浅谈医学院校生物化学的实验准备工作

梁斌 谢琦 李康智 梁成钦 周先丽

摘要：生物化学实验课是培养医学生的重要课程之一，其中实验准备工作是否充分，不仅影响了实验结果，而且直接影响了生物化学这门课程的教学质量。因此，本文以生物化学课程的实验准备为例，从多方面探索了如何做好实验准备工作。

关键词：实验准备;生物化学;医学院校

中图分类号：G642.0     文献标志码：A     文章编号：1674-9324（2016）36-0277-02

随着生命科学领域的快速发展，生物化学这门学科已经渗透医学的各个领域，生物化学课程已经成为医学院校的基础必修课[1]。生物化学实验教学可以培养学生敏锐细致的观察能力、动手能力和分析能力，是培养高素质应用型医学人才的重要途径[2]。实验准备是实验教学的重要环节，同时也是实验教学顺利进行的前提条件，实验准备工作的好坏直接影响到实验教学的质量。由于生物化学是本校的基础必修课，临床医学、药学、检验学、预防医学、口腔医学、生物技术、护理学等专业均有涉及，因学生多，课时多，内容杂，实验准备工作尤其烦琐，实验技术人员任务更加繁重。作者在本校从事了多年的生物化学实验准备工作，下面从几个方面对医学院校生物化学的实验准备工作进行具体的阐述。

一、实验室的规范管理

实验室是实验教学的场所，实验室的管理是否完善直接影响到实验教学的效果，因此必须加强管理使实验室规范化。我院生物化学实验室主要有常规教学实验室与开放性实验室，如何加强管理使实验室规范化呢？常规教学实验室主要根据授课计划内容配套全部设施，包括上课所需要的冰箱、通风橱、紫外分光光度计、高速离心机、低速离心机、水浴锅、电泳仪以及PCR仪等。除此之外，还有实验基本的耗材例如试管架、玻璃试管、玻璃滴管、离心管、洗耳球、移液管、玻璃棒、EP管架等。开放性实验室则相当于一个小型研究场所，除了配置常规的基本设施外，还需配套一些比较昂贵的仪器、常规使用的试剂与耗材，以及实验准备过程中需要用到的仪器例如电子天平、微波炉等。除了上述用品外，每个实验室都需要及时补充试管刷、洗衣粉、扫帚、拖把、抹布等日杂耗材。为了实验课能顺利进行，实验技术人员上课前要检查清点，下课后要清理收拾并且监督学生做好卫生工作，日常工作中要查漏补缺，尤其要注意水电安全问题。实验室管理工作尽管烦琐，也必须引起重视，应加强管理使其规范化。下面举例说明实验室管理不规范的后果。假如上课需要使用水浴锅，而课前检查时未发现水浴锅没有水，那么上课过程中就会出现水浴锅干烧事件。常规教学实验室由于实验技术人员的努力极少可能出现这样的事件，而开放性实验室主要是学生课后使用，就更加要加强管理使实验室规范化，例如入室前培训、入室登记、实验结束后需经严查才能离场。

二、实验仪器管理

生物化学实验涉及到的大部分仪器如上所述，现在详细讲述如何规范管理仪器。（1）所有的仪器都要做好使用登记，具体包括使用时间、使用前与使用后仪器的状况、使用人姓名等;（2）部分开放性实验需要用到的仪器，例如高压灭菌锅，不允许学生单独操作，必须在教师的指导下进行操作;（3）学生上课过程中经常使用到的仪器，例如紫外分光光度计、水浴锅、离心机等必须按照实验室仪器操作步骤进行，带教教师要检查与监督;（4）仪器非人为损坏需要及时报修处理，不能影响后面的课程，人为损坏则需要赔偿损失;（5）实验技术人员要经常检查仪器的使用情况，尤其是开学与期末这两个时间段，开学后要检查所有仪器是否完好并且做好使用前处理，期末后要及时整理好仪器，例如水浴锅的清洗与排水，仪器电源是否都已关闭并且拔掉电源线等。

三、低值易耗品的请购与管理

生物化学实验课课时多，损耗大，因此每个学期都必须进行实验试剂与耗材的请购。低值易耗品的请购是每个学期末提前为下一学期做准备的。低值易耗品请购计划要严格把握请购量，既不能浪费也不能漏买。要做好低值易耗品请购工作，需要做到以下几点：（1）对下学期的实验内容熟悉，具体到每个实验内容，例如血糖测定实验需要哪些试剂与耗材;（2）对下学期做这个实验内容的学生人数有个大概的数量估计;（3）在不浪费的前提下多做一些预备，以防意外;（4）对库房存货做到心中有数，本学期剩余的试剂与耗材数量要清楚，预计下学期还需要请购多少比较合适等。

