心肌Heidenhain染色在诊断冠心病猝死中的应用价值

刘晓宇, 崔国峰

(内蒙古医科大学附属医院 心内科, 内蒙古 呼和浩特, 010050)



心肌Heidenhain染色在诊断冠心病猝死中的应用价值

刘晓宇, 崔国峰

(内蒙古医科大学附属医院 心内科, 内蒙古 呼和浩特, 010050)

目的探讨心肌铁矾苏木素伊红染色(Heidenhain染色)诊断冠心病猝死(CAD-SD)的临床价值。方法选取134例冠心病心肌梗死患者(CAD-MI组)、119例高血压心脏病患者(HHD组)、97例失血性休克患者(HS组)、75例心脏病合并失血性休克患者(HD-HS组)、64例一氧化碳中毒患者(COP组)以及同期体检科确诊的60例健康个体(对照组)。所有研究对象均接受心肌Heidenhain染色检查，分析各组心肌Heidenhain染色检测结果。结果6组研究对象心肌Heidenhain染色阳性强度相比差异有统计学意义(P<0.05)。以心肌Heidenhain染色检查结果强阳性(2+)作为CAD-SD的诊断标准，心肌Heidenhain染色诊断CAD-SD的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、诊断准确度分别为94.8%、99.5%、98.4%、98.3%、98.4%。 结论心肌Heidenhain染色诊断CAD-SD具有较高的灵敏度与特异性。

冠心病猝死; 心肌梗死; 心肌Heidenhain染色

冠心病(CAD)是指冠状动脉发生动脉粥样硬化(AS), 继发冠状动脉管腔狭窄甚至闭塞，进一步导致患者心肌缺血、缺氧甚至坏死所致的心脏病[1]。流行病学研究[2]报道，全世界每年大约有1 300万人死于心血管系统疾病导致的猝死，其中大多由CAD所致。CAD-SD多突然发病，且患者常在短时间内死亡，采用常规病理学方法常因缺乏典型的形态依据而给其诊断增加了一定的难度[3]。本研究探讨心肌铁矾苏木素伊红染色(Heidenhain染色)诊断CAD-SD的临床价值，现报告如下。

1　资料与方法

1.1一般资料

选取2012年1月—2015年12月本院收治的489例患者以及同期体检科确诊的60例健康个体(对照组)作为研究对象，489例患者包括冠心病心肌梗死患者(CAD-MI组)134例、高血压心脏病患者(HHD组)119例、失血性休克患者(HS组)97例、心脏病合并失血性休克患者(HD-HS组)75例、一氧化碳中毒患者(COP组)64例。CAD-MI组、HHD组、HS组、HD-HS组、COP组等5组患者均符合相应的诊断标准，且排除合并可以引起心肌缺血的其他疾病。6组研究对象一般资料相比，差异无统计学意义(P>0.05)，见表1。

表1　6组研究对象一般资料的比较

1.2研究方法

心肌Heidenhain染色操作步骤如下: ① 脱蜡至水：二甲苯作用2次，5～10 min/次；无水乙醇作用2次，3～5 min/次；95%乙醇作用3～5 min; 90%乙醇作用3～5 min; 80%乙醇作用3～5 min; 蒸馏水冲洗1～3 min。② Heidenhain Differentiation(试剂A)媒染1 h, 蒸馏水冲洗5～10 s; Heidenhain 铁苏木素染色液(试剂B)染色1 h, 自来水冲洗20～30 s。③ 采用试剂A进行分化，与自来水冲洗交替进行，在显微镜下观察分化程度，自来水冲洗10 min。④ 脱水：80%乙醇作用10～20 s; 90%乙醇作用10～20 s; 95%乙醇作用2次，1～2 min/次；无水乙醇作用2次。⑤ 透明：二甲苯透明3次，2～3 min/次。⑥ 封片：中性树脂封片。⑦ 结果判断：由2名病理高级职称医师进行读片，并根据结果判断标准对心肌Heidenhain染色阳性强度进行确定。

