乌骨鸡转移因子消除IBD疫苗引起的免疫抑制的研究

赵满达 何孟莲 苏丽娟 安伯玉

（1.山东畜牧兽医职业学院，山东 潍坊 261061；2.昌邑市畜牧兽医管理局，山东 潍坊 261300；3.诸城市畜牧局，山东 潍坊 262200）

乌骨鸡转移因子消除IBD疫苗引起的免疫抑制的研究

赵满达1何孟莲1苏丽娟2安伯玉3

（1.山东畜牧兽医职业学院，山东 潍坊 261061；2.昌邑市畜牧兽医管理局，山东 潍坊 261300；3.诸城市畜牧局，山东 潍坊 262200）

本研究利用乌骨鸡TF进行消除IBD疫苗造成的免疫抑制，实验动物分新城抗体检测组和禽流感抗体检测组，每组又分为空白对照组、乌骨鸡TF实验组（TF）、乌骨鸡TF与IBD疫苗结合组和IBD疫苗组，每组50羽，分别隔离饲养。TF+IBD疫苗组和IBD疫苗组雏鸡7日龄免疫IBD疫苗。TF组和TF+IBD疫苗组13日龄饮水投服乌骨鸡TF。14日龄新城疫抗体检测组全部免疫新城疫疫苗（Lasota），禽流感抗体检测组免疫禽流感疫苗（H9）。同时，14、21、28日龄检测新城疫和禽流感（H9）HI抗体。29日龄新城疫攻毒试验实验，计算72h内死亡率。实验数据用SAS软件分析。实验结果表明，该IBD疫苗可引起肉仔鸡的明显的免疫抑制；乌骨鸡TF有显著提高ND-HI和AI-HI作用，同时，可以彻底消除IBD疫苗造成的免疫抑制。

乌骨鸡转移因子 免疫抑制 IBD疫苗 抗体检测

自1949年以来，学术界大量研究讨论转移因子的免疫调节功能，认为TF可以调节T细胞的免疫活性，并促进免疫器官的发育［1-2］。转移因子（TF）是存在于人和动物白细胞中的可透析小分子物质，TF属寡肽和寡核苷酸的复合物，含多种氨基酸，分子量小，无热原，无抗原性，无毒副作用和无种属差异，是一种新型而又安全的免疫调节剂。

TF作用迅速，受体受TF作用后的4～24h便可获得相应的细胞免疫功能。这种获得的细胞免疫功能可维持数月或数年之久。TF能提高受体的淋巴细胞转化率，表现为E玫瑰花环形成率显著提高，白细胞吞噬能力增强和游走活性提高，外周血液T淋巴细胞比值（TC）升高以及受体的抗体水平增高等。研究证明，TF并不存在种属差异，并不同动物来源的TF对肉仔鸡免疫活性不同，其中乌骨鸡来源的TF免疫活性最强［3-6］。通过对比研究发现，乌骨鸡TF对肉仔鸡免疫活性最强［7］。

传染性法氏囊病（IBD）是一种危害雏鸡的急性、高度接触性、病毒性传染病。淋巴细胞，尤其是B淋巴细胞是主要的靶细胞，法氏囊是受影响最大的组织。雏鸡早期感染本病，会引起严重的、长期的免疫抑制。因免疫抑制而临床容易出现继发感染其他病［8］。

很多研究已经证明传染性法氏囊炎中等毒力疫苗可造成法氏囊的损伤，进而引起免疫抑制。所以用免疫调节剂来防治传染性法氏囊炎中等毒力疫苗造成免疫抑制的实验具有科学性，可以证明免疫调节剂的免疫调节作用。

1 材料和方法

1.1 实验材料

乌骨鸡TF（自备），鸡传染性法氏囊炎中等毒力活疫苗（B87），新城疫弱毒活疫苗（Lasota株），禽流感灭活疫苗（H9亚型，LG1株），新城疫病毒（本实验室临床分离并鉴定），新城疫标准抗原，禽流感H9标准抗原，1%鸡红细胞，鸡胚，超净工作台，离心机，显微镜，微量加样器，96孔微量细胞培养板，CO2培养箱，Star Fax-2600酶标仪；实验动物：非免疫鸡共400羽，分别隔离饲养。

