儿童患者血培养分离菌的分布与耐药性

吕春兰， 刘开琴， 陈莹莹， 苏大林

·论著·

儿童患者血培养分离菌的分布与耐药性

吕春兰， 刘开琴， 陈莹莹， 苏大林

目的 了解湖北省襄阳市中医医院儿童患者血培养分离菌的临床分布和耐药状况，为儿科医师诊治提供依据。方法 收集2014年度门诊及住院儿科患者血培养的分离菌及药敏试验进行回顾性分析。结果 儿童患者血培养共分离细菌257株，其中以凝固酶阴性葡萄球菌为主，占31.5 %；其次是大肠埃希菌（占18.3 %），肺炎克雷伯菌（占15.2 %），金黄色葡萄球菌（金葡菌，占11.3 %），肠球菌（占9.7 %）等。金葡菌和凝固酶阴性葡萄球菌对青霉素、苯唑西林、头孢菌素、红霉素、克林霉素耐药率相对较高，对利福平、阿米卡星的耐药率相对较低；肠球菌属对红霉素和环丙沙星耐药率较高，对青霉素和氨苄西林耐药率较低。尚未发现耐万古霉素、替考拉宁或利奈唑胺的革兰阳性球菌。MRSA的检出率为27.6 %，MRCNS检出率为53.1 %。大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对氨苄西林、头孢唑林耐药率较高，对头孢哌酮-舒巴坦、哌拉西林-他唑巴坦耐药率较低，ESBL阳性的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌检出率分别为31.9 %和23.1 %。结论 凝固酶阴性葡萄球菌为医院儿童患者血培养主要分离菌。应加强对儿童患者血培养中的分离菌进行耐药性监测，掌握其耐药特点以便有效地控制和防止多重耐药现象的发生。

血培养； 儿童； 分离菌； 耐药性

血流感染是严重的感染性疾病，致死率达35.1 %［1-2］，由于儿童患者免疫力低下更易造成血流感染。为了解儿童患者血培养阳性分离菌的临床分布和耐药状况，我们对湖北省襄阳市中医医院2014年1－12月儿童患者血培养阳性的257株分离菌进行回顾性分析。现将结果报道如下。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 菌株来源 来自湖北省襄阳市中医医院2014年1－12月门诊及住院部儿科送检的血培养2 805份标本中分离出细菌257株（除去复数株以及皮肤寄殖菌）。血培养阳性率为9.2 %。其中0～3岁218株，4～6岁18株，7～9岁12株，10～12岁9株。

1.1.2 抗菌药物纸片和培养基 抗菌药物纸片、哥伦比亚琼脂及MH琼脂均购自英国OXOID公司。

1.2 方法

1.2.1 细菌鉴定及药敏试验 细菌鉴定严格按照《全国临床检验操作规程》常规方法进行。药敏试验采用纸片扩散法，按CLSI 2014年版制定的标准判断结果。质控菌株为大肠埃希菌ATCC 25922、ATCC 35218，金黄色葡萄球菌（金葡菌）ATCC 25923，粪肠球菌ATCC 29212，铜绿假单胞菌ATCC 27853，肺炎克雷伯菌ATCC 700603均购自湖北省临床检验中心。

1.2.2 甲氧西林耐药葡萄球菌检测 采用CLSI 2014年推荐的头孢西丁法检测。

1.2.3 ESBL检测 采用CLSI推荐的表型确证试验，即用头孢噻肟-克拉维酸和头孢他啶-克拉维酸两组纸片同时进行检测并用大肠埃希菌ATCC 25922和肺炎克雷伯菌ATCC 700603作质控。

1.2.4 统计学处理 实验数据采用WHONET 5.6版本进行统计分析。

2 结果

2.1 分离菌构成

儿童患者血培养以凝固酶阴性葡萄球菌为主，占31.5 %；其次是大肠埃希菌占18.3 %，肺炎克雷伯菌占15.2 %，金葡菌占11.3 %，肠球菌占9.7 %等。结果见表1。