1.3结果判断标准

超过2/3的心肌纤维呈黑色，片状分布判断为强阳性(2+); 1/3～2/3的心肌纤维呈黑色，灶状分布判断为中等阳性(++); <1/3的心肌纤维呈黑色，点状散在分布判断为阳性(+)；全部心肌纤维呈红色，判断为阴性(-)；介于阴性(-)与阳性(+)之间判断为弱阳性(±)[4]。

1.4统计学分析

采用SPSS 21.0 统计软件进行数据分析，各组之间心肌Heidenhain染色阳性强度比较采用秩和检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2　结　果

2.16组研究对象心肌Heidenhain染色阳性强度的比较

6组研究对象心肌Heidenhain染色阳性强度相比, CAD-MI组患者心肌Heidenhain染色阳性强度显著高于HHD组、HS组、HD-HS组、COP组、对照组(P<0.05), HD-HS组患者心肌Heidenhain染色阳性强度显著高于HHD组、HS组、COP组、对照组(P<0.05), HHD组、HS组、COP组患者心肌Heidenhain染色阳性强度均显著高于对照组(P<0.05), HHD组、HS组、COP组患者心肌Heidenhain染色阳性强度相比差异无统计学意义(P>0.05)。见表2。

表2　6组研究对象心肌Heidenhain染色阳性强度的比较[n(%)]

2.2心肌Heidenhain染色诊断CAD-SD的临床价值

以心肌Heidenhain染色检查结果强阳性(2+)作为CAD-SD的诊断标准，心肌Heidenhain染色诊断CAD-SD的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、诊断准确度分别为94.8%、99.5%、98.4%、98.3%、98.4%。见表3。

表3　心肌Heidenhain染色诊断CAD-SD的临床价值

3　讨　论

心脏性猝死(SCD)是指急性症状发作后1 h内发生的以意识突然丧失为特征的、由于心脏原因引起的自然死亡[5]。中国每年大约有54.4万人发生SCD, 因此减少SCD发生率对降低心血管疾病死亡率有着重要的临床意义。绝大多数SCD发生于器质性心脏病患者，大约80%的SCD患者是由CAD及其并发症所致，而这些CAD患者中大约75%有心肌梗死(MI)病史[6]，因此本研究将CAD-MI患者替代CAD-SD患者作为主要研究对象。

临床研究认为心肌急性缺血或者早期梗死是诊断CAD-SD的不可缺少的要素之一，而病理学研究[7]认为早期心肌缺血是CAD-SD病理诊断的重要依据。值得注意的是，即使尸检发现患者有冠状动脉AS，但是由于存在侧支循环代偿因素影响或者其他死亡因素的可能，因此仍然不能直接诊断为CAD-SD。在这种情况下，心肌细胞染色成为诊断CAD-SD的主要手段之一。CAD-SD多骤然发病，患者常在短期内死亡，因此常规病理学方法难以发现心肌细胞形态学有特异性改变。作为诊断心肌缺血的方法之一，心肌细胞HE染色被大多数学者认可，但是只有当心肌缺血6～8 h后HE染色才能发现病变[8]。由此可见, HE染色难以检测出早期心肌缺血。免疫组化染色是诊断心肌缺血的另一常用方法，其检测早期心肌缺血的临床价值已经获得了认可，但是其实验条件要求较高、操作技术性强，并且试剂昂贵，难以在基层医院广泛开展[9]。

特殊组织学染色发挥出灵敏度高、特异性强、价格低廉的优点，从而成为一种值得认可的诊断早期心肌缺血的方法。国内学者刘英坤首次报道将心肌Heidenhain染色用于早期心肌缺血的诊断，其认为Heidenhain染色可以使早期缺血的心肌纤维出现明显的反应，其效果优于HE染色、HBFP染色，具有操作简便易行，特异性强等优点，可以作为诊断早期心肌缺血的首选染色方法[10]。本研究中，初步研究发现CAD-MI组、HHD组、HS组、HD-HS组、COP组、对照组等6组研究对象心肌Heidenhain染色阳性强度相比有显著差异, CAD-MI组阳性强度最高，多呈强阳性(2+)，其他5组研究对象较少出现强阳性，因此以心肌Heidenhain染色检查结果强阳性作为CAD-SD的诊断标准，其诊断CAD-SD的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、诊断准确度分别为94.8%、99.5%、98.4%、98.3%、98.4%。心肌Heidenhain染色诊断CAD-SD具有较高的灵敏度与特异性，值得临床推广应用。

