参飞颗粒对大鼠酒精性脂肪肝的保护作用

李　凤　于晓风　孙伟伦　刘一鸣　付雯雯　张　虹　睢大筼

(吉林大学药学院药理教研室，吉林　长春　130021)



参飞颗粒对大鼠酒精性脂肪肝的保护作用

李凤于晓风孙伟伦刘一鸣付雯雯张虹睢大筼

(吉林大学药学院药理教研室，吉林长春130021)

目的观察参飞颗粒对大鼠酒精性脂肪肝(AFLD)的保护作用。方法150只雄性Wistar大鼠，取12只作为正常组，其余大鼠制备AFLD模型：1～4 w灌胃给予40%白酒8 g/kg，5～8 w给予50%白酒9 g/kg，9～16 w给予50%白酒10 g/kg。第9周模型大鼠根据体重随机分为模型组、参飞颗粒(1、2、4 g/kg)组及阳性药水飞蓟宾(80 mg/kg)组，各组分别灌胃给予相应药物，正常及模型组给予同体积的0.5%羧甲基纤维素钠。给药8 w后，水合氯醛麻醉，腹主动脉取血，检测血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、极低密度脂蛋白(VLDL)、游离脂肪酸(FFA)、丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)活性。结果与正常组比较，模型组大鼠血清TC、TG、VLDL、FFA及MDA含量明显升高，SOD活性降低，AST、ALT活性升高。与模型组比较，参飞颗粒4g/kg剂量组能明显降低大鼠血清中TC、TG、VLDL、MDA、FFA含量及ALT活性，升高SOD活性。结论参飞颗粒对大鼠AFLD具有保护作用，其作用机制可能与调节脂质代谢、对抗脂质过氧化损伤及改善肝功能有关。

参飞颗粒；酒精性脂肪肝；脂质代谢；氧化应激

酒精性脂肪肝(AFLD)最初仅表现为脂肪肝，随着饮酒的继续，病情可继续发展为酒精性肝炎、酒精性肝纤维化，以最后形成酒精性肝硬化、肝细胞癌〔1〕。当机体受到酒精的刺激时，脂质过多的输入导致肝脏脂蛋白合成代谢发生障碍，脂肪酸氧化不足，脂肪就会在肝脏沉积，进而发生脂肪肝〔2,3〕。参飞颗粒是以人参、党参、水飞蓟及山楂4味中药组成的复方制剂，经处方筛选证实具有保肝、驱脂及降脂作用。本研究旨在探讨参飞颗粒对大鼠AFLD的保护作用。

1　材料和方法

1.1动物雄性Wistar大鼠150只，体重180～220 g，由吉林大学基础医学院动物实验中心供给，合格证号：SCXK-(吉) 2007-0003。动物饲养于通风动物房内，室温(20±2)℃，自由进食与饮水。

1.2药品和试剂参飞颗粒由白求恩医科大学制药厂提供，批号：20120523，以0.5%羧甲基纤维素钠配制成混悬液；水飞蓟宾胶囊由天津天士力制药股份有限公司生产，批号：20120721，以0.5%羧甲基纤维素钠配制成混悬液；总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、极低密度脂蛋白(VLDL)、游离脂肪酸(FFA)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷草转氨酶(ALT)及谷丙转氨酶(AST)测试盒由南京建成生物工程研究所提供。

1.3实验方法〔4〕150只大鼠适应性饲养1 w，取12只大鼠为正常组，其余大鼠造AFLD模型：第1～4周灌胃给予40%白酒8 g/kg，第5～8周给予50%白酒9 g/kg，第9～16周给予50%白酒10 g/kg〔酒精剂量(g)=乙醇体积(ml)×预配酒精浓度(%)×酒精密度(0.8 g/ml)〕。第9周模型大鼠根据体重随机分为模型组、参飞颗粒(1、2、4 g/kg)组及阳性药水飞蓟宾(80 mg/kg)组，各组分别灌胃给予相应药物，正常及模型组给予同体积0.5%的羧甲基纤维素钠。给药8 w后，水合氯醛麻醉，腹主动脉取血，分离血清，检测TC、TG、VLDL、FFA、MDA含量及SOD、AST、ALT活性；取部分肝脏制备匀浆，检测MDA含量及SOD活性。

1.4统计学方法采用SPSS10.0软件行方差分析。

2　结　果

2.1参飞颗粒对AFLD大鼠脂类代谢的影响与正常组比较，模型组大鼠血清TC、TG、VLDL及FFA含量均有明显升高(P<0.05或P<0.01)，与模型组比较，参飞颗粒4 g/kg组及水飞蓟宾组均能明显降低大鼠血清TC、TG、VLDL及FFA含量(P<0.05或P<0.01)，参飞颗粒2 g/kg组能明显降低大鼠血清TG、VLDL及FFA含量(P<0.05)，见表1。