表1 儿童患者血培养常见分离菌构成Table1 Distribution of the bacterial strains isolated from blood in children by species

2.2 MRSA、 MRCNS检出率

MRSA和MRCNS检出率分别为27.6 %（8/29）和53.1 %（43/81）。

2.3 ESBL检出率

ESBL阳性大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌分别为31.9 %（15/47）和23.1 %（9/39） 。

2.4 革兰阳性球菌对抗菌药物耐药率

儿童患者血培养金葡菌和凝固酶阴性葡萄球菌对青霉素、苯唑西林、头孢菌素、红霉素、克林霉素耐药率相对较高，对利福平、阿米卡星耐药率相对较低，肠球菌属对红霉素、环丙沙星耐药率较高，对青霉素、氨苄西林耐药率较低，尚未发现耐万古霉素、替考拉宁、利奈唑胺的革兰阳性球菌。结果见表2。

2.5 革兰阴性菌对抗菌药物耐药率

大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对氨苄西林、头孢唑林耐药率较高，对头孢哌酮-舒巴坦，哌拉西林-他唑巴坦耐药率较低，结果见表3。

3 讨论

本院儿童患者血培养分离菌以革兰阳性球菌为主，占54.9 %，革兰阴性杆菌占45.1 %。主要分离菌的分布依次为凝固酶阴性葡萄球菌，占31.5 %；大肠埃希菌占18.3 %；肺炎克雷伯菌占15.2 %；金葡菌占11.3 %；肠球菌占9.7 %等。未检出真菌。与成人患者血培养相比［3］少见铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌。

表2 儿童患者血培养革兰阳性球菌对常用抗菌药物的敏感率和耐药率Table2 Susceptibility of the gram-positive cocci isolated from blood in children to commonly used antimicrobial agents

表3 儿童患者血培养革兰阴性菌对常用抗菌药物的敏感率和耐药率Table3 Susceptibility of the gram-negative bacteria isolated from blood in children to commonly used antimicrobial agents

本次统计中，儿童患者血培养中MRCNS的检出率（53.1 %）低于刘建华等［4］报道。MRSA的检出率相对较低，为27.6 %，与文献报道较为一致［4］。有文献报道MRCNS最容易通过医务人员的手进行广泛传播，因此我们在诊疗操作过程中，必须严格无菌操作，杜绝院内交叉感染机会。同时应避免滥用糖皮质激素及免疫抑制剂，加强病房内消毒制度，加强医护人员手卫生规范，加强医务人员责任意识，督促其定期评估医院感染危险态势，防止医院感染的暴发和流行［5］

近年来由于抗菌药物的不合理使用导致细菌耐药愈来愈严重，从本次统计资料来看，儿童患者血培养葡萄球菌对青霉素、红霉素、克林霉素的耐药率均较高，说明这些传统的经验用药已不再适合治疗儿童葡萄球菌血流感染。与成人血培养菌株相比儿童患者中分离菌对环丙沙星、左氧氟沙星、庆大霉素耐药率相对较低，这可能与这些药物对儿童有一定的不良反应，在儿童患者中使用较少有关。目前国内在治疗葡萄球菌引起的血流感染时首选万古霉素，而国外已有多例耐万古霉素金葡菌的报道［6］，因此要严格控制临床万古霉素的使用，避免抗菌药物滥用，延缓耐药性的发生。儿童患者血培养中屎肠球菌多于粪肠球菌，尚未发现耐万古霉素和替考拉宁的肠球菌。但国内外都已存在儿童患者血培养病例中分离到耐万古霉素肠球菌的报道，需引起重视［7］。

