紫外可见分光光度法测定丝瓜络配方颗粒中多糖含量

田　健，朱　凯

(长春中医药大学,长春 130117)



紫外可见分光光度法测定丝瓜络配方颗粒中多糖含量

田健，朱凯*

(长春中医药大学,长春 130117)

目的用紫外可见分光光度法测定丝瓜络配方颗粒中多糖的含量。方法采用苯酚硫酸法对供试品与对照品进行处理，用紫外可见分光光度法测定其吸光度值。结果测得的最大吸收波长为490 nm，葡萄糖浓度在1.427 0～14.271 0 mg/mL范围内，与吸收度呈良好线性关系，精密度RSD为0.78%，平均回收率为98.9%。结论本法简便易行，精确度高，测定速度快。

丝瓜络；多糖；紫外分光光度法

丝瓜络为葫芦科植物丝瓜Luffacylindrica(L.)Roem.的干燥成熟果实的维管束。别名又称丝瓜壳、天萝筋、瓜络、丝瓜筋等，在夏、秋二季丝瓜成熟、果皮发黄干枯后摘下，除去外皮、果肉及种子，洗净晒干，即为丝瓜络[1-3]。丝瓜络味甘，性寒，有通行经络和凉血解毒的作用，用于痹痛拘挛，胸胁胀痛，乳汁不通，乳痈肿痛[4-6]。《本草纲目》记载“丝瓜老者，筋络贯串，房隔联属，能通人脉络脏腑，而祛风解毒，消肿化痰，祛痛杀虫，及治诸血病也。”丝瓜络富含木糖醇、甘露聚糖和半乳聚糖等成分[7-8]。丝瓜络配方颗粒是以丝瓜络饮片为原料，经过提取、分离、浓缩、干燥、制粒、包装等生产工艺，加工制成的一种新型配方用药。本实验采用紫外可见分光光度法对丝瓜络配方颗粒中的多糖进行含量测定。为丝瓜络资源进一步的开发和利用提供帮助。

1　仪器与试剂

葡萄糖化学对照品:购于中国药品生物制品检定所。批号：110833-200904。TU-1810PC紫外可见分光光度计：北京瑞利分析仪器公司。BP211D电子分析天平：德国Sartorius公司。电动恒温水浴锅：江苏常熟医疗器械厂。实验室用纯水机sco80179：四川沃特尔科技发展有限公司。

2　方法与结果

2.1溶液的制备

2.1.1对照品溶液的制备精密称定葡萄糖标准品10 mg，置于100 mL容量瓶中，加蒸馏水溶解稀释至刻度，摇匀，即得(每1 mL含多糖99.9 μg)。

2.1.2供试品溶液的制备取丝瓜络水煎干膏适量，研细，过二号筛，精密称取0.1 g，置50 mL容量瓶中，精密加入蒸馏水30 mL，超声处理(功率150 W，频率40 kHz)20 min，取出放冷后，加蒸馏水定容至刻度，滤过，精密吸取续滤液5 mL，至25 mL容量瓶中，加蒸馏水定容至刻度，即得。

2.2最大吸收波长的确定取适量对照品溶液及供试品溶液，在300～600 nm波长范围内测定吸光度，结果对照品与供试品在490 nm处均有最大吸收，经空白试验无干扰，确定490 nm为测定波长。

2.3线性关系的考察精密量取对照品溶液(99.9 μg/mL)0.1、0.2、0.4、0.6 m、0.8、1，分别置于10 mL具塞试管中，分别加水补至1.0 mL，精密加入5%苯酚溶液1 mL，摇匀，迅速加入浓硫酸5 mL，摇匀，置于100 ℃水浴中保温15 min，取出，迅速冷却至室温15 min，以相应的试剂为空白，在490 nm的波长处测定上述溶液的吸光度，以吸光度为纵坐标，葡萄糖浓度为横坐标，绘制标准曲线，标准曲线方程为C=17.534 38 A-2.875 87,r=0.999 4。结果表明，葡萄糖浓度在1.427 0～14.271 0 μg/mL范围内，与吸收度呈良好线性关系。结果见表1。

表1　标准曲线

2.4精密度考察取对照品溶液适量，在490 nm的波长处连续测6次吸光度值，记录吸光度值，计算，考察精密度，平均吸光度值为0.485，RSD为0.78%，表明仪器、方法的精密度良好，测定结果可信。测定结果见表2。

表2　精密度试验

2.5稳定性考察取同一供试品溶液，每隔一段时间分别测定吸光度值，记录吸光度值，计算，考察稳定性。结果显示对照品溶液在24 h内测定结果的RSD值为0.22%，说明供试品在24 h内稳定性较好，测定结果准确、可靠。

2.6重复性试验精密称取同一样品6份，按2.1.2供试品溶液项下方法制备成供试品溶液，依法独立测定样品含量，以考察本法的重现性。结果显示多糖平均含量为12.37 mg/g，RSD=1.83%，说明重现性较好。

2.7加样回收取已知含量供试品溶液6份，分别加入适量葡萄糖对照品，依法测定，计算回收率，实验结果显示平均回收率为104.33%，RSD值为0.46%，回收率良好，方法可行。

2.8样品含量测定取10批样品，按2.1.2供试品溶液项下方法制备成供试品溶液，每批样品处理2份，测定吸光度值，计算10批样品中多糖的含量。结果见表3。

表3　10批样品中多糖的含量

3　小结

本实验制备供试品溶液的提取方法选用超声提取法，本法独具的物理特性能，促使细胞组织破壁或变形。其中的成分可直接扩散到溶剂中，使有效成分提取更充分，提取速度快，能耗较低。

丝瓜络中多糖为主要有效成分[9-12]，本试验中采用紫外分光光度法进行测定，选用苯酚浓硫酸法作为测定丝瓜络多糖含量的显色方法，通过光谱吸收峰的变化，计算多糖的含量[13-17]。该方法显色稳定，线性关系良好，精密度、重复性及回收率均达到标准要求，所以该方法是测定丝瓜络中多糖的较佳方法。

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Content of UV Vis spectrophotometric determination of Luffa granules in polysaccharide

TIAN Jian,ZHU Kai*

(Changchun University of Chinese Medicine,Changchun 130117,China)

ObjectiveContent by UV Vis spectrophotometric determination of Luffa granules in polysaccharide.MethodsThe samples were treated with phenol sulfuric acid method,and the absorbance value was determined by UV Vis spectrophotometry.ResultsMeasured maximum absorption wavelength of 490nm,the glucose concentration in the 1.427 0 mg/mL-14.2710 mg/range,and absorbance was linear.RSD of 0.78% and the average recovery was 98.9%.ConclusionThis method is simple,high accuracy,fast measurement speed.

Loofah;polysaccharide;UV spectrophotometry

10.13463/j.cnki.cczyy.2016.05.013

吉林省中医药科技项目“一种人参药性菌质指纹图谱的研究”(2014-Q33)。

田健(1988-)，男，硕士研究生，助理实验师，主要从事中药学研究。

朱凯，男，硕士研究生导师，电话-18686659711，电子信箱-12759797@qq.com

R284.3

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2095-6258(2016)05-0917-03

2016-05-03)