低值易耗品的请购需要经验，而管理方面则需要用心，主要需要做好出入库记录工作。对于耗材管理而言，要分门别类放置并且贴好标签，还要熟悉耗材的具体位置。而试剂的管理需要更加谨慎，例如酸碱腐蚀性试剂、有毒有害试剂、易燃易爆试剂等。要做好试剂管理工作，主要遵循如下几点原则：（1）试剂库房专人专管，责任到人，剧毒试剂要保险柜存放，两人以上保管;（2）试剂库房要远离明火、干燥通风;（3）普通试剂与毒麻试剂分开放置;（4）易挥发试剂如乙醚、盐酸等放置于通风柜;（5）固液试剂分开放置;（6）酸碱试剂分开放置;（7）特殊试剂需要冰冻保存的放于专门冰箱保存;（8）容易见光分解的试剂要避光保存;（9）统一编号所有试剂柜，在门上贴好标签例;（10）做电子版试剂汇总表，试剂出入库都需要在登记本登记后再在电子表汇总。

四、试剂的配制与分装

生物化学实验内容比较多，涉及到的试剂种类繁多，不同性质的试剂配制需要考虑许多因素：（1）根据实验试剂单位的要求，选择的称量与测量仪器与耗材不同，精确度要求比较高的选择带四位小数点的电子天平与合适的容量瓶，其他可以选择一位小数点的电子天平与合适量程的量筒即可;（2）根据需要配制的试剂的性质选择合适溶剂;（3）易挥发试剂的配制需要到通风橱操作，例如涉及到浓盐酸、乙醚、浓氨水等溶液的配置;（4）易燃易爆或者危害性比较大的试剂必须小心操作，例如浓硫酸的稀释顺序;（5）根据试剂酸碱性的问题需要考虑存放试剂的瓶子的性质，例如玻璃试剂瓶或者塑料试剂瓶;（6）见光易分解或者变性的试剂需要避光保存，分装时使用棕色瓶;（7）用于配制试剂的耗材例如烧杯、量筒、玻璃棒等需要清洗干净，以免污染试剂;（8）每次试剂的配制时都需要做好原始记录以便复查。

除了以上因素外，生物化学的大部分实验试剂由于需要分装使用，以及部分学生操作失误等原因，配制试剂时一般需要按照实际需求量的1.5～2倍来配制，以免试剂量不够影响实验教学效果或者造成不必要的浪费。例如双缩脲法测定蛋白质的实验中，每一组学生需要双缩脲试剂的量为30mL，一个本科班有60人即分为30个组，那么我们实际需要配制的试剂至少应该为30mL/组×30组×1.5=1350mL。而试剂分装问题也与试剂本身性质与使用量相关。上述的例子中的双缩脲试剂应该配套实验室分装为8套，用200mL的棕色瓶分装。另外，由于一些实验试剂的配制需要动物的组织或者鸡蛋等，例如蛋白质的沉淀与变性实验中的卵清蛋白试剂需要新鲜鸡蛋，酮体的生成与鉴定实验需要新鲜的瘦猪肉与猪肝等，因此实验技术员需要根据授课内容提前写好动物计划请购表。技术员要根据实验内容的要求，提前做好一个学期的动物计划总表，并且在相应的实验课前一周写一份具体的动物计划交到教务处。

五、预实验的重要性

所谓预实验是指在进行实验教学或者科学研究时，经常需要在正式实验前先做一次实验，简称预实验[3]。由于每次实验都会因为时间、温度、试剂批号、浓度与仪器等的改变而出现不同的实验结果，所以每一次实验之前都要认真地做好预实验[4]。预实验的进行不仅仅是实验技术人员的事情，而应该是实验技术人员与授课教师共同进行。如果预实验结果正常，那么说明这批试剂可以用于学生实验教学，如果预实验结果不理想，那么实验技术人员与授课教师要共同分析具体原因，一直到做出理想的结果为止。为了保证能有足够的时间解决预实验出现的问题，预实验需要安排在正式上课前一周进行比较合适。

六、实验的更新

随着科技的发展，很多实验向着更加简便、安全的方向发展。实验技术人员要紧跟科学技术发展，不断提高自身专业知识，通过不断的实验尝试使实验更简单、更安全、结果更明显。例如，PCR实验中凝胶的观察，以前都是用EB显色，而EB是致癌物，对人体有害。通过学习与实践，我们发现用核酸染料GeneFinder可以代替EB，而且相对EB安全许多，100mL凝胶加入1μL的核酸染料即可得到比较理想的图像。另外，酮体的生成与鉴定实验，以往都是用小鼠作为材料，但是经过我们的实验发现采用新鲜的瘦猪肉与猪肝作为材料，实验结果更加明显，而且实验过程更加简便等。

综上所述，生物化学实验是培养学生动手能力和创新意识的重要基础课程，做好生物化学实验准备工作意义重大。因此，实验技术人员要在思想上高度重视实验准备工作，努力提高业务水平，才能适应不断发展的教育事业，胜任实验教学的工作，进一步提高教学质量。

参考文献：

[1]杨艳，刘晨光.如何改革生物化学的研究型教学[J].生命的化学，2015，35（2）：294-297.

[2]石莹，段巧玲，张玉心，等.加强实验室管理，提高生物化学实验教学质量[J].基础医学教育，2011，13（10）：922-924.

[3]王冰，李春梅，马晓凯，等.预实验在实验准备中的作用[J].卫生职业教育，2008，（18）：26.

[4]苏丽，汪晓莺，贲志云.预实验在免疫学实验准备工作中的重要性[J].科技信息，2010，（32）：129.