villanucci A，et al. COX-2 status in relationto tumor microvessel density and VEGF expression:analysis in ovarian carcinomapatients with low versus high survival rates[J]. Oncol Rep，2013，11( 2) :309-313

[2]Cao Y,Prescott SM.Many actions of cyclooxygenase-2 in cellular dynamicsand in cancer[J].J Cell Physiol,2012,190(3):279-286

[3]郜恒郡，于连珍，孙亮，等.胃癌及癌旁组织中基因蛋白的表达[J].世界华人消化杂志，2010,8:578-579

[4]Dempke W,Rie C,Grothey A,et al.Cyclooxygenase-2:anovel target for cancer chemotherapy[J].Cancer Res Clinoncol,2011,127:411-417

[5]朱艳丽,刘亮,崔颖，等.COX-2、Ki-67在胃癌发生发展中的表达及其相关性研究[J].黑龙江医药科学,2010，33(6):30-31

[6]Vita M，Henriksson M.The Myc oncoprotein as a therapeutic target for humancancer[J].Semin Cancer Biol，2006,16：318

黑龙江省教育厅科学技术研究项目，编号：12531715。

朱艳丽(1978～)女，黑龙江佳木斯人，硕士，主治医师。

R735.2

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1008-0104(2016)05-0028-02

2016-01-20)