几种该院制剂薄层鉴别方法的改进

许红玮，鲁露，李学林

河南中医学院第一附属医院，河南郑州450000



几种该院制剂薄层鉴别方法的改进

许红玮，鲁露，李学林

河南中医学院第一附属医院，河南郑州450000

目的改进几种该院制剂的薄层鉴别方法。方法在原有标准基础上，对几种制剂中薄层色谱鉴别法中的供试品前处理条件进行优化，分别以相应的对照品为对照，采用薄层色谱法进行鉴别研究。结果供试品色谱中，检出与对照品相同颜色的斑点，阴性对照无干扰。结论建立的新方法色谱斑点清晰，展开效果理想，重复性好。可作为该制剂的质量控制方法。

医院制剂；超声提取；TLC

热咳颗粒，龙虎镇惊颗粒，消渴安胶囊，痤疮净丸为我院医院制剂（批件号分别为：2012R0706、2012R0315、2012R1231、2012R0657），热咳颗粒由麻黄、苦杏仁、石膏等5味中药制成，具有清热解表，止咳化痰。用于小儿风热咳嗽，吐黄粘痰，伴有发热等。龙虎镇惊颗粒由龙齿、琥珀、钩藤、僵蚕、朱砂等8味中药制成，具有镇惊熄风，安魂定魄，豁痰开窍，清神醒脑。用于惊厥抽搐，癫痫。消渴安胶囊由三七、黄芪、生地、水蛭粉等5味中药制成，具有益气养血止渴，活血化瘀通络的功效，用于糖尿病并发血管神经病变。痤疮净丸由金银花、黄芩、槐花、枇杷叶、天花粉、白花蛇舌草、浙贝母、薏苡仁、地黄等16味中药制成，具有清热解毒，祛湿散结。用于寻常痤疮，粉刺，溢脂性皮炎等属肺胃湿热者。以4上种制剂原标准的薄层色谱鉴别中供试品处理操作步骤繁琐，费时。该文通过实验，建立的新处理方法-超声方法既简化了操作，降低了检验物料的使用，又节省了检验时间，分离效果好、阴性无干扰。可作为4个该院制剂质量控制的定性指标。

1　实验材料

全自动薄层铺板器（M183507，北京克格仪器有限公司）、恒温水浴锅（HH-4，常州恒隆器有限公司）、科导台式超声波清洗器（SK250，上海汉克科学仪器有限公司）、Sartorius CP225D电子分析天平（德国）。热咳颗粒（130913），龙虎镇惊颗粒（131205），消渴安胶囊（130925），痤疮净丸（141210）及实验所用药材由医院制剂室提供，盐酸麻黄碱对照品（中国药品生物制品检定所，供鉴别用10767-171241），钩藤对照药材（中国药品生物制品检定所，供鉴别用2051-121190），三七皂苷R1对照品（维克奇，供鉴别用），人参皂苷Rg1对照品（中国药品生物制品检定所，供鉴别用，110703-200322），绿原酸对照品（中国药品生物制品检定所，供鉴别用，110753-201314），硅胶G（青岛海洋化工有限公司），乙醚、甲醇、氯仿、正丁醇、甲酸等试剂均为分析纯，水为纯化水。

2　方法和结果

2.1热咳颗粒中麻黄的鉴别

2.1.1供试品溶液的制备a.样品原处理方法：本品研细取10 g，加乙醚30 mL，浓氨试液2 mL，冷浸2 h，滤过，滤液加酸性乙醇（5%盐酸乙醇溶液）1 mL，挥干，加1 mL甲醇使残渣溶解，作为供试品溶液。b.超声处理法［1］：本品研细取10 g，加乙醚30 mL，浓氨试液2 mL，加冰超声处理20 min，滤过后滤液挥干，加甲醇1 mL使残渣溶解，作为供试品溶液。

2.1.2阴性对照溶液的制备按处方比例（饮片麻黄除外）及制法，制成麻黄阴性样品，取10 g，同“2.1.1”b项下供试品溶液的制备方法，制成阴性溶液。

2.1.3对照品溶液制备取盐酸麻黄碱对照品5.0 mg，加甲醇5 mL制成每1 mL含1 mg的溶液，得对照品溶液。

2.1.4薄层色谱条件按中国药典2010年版一部附录VIB薄层色谱法试验，在同一硅胶G薄层板上分别点上述溶液各5 μL，以氯仿-甲醇-浓氨试液（20：5：0.3）为展开剂，展开8 cm，取出晾干后喷以茚三酮试液，在105℃烘约5 min。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性无干扰；见图1。