1.2 实验方法

1.2.1 实验分组

非免疫鸡共400羽。分新城抗体检测组和禽流感抗体检测组，每组又分为空白对照组、乌骨鸡转移因子（TF）实验组、乌骨鸡转移因子与IBD疫苗结合组（TF+IBD疫苗）和IBD疫苗组，每组50羽，分别隔离饲养。

1.2.2 乌骨鸡TF消除IBD疫苗引起的免疫抑制实验

TF+IBD疫苗组和IBD疫苗组雏鸡7日龄免疫IBD疫苗。TF组和TF+IBD疫苗组13日龄1000单位/100kg比例饮水添加TF。14日龄新城疫抗体检测组全部免疫新城疫疫苗，禽流感抗体检测组免疫禽流感疫苗（H9）。同时14、21、28日龄采血，分离血清，检测新城疫和禽流感（H9）HI抗体。

1.2.3 新城疫攻毒实验

29日龄新城疫攻毒试验（尿囊液1∶100稀释，胸肌注射0.5 ml/只），计算72h内死亡率。

1.3 数据处理

实验数据用SAS软件方差分析处理。

表1 实验设计及数据统计

2 结果与分析

空白对照组与其他实验组数据方差分析，进行比较结果，乌骨鸡转移因组与空白对照组比较ND-HI 21日龄和28日龄均存在有极显著差异（P<0.01），实验结果表明，乌骨鸡转移因子可显著提高新城疫疫苗的免疫效价；乌骨鸡转移因组与空白对照组比较

AI-HI 21日龄时有显著差异（P<0.05），28日龄时有极显著差异（P<0.01），实验结果表明，乌骨鸡转移因子可显著提高禽流感（H9）疫苗的免疫效价。IBD疫苗组与空白对照组比较ND-HI和AI-HI于21日龄、28日龄时均极显著差异（P<0.01），实验结果表明，IBD中等毒力疫苗可显著降低肉仔鸡新城疫和禽流感（H9）疫苗免疫效价。TF+IBD疫苗组与空白对照组比较ND-HI和AI-HI于21日龄、28日龄时均无显著差异（P>0.05），TF+IBD疫苗组与IBD疫苗组比较，21日龄、28日龄时均有极显著差异（P<0.01），这两个实验结果表明，乌骨鸡转移因子可有效消除IBD中等毒力疫苗造成的免疫抑制；

3 讨论

乌骨鸡转移因子与新城疫疫苗和禽流感（H9）疫苗结合使用可显著的提高免疫效价，实验结果分析得出，乌骨鸡转移因子饮水免疫时结合疫苗使用可明显提高免疫效价，是一种较为良好的免疫调节剂；传染性法氏囊炎中等毒力疫苗对新城疫疫苗和禽流感（H9）疫苗免疫效价的影响实验表明，传染性法氏囊中等毒力疫苗可导致肉仔鸡显著的免疫抑制；乌骨鸡转移因子结合传染性法氏囊炎中等毒力疫苗对新城疫疫苗和禽流感（H9）疫苗免疫效价的影响实验结果表明，乌骨鸡转移因子可有效消除传染性法氏囊炎中等毒力疫苗造成的免疫抑制，所以乌骨鸡转移因子可以作为免疫调节剂有效防治鸡免疫抑制性疾病。

转移因子可以促进辅助T淋巴细胞的分化、分裂和激活来提高细胞免疫效价，同时也间接的提高体液免疫的效价，从而达到HI抗体效价提高、消除传染性法氏囊炎疫苗造成的免疫抑制和新城疫攻毒试验保护率提高的效果。

2005 潍坊市重点资助项目（2005VFZDZZ0012）

赵满达（1975-），男，内蒙古科尔沁左翼中旗人，副教授，农学硕士，主要从事动物免疫病理学研究。