红薯茎叶中黄酮类化合物的提取方法比较

2016-10-21徐艳

农家科技下旬刊 2016年7期

徐艳

摘要：为充分利用红薯茎叶资源，避免资源的浪费，以红薯茎叶为原料，对红薯茎叶中黄酮类物质的提取方法进行比较。采用碱提酸沉法、超声波法和醇提法进行提取试验，得出红薯茎叶中黄酮类化合物提取的最佳工艺。

关键词：红薯；黄酮类化合物；提取方法

黄酮类化合物是以黄酮为母核的一大类化合物，广泛存在于植物体中，目前为止已发现的黄酮类化合物有8000多种。红薯茎叶是红薯的副产物，就农业生产而言没有任何作用，因而大量叶梗被作为饲料或是直接弃置，造成极大浪费。红薯茎叶含有大量的黄酮类化合物，这类化合物可以增强免疫功能、促进新陈代谢、提高机体抗病能力、延缓衰老、降血糖、抗肿瘤保肝等方面有较好的功效，具有极大的医药价值，若是充分开发利用可以形成比较可观的经济效益。对红薯茎叶内黄酮类化合物提取的研究不足，是导致红薯茎叶被弃置浪费的一个主要原因[1-4]。

一、材料与方法

1.实验材料。取新鲜和陈腐的红薯茎叶，洗净后自然晾干水份。然后放入烘箱，在60摄氏度下烘15小时，至恒重。粉碎后过筛备用。

2.试剂与仪器。主要试剂： 95%乙醇、芦丁、氢氧化钠、浓盐酸。

主要仪器：SHZ-3循环水多用真空泵，上海沪西分析仪器厂有限公司；751002—电子天平，上海上天精密仪器有限公司；DL—1电子万用炉，北京市永光明医疗仪器厂。

3.实验方法

（1）醇提取法。称取红薯叶粉10g，置于圆底烧杯中，选定固液比（ml/g），用不同浓度乙醇在不同温度下回流提取，过滤，滤渣以同样条件提取过滤，提取2次，合并滤液，然后用相同浓度乙醇定容，按标准曲线的实验步骤测定黄酮含量。

（2）超声波提取法。称取红薯叶粉10g，置于圆底烧杯中，按一定固液比（ml/g）加入不同浓度乙醇，在超声波清洗槽中超声一定时间后，趁热用真空泵抽提过滤，滤渣以同样条件提取过滤，提取一定次数，合并滤液，滤液用同样浓度乙醇溶液定容，待测。

（3）芦丁标准曲线绘制。精密称取芦丁标准品100mg，置于100ml容量瓶中，加 70%乙醇溶解并定容至刻度，再取10ml此标准液于100ml容量瓶中，稀释，摇匀，定容作为标准品溶液。分别精密吸取标准品溶液，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0ml于10ml容量瓶中，加人0.1mol/L氯化铝溶液2.0ml，用70%乙醇定容至刻度并摇匀，显色15分钟后于波长422nm处测其吸光度，得到芦丁质量浓度（mg/ml）与吸光度之间的回归方程。

根据图1，求得回归方程A=13.365C+0.305，R2=0.9995。其中：C为芦丁含量（mg/mL），A为吸光度。相关系数R2为0.9995，表明在该浓度范围内芦丁浓度与吸光度线性关系良好。

4.样品提取液中黄酮含量的测定和计算。准确吸取提取液1ml置于10ml容量瓶，加入0.1mol/L氯化铝溶液，用70%乙醇定容至刻度线并摇匀，按上述标准曲线的实验步骤测定茶叶中总黄酮含量，即为得率。

红薯叶总黄酮得率=提取的黄酮含量/红薯叶粉质量*100%

二、结果与讨论

1.醇提法正交试验结果

由表1知黄酮提取率的影响按大小次序排列分别为A（乙醇浓度）>B（提取温度）>C（料液比）>D（提取时间），初步确定从红薯茎叶中提取黄酮类物质的优化方案为：A3B3C3D3。

2.超声波提取法正交试验结果

由表2知黄酮提取率的影响按大小次序排列分别为A（乙醇浓度）>B（提取次数）>C（液固比），初步确定从红薯茎叶中提取黄酮类物质的优化方案为：A3B2C1。

三、结语

通过按实验结果得出的超声波提取黄酮类化合物最优组合做验证试验，即乙醇体积分数为90%，固液比1：70、提取次数2次，结果红薯叶总黄酮的得率为0.38%，高于任何一组正交实验数据，说明优选出的工艺稳定可行。

参考文献：

[1] 吴立军，高慧媛，黄健等.天然药物化学实验指导[M].北京：人民卫生出版社，2013：179-180.