图1　麻黄薄层图谱

2.2龙虎镇惊颗粒中钩藤的鉴别

2.2.1供试品溶液的制备a.样品原处理方法：本品研细取10 g加浓氨试液使湿润，加氯仿30 mL，冷浸24 h，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇5 mL使溶解，作为供试品溶液。b.超声处理法［2］：本品研细取10 g加浓氨试液使湿润，加氯仿30 mL，加冰超声处理30 min，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇5 mL使溶解，作为供试品溶液。

2.2.2阴性对照溶液的制备按处方比例（饮片钩藤除外）及制法，制成钩藤阴性样品，取10 g，同“2.2.1”b项下供试品溶液的制备方法，制成阴性溶液。

2.2.3对照品溶液制备取钩藤对照药材5 g，同2.2.1供试品溶液的制备a.样品原处理方法制成对照药材溶液。

2.2.4薄层色谱条件按中国药典2010年版一部附录VIB薄层色谱法试验，在同一硅胶G薄层板上分别点上述溶液各10 μL，在氯仿-丙酮-三乙胺（50∶30∶2）中展开，取出晾干，置紫外灯（254 nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，阴性则无干扰，见图2。

图2　钩藤薄层图谱

2.3消渴安胶囊中三七的鉴别

2.3.1供试品溶液的制备a.样品原处理方法：取样品1.25 g，置索氏提取器中，加乙醚60 mL，加热回流2 h，弃去乙醚液，药渣晾干，再加入甲醇60 mL，加热回流至提取液无色，提取液蒸干，残渣加水30 mL使溶解，用水饱和正丁醇提取2次（20 mL、20 mL），合并正丁醇液，用正丁醇饱和的水洗涤两次，每次20 mL，弃去水液，正丁醇液挥干，残渣加甲醇适量溶解，移置10 mL量瓶中作为供试品溶液。

b.超声处理法［3］：取样品1.25 g，加水20滴，加水饱和正丁醇20 mL，超声30 min，滤过，用正丁醇饱和的水洗涤两次，每次20 mL，弃去水液，正丁醇液挥干，残渣加甲醇适量溶解，移置10 mL量瓶中作为供试品溶液。

2.3.2阴性对照溶液的制备按处方比例（饮片三七除外）及制法，制成三七阴性样品，取1.25 g，同“2.3.1”b项下供试品溶液的制备方法，制成阴性溶液。

2.3.3对照品溶液制备取9.0 mg人参皂苷Rg1，9.0 mg三七皂苷R1对照品，分别加甲醇5 mL制成每1 mL含1.4 mg的溶液，作为对照品溶液。

2.3.4薄层色谱条件按中国药典2010年版一部附录VIB薄层色谱法试验，在同一硅胶G薄层板上分别点供试品溶液和阴性溶液各20 μL，对照品溶液各5 μL，以氯仿-乙酸乙酯-甲醇-水（15：40：22：10）10℃放置12 h的下层溶液为展开剂展开10 cm，取出晾干后喷10%硫酸乙醇，105℃加热至斑点清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性则无干扰。（见图3及图3-1）。

图3　三七薄层图谱（紫外365 nm）

图3　-1三七薄层图谱（日光）

2.4痤疮净丸中金银花的鉴别

2.4.1供试品溶液的制备a.样品原处理方法：本品研细，取5 g加甲醇20 mL，冷浸12 h，滤过，滤液浓缩至2 mL，作为供试品溶液。

b.超声处理法［6-7］：本品研细取5 g加甲醇20 mL，超声处理30 min（加冰袋），滤过，滤液浓缩至2 mL，作为供试品溶液。

2.4.2阴性对照溶液的制按处方比例（饮片金银花除外）及制法，制成金银花阴性样品，取5 g，同“2.4.1”b项下供试品溶液的制备方法，制成阴性溶液。

2.4.3对照品溶液的制备取绿原酸对照品5 mg，加甲醇5 mL制成每1 mL含1 mg的溶液，得对照品溶液。

2.4.4薄层色谱条件按《中国药典》2010年版一部附录VIB薄层色谱法试验，在同一硅胶G薄层板上分别点上述溶液各1 μL，以醋酸丁酯-甲酸-水（65∶25∶20）上层溶液为展开剂展开，展距约8 cm，取出晾干后置紫外灯下（365 nm）检视。在与对照品色谱相应的位置上，供试品色谱中显相同颜色的荧光斑点，阴性无干扰；见图4。