儿童患者血培养中革兰阴性杆菌感染主要为大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌。二者对氨苄西林、头孢唑林耐药率较高，对头孢哌酮-舒巴坦，哌拉西林-他唑巴坦的耐药率较低。ESBL阳性的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌检出率分别为31.9 %和23.1 %.低于陈翠芳［8］等的报道。统计发现ESBL阳性的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌多表现为多重耐药，因此临床要加强消毒隔离制度，防止耐药菌的播散。

本研究中血培养阳性率为9.2 %，较文献报道血培养阳性率在10 %～15 %［9］为低。要注意把握采血量、采血份数以及采血时机。对于每一次采样，建议至少同时做一个需氧瓶与一个厌氧瓶，并在不同时间、不同部位做3次采样［10］。样本注入培养瓶后尽快送至实验室上机培养，树脂儿童瓶室温保存的应在24 h内上机。对营养要求苛刻的微生物可适当延长培养周期，再转种特殊培养基。对血培养阳性但涂片革兰染色阴性的样本改用盐酸乙醇溶液脱色、亚甲兰溶液复染，可能发现不常见菌［11］。

总之，儿童患者血培养与成人患者血培养分离菌分布及耐药性存在一定的差异，加强儿童患者血培养耐药性监测，掌握分离菌分布及耐药特点，严格掌握抗菌药物的用药适应证，为临床医师合理用药提供依据是非常必要的。

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Distribution and antibiotic resistance profile of the bacterial strains isolated from blood of children in a Traditional Chinese Medicine Hospital

LÜ Chunlan， LIU Kaiqin， CHEN Yingying， SU Dalin.
（Department of Laboratory Medicine， the Affiliated Hospital of Hubei Traditional Chinese Medicine University， Xiangyang Traditional Chinese Medicine Hospital，Xiangyang Hubei 441000， China）

Objective The distribution and antibiotic resistance profle of the strains from blood samples were investigated in the children treated in a Traditional Chinese Medicine Hospital. The fndings was useful for better clinical treatment. Methods The data of blood culture and antimicrobial susceptibility testing in 2014 were collected for pediatric outpatients and inpatients. A retrospective analysis was conducted with the data available. Results A total of 257 strains of bacteria were isolated from children's blood，of which coagulase negative Staphylococcus accounted for 31.5 %， followed by Escherichia coli 18.3 %， Klebsiella pneumoniae 15.2 %， Staphylococcus aureus 11.3 %， and Enterococcus 9.7 %. No fungal isolate was found. The S. aureus and coagulase negative Staphylococcus isolates showed relatively higher resistance rates to penicillin， oxacillin， cephalosporin， erythromycin， and clindamycin， but lower resistance to rifampin and amikacin. The Enterococcus strains were highly resistant to erythromycin and ciprofoxacin， but lower resistance to penicillin and ampicillin. No gram-positive bacterial strains were found resistant to vancomycin，teicoplanin or linezolid. The prevalence of MRSA was 27.6 % in the S. aureus isolates， and 53.1 % of the CNS strains were resistant to methicillin. E. coli and K. pneumoniae strains showed higher resistance rate to ampicillin and cefazolin， but relatively lower resistance to cefoperazone-sulbactam and piperacillin-tazobactam. The prevalence of ESBLs-positive strains was 31.9 % in E. coliand 23.1 % in K. pneumoniae. Conclusions Coagulase negative Staphylococcus is the main bacterial isolates in blood culture in children. We should strengthen the monitoring of antimicrobial resistance of the isolates from blood samples in order to take effective measures to control and prevent theemergence of multidrug resistance.

blood culture； children； bacterial isolate； antimicrobial resistance

R378.11

A

1009-7708 （ 2016） 05-0644-04

10.16718/j.1009-7708.2016.05.021

2015-10-13

2016-03-23

湖北中医药大学附属医院襄阳市中医医院检验科； 湖北襄阳 441000。

吕春兰（1973 —），女，学士，副主任技师，主要从事临床微生物研究。

刘开琴，E-mail：liukaiqin73@126.com。