[1]葛均波. 冠心病介入治疗的过去、现在和未来[J]. 遵义医学院学报, 2014, 37(1): 1-5.

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[3]LI YH, 鲍现宝, 朱建华, 等. 冠心病猝死心肌纤维连接蛋白免疫组化染色观察[J]. 中国法医学杂志, 2008, 23(4): 228-230.

[4]胡志红, 吴萍, 王庭. 心肌Heidenhain染色诊断早期心肌缺血的实验观察[J]. 临床与实验病理学杂志, 2011, 27(6): 642-644.

[5]陈刚. QRS时限和左室射血分数及左心室舒张末期容积与心脏性猝死关系[J]. 中华实用诊断与治疗杂志, 2016, 30(1): 103-104.

[6]李宏宁. 绝经后女性心脏性猝死的危险因素分析[J]. 医学综述, 2015, 21(2): 255-257.

[7]卢孔杰, 孙国建, 陈建明, 等. 植入型心律转复除颤器对心脏性猝死一级预防临床研究[J]. 中华心律失常学杂志, 2013, 17(2): 134-137.

[8]崔啟春, 于建宪. CARP及CaMKII/PKA信号转导通路在冠心病猝死者心肌中的表达及意义[D]. 青岛大学, 2014.

[9]卢陈嘉, 李连宏. HMGB1、c-kit+、miRNA-206在早期心肌缺血猝死心肌中的表达及心肌干细胞的探讨[D]. 大连医科大学, 2014.

[10]刘英坤, 钟志玖, 班翔, 等. 诊断早期心肌缺血三种组织学染色方法的比较[J]. 哈尔滨医科大学学报, 2002, 36(3): 238-239.

Application value of myocardial Heidenhain staining in the diagnosis of sudden death caused by coronary heart disease

LIU Xiaoyu, CUI Guofeng

(DepartmentofCardiology,TheAffiliatedHospitalofInnerMongoliaMedicalUniversity,Hohhot,InnerMongolia, 010050)

ObjectiveTo investigate the value of myocardial iron vitriol wood grain eosin staining (Heidenhain staining) in the diagnosis of sudden death caused by coronary heart disease (CAD-SD). MethodsA total of 134 patients with coronary heart disease and myocardial infarction (CAD-MI group), 119 patients with hypertensive heart disease (HHD group), 97 patients with uncontrolled hemorrhagic shock (HS group), 75 patients with heart disease combined uncontrolled hemorrhagic shock (HD-HS group) and 64 patients with carbon monoxide poisoning (COP group) and 60 healthy individuals (control group) were selected. All patients were conducted with myocardial Heidenhain staining, and myocardial Heidenhain staining results were compared. ResultsThere were significant differences myocardial Heidenhain positive staining intensity among 6 groups (P<0.05). Take myocardial Heidenhain dyeing test results of strong positive (2+) as a CAD-SD diagnostic criteria, the sensitivity of myocardial Heidenhain staining in the diagnosis of CAD-SD, specific degree, positive predictive value, negative predictive value and accuracy of the diagnosis were 94.8%, 99.5%, 98.4%, 98.3%, 98.4%. ConclusionThe myocardial Heidenhain staining shows higher sensitivity and specificity in the diagnosis of CAD-SD.

sudden death caused by coronary heart disease; myocardial infarction; myocardial Heidenhain staining

2016-03-16

崔国峰

R 541.4

A

1672-2353(2016)19-009-03DOI: 10.7619/jcmp.201619003