图4　金银花薄层图谱

3　讨论

3.1薄层色谱法是中药制剂常用的鉴别方法之一

由于中药制剂成分复杂，杂质多、干扰大，供试品的制备成为关键。前处理的方法很多，目前，国内外主要采用提取法：煎煮法、回流提取法、渗漉法、浸渍法，但是这些常规方法存在着需要加热、提取时间长、溶剂用量大等缺点。超声提取技术作为一种药物前处理的提取新方法，具有省时、节能、提取效率高等特点和优点，在中药复方提取的研究中越来越受到广泛应用，在中药领域中具有广阔的应用前景。

3.2超声提取时间是超声提取方法中的重要影响因素之一

该试验对超声提取重要影响因素-时间进行了考察，结果表明麻黄超声20 min、30 min时提取效果较佳，但二者区别不明显。故该试验方法确定为超声提取20 min；钩藤、三七、金银花超声30 min、40 min时提取效果较佳，但二者区别不明显，故该试验方法确定为超声提取30 min。超声法重复3次所得结果一致，说明改进后的方法重复性好。

4　结语

热咳颗粒中的麻黄为方中君药，能宣肺气，开腠理，散风寒，以发汗解表，散风寒而平喘。龙虎镇惊颗粒中的钩藤为方中君药，性苦；微寒。具有清热平肝；熄风止痉。主治：小儿惊风；夜啼；热盛动风；子痫等。消渴安胶囊中的三七为方中君药，具有扩张血管，溶解血栓，改善微循环，预防和治疗高血脂、胆固醇增高、冠心病、心绞痛、脑溢血后遗症等心脑血管疾病。痤疮净丸中的金银花为方中君药，是性能较平和、使用较广泛的清热解毒中药，现药理研究证实具有降温退热、抗菌、抗病毒和消除内毒素的作用。该实验以《中国药典》2010年版一部为依据，查阅学术期刊相关文献，通过实验，确定超声实验方法，采用超声法处理样品，与原处理法对比，采用薄层色谱法4个该院制剂方中君药麻黄、钩藤、三七、金银花四味药进行了定性鉴别，操作方法简便、分离效果好、阴性无干扰，可作为4个该院制剂质量控制的定性指标之一。

［1］郑全，郭维霄，刘芳，等.小青龙颗粒薄层鉴别方法的改进［J］.时珍国医国药，2014（3）：625-626.

［2］李钦青，郭蕾，张俊龙，等.复方天麻钩藤口腔崩解片质量标准研究［J］.中国中医药信息杂志，2014（2）：85-87.

［3］许勇，王柯，季申.降脂灵胶囊的质量标准研究［J］.中成药，2010（10）：1720-1723.

Improvement of Some Preparation Thin-layer Identification Methods in Our Hospital

XU Hong-wei，LU Lu，LI Xue-lin
First Affiliated Hospital of Henan University of Traditional Chinese Medicine，Zhengzhou，Henan Province，450000 China

Objective To improve some preparation thin-layer identification methods in our hospital.Methods The test article pretreatment condition in the thin-layer chromatography identification method in some preparations was optimized on the basis of the primary standards，and the corresponding control articles were selected for control，and the thin-layer chromatography method was adopted for identification and research.Results The spot whose color was the same with the control article in the test article chromatogram was detected and the negative control had no interference.Conclusion The chromatogram spot of the new method is clear with ideal developing effect and good repeatability，which can be used as a quality control method of this preparation.

Hospital preparation；Supersonic extraction；TLC

R286.0

A

1672-5654（2016）09（a）-0108-03

10.16659/j.cnki.1672-5654.2016.25.108

2016-06-07）

河南省科技攻关计划项目（201304045）。

许红玮（1969.3-），女，河南许昌人，硕士研究生，副主任药师，研究方向：药物制剂与临床。

李学林（1960.7-），男，河南林县人，硕士研究生，硕导，主任药师，研究方向：中药的应用形式和中药合理应用，E-mail：lixuelin450000@163.com。