表1　参飞颗粒对AFLD大鼠脂类代谢的影响

与正常组比较:1)P<0.05,2)P<0.01；与模型组比较:3)P<0.05,4)P<0.01；下表同

2.2参飞颗粒对AFLD大鼠自由基的影响与正常组比较，模型组大鼠血清及肝组织MDA含量明显升高，SOD活性明显降低(P<0.01)；与模型组比较，参飞颗粒2、4 g/kg组均能明显降低大鼠血清及肝组织MDA含量，升高血清及肝组织SOD活性(P<0.05或P<0.01)，见表2。

表2　参飞颗粒对AFLD大鼠自由基的影响

2.3参飞颗粒对AFLD大鼠血清肝酶的影响与正常组比较，模型组AST、ALT活性明显升高(P<0.05或P<0.01)；与模型组比较，参飞颗粒2、4 g/kg剂量组及水飞蓟宾组均能明显降低血清中ALT活性(P<0.05或P<0.01)，AST活性有降低趋势(P>0.05)，见表3。

表3　参飞颗粒对AFLD大鼠血清肝酶的影响

3　讨　论

由于长期饮酒导致肝脏损害，进而逐渐形成了AFLD。AFLD发病机制较为复杂，目前尚不完全清楚，可能与酒精及其代谢产物对肝脏的毒性作用、氧化应激、免疫介导、细胞因子、细胞凋亡、内毒素、遗传多态性、病毒的叠加作用等多种因素有关〔5～7〕。肝脏是脂类代谢的中心，对脂类的消化、吸收、氧化、分化、转化起着重要作用。乙醇氧化导致的高代谢状态使周围脂肪的动员增加，肝细胞脂肪酸的水平随着增加，从而造成TG在肝细胞内大量积聚而导致肝细胞脂肪病变，使肝脏从脂肪氧化器官变为储脂器官，最终导致AFLD形成〔8,9〕。本实验结果表明，参飞颗粒能显著降低血清TC、TG水平，提示参飞颗粒可能是通过减少脂质沉积起到保护AFLD大鼠肝脏的作用。

氧化应激是活性氧(ROS)产物增加和抗氧化失去平衡引起的酒精肝损伤的重要特征〔10〕。氧化应激可增加脂质过氧化产物和细胞因子的释放，介导AFLD的发生发展。本实验结果提示酒精可引起体内氧化与抗氧化失衡，氧自由基产生增多，从而启动脂质过氧化反应。给予参飞颗粒后，大鼠血清中MDA的含量显著下降，SOD的活力显著上升，提示参飞颗粒可能是通过增强大鼠体内清除氧自由基的能力和抗脂质过氧化来保护肝细胞，从而防治AFLD。

ALT及AST酶学指标能反映肝细胞坏死的程度，直接关系到AFLD的发展与转归〔11〕。本实验提示参飞颗粒对肝功能具有改善作用，对大鼠AFLD具有保护作用，其作用机制可能与调节脂质代谢、对抗脂质过氧化损伤及改善肝功能有关。

1Duggan AE,Duggan JM.Alcoholic liver disease-assessment and management〔J〕.Aust Fam Physician,2011;40(8):590-3.

2Dugum M,McCullough A.Diagnosis and management of alcoholic liver disease〔J〕.J Clin Transl Hepatol,2015;28;3(2):109-16.

3Rocco A,Compare D,Angrisani D,etal.Alcoholic disease:liver and beyond〔J〕.World J Gastroenterol,2014;20(40):14652-9.

4李才.人类疾病动物模型的复制〔M〕.北京：人民卫生出版社,2008:266-8.

5Jame SM,Ryder S.Alcohol-related liver disease〔J〕.Practidoner,2003;247(1646):414-7.

6Hoek JB,Pastorino JG.Ethanol,oxidative stress,and cytokine-induced liver cell injury〔J〕.Alcohol,2002;27(1):63-8.

7Arteel GE.Oxidants and antioxidants in alcohol-induced liver disease〔J〕.Gastroenterology,2003;124:782-90.

8Lieber CS.Alcoholic fatty liver:its pathogenesis and mechanism of progression to inflammation and fibrosis〔J〕.Alcohol,2004;34(1):9-19.

9Seth D,Hogg PJ,Gorrell MD,etal.Direct effects of alcohol on hepatic fibrinolytic balance:implications for alcoholic liver disease〔J〕.J Hepatol,2008;48(4):614-27.

10曾民德.脂肪性肝病的氧应激及其治疗对策〔J〕.国外医学·消化系疾病分册，2005;25(5):263-6.

11Fernandez M,Trépo E,Degré D,etal.Transient elastography using Fibroscan is the most reliable noninvasive method for the diagnosis of advanced fibrosis and cirrhosis in alcoholic liver disease〔J〕.Eur J Gastroenterol Hepatol,2015;27(9):1074-9.

〔2016-03-11修回〕

(编辑李相军/滕欣航)

吉林省科技发展计划项目(No.20130727003YY)

睢大筼(1957-)，男，教授，博士生导师，主要从事心血管药理学研究。

李凤(1987-)，女，医学硕士，主要从事心血管药理学研究。

R-322

A

1005-9202(2016)15-3642-02；doi：10.3969/j.issn.1005-9202.2016.15.014