金银花中绿原酸的研究进展

王金丹

摘要：金银花是常用中药材，而绿原酸被认为是金银花中重要的活性物质之一。通过查阅相关文献，分析、归纳、总结近年来金银花中绿原酸的提取、纯化及生物活性方面的研究进展，以期为金银花的进一步开发利用提供参考。

关键词：金银花；绿原酸；提取；纯化；生物活性；研究进展

中图分类号：R932 文献标识码：A 文章编号：1674-1161（2016）06-0059-03

金银花（Flos Lonicerae）为忍冬科植物忍冬的干燥花蕾或初开的花，具有清热解毒、凉散风热、保肝利胆等功效，是常用中药材之一。金银花之所以具有清热解毒等功效，是因为其中含有一种有效成分——绿原酸（Chlorogenic acid）。绿原酸是一种多酚类化合物，分式子为C16H18O9，易溶于水、醇、丙酮等，具有抗氧化、抗菌、抗病毒、抗肿瘤、降血压、降血脂、提高白细胞数量、增强免疫调节、增香护色等作用。近年来，通常以绿原酸的含量高低来评价金银花质量的好坏[1]。国内对金银花中绿原酸的提取、纯化及其生物活性等进行了大量的研究，本课题在查阅收集大量文献的基础上，综述近几年金银花中绿原酸的提取、分离纯化、生物活性等方面的研究进展，以期为今后进一步研究提供参考。

1 提取方法

1.1 溶剂提取法

金银花中绿原酸的提取一般用水和醇溶液为溶剂提取，但用水作溶剂存在测得的绿原酸含量偏低、难以过滤等缺点，所以目前大多采用醇提法[2]。李春燕等人对比了药典方法、回流提取法、超声提取法、水煎法以及萃取与不萃取等不同处理方法提取金银花中绿原酸的得率，结果显示，不同提取方法对金银花中绿原酸的提取率影响较大，其中醇提回流提取不萃取方法所得绿原酸提取率最高、为4.16%[3]。

1.2 超声波辅助提取法

绿原酸提取时不能高温、强光及长时间加热，而超声波提取能克服绿原酸的不稳定性，采用全物理过程提取，没有水提法难以过滤之虑和醇提法溶剂使用成本高、溶剂回收难的问题，是较为理想的提取方法。袁飞的研究表明，各因素影响超声波提取绿原酸的顺序为溶剂类型>预处理>提取时间>物料比，优化的最佳提取工艺为以60%乙醇为溶剂、物料比1∶30、提取时间45 min、远红外微波1 min，得到的绿原酸含量比水和乙酸乙酯提取的高近2倍[4]。

1.3 微波辅助提取法

李燕婷等人通过采用单因素试验和正交试验确定微波辅助提取金银花中绿原酸的最佳工艺为乙醇体积分数60%、微波处理时间9 min、微波功率300 W、料液比1∶10（g∶mL），提取率为3.779%，该法与传统提取方法相比，操作时间明显缩短，且无需回收溶剂[5]。尤秀丽等人采用超声波和微波双辅助提取技术得到的绿原酸提取率较单独采用超声波或微波辅助得到的绿原酸提取率高[6]。采用微波技术会造成提取过程温度的迅速上升，影响绿原酸的提取率，所以在提取过程中要严格控制温度。

1.4 其他提取方法

除了以上常用的提取方法外，也有很多研究采用了其他提取技术，如酶解法辅助提取、酶法辅助聚二乙醇（PEG）-200提取、微波辅助聚二乙醇（PEG）提取、破壁法辅助提取、超临界二氧化碳提取等，均取得了较好的提取效果。

2 纯化方法

2.1 大孔树脂柱层析纯化法

利用大孔树脂分离纯化绿原酸，其工艺简单、成本低、产率高，现较多采用。兰雪萍等人分别考察各种类型的大孔树脂对金银花中绿原酸分离纯化的影响，结果表明，NKA-2大孔树脂、HPD450大孔树脂、ADS-21型大孔树脂和D101型大孔树脂均对绿原酸有较好的纯化效果，可用于工业化大生产[7]。

2.2 膜分离纯化法

范远景等人比较3种微滤膜MF1，MF2和MF3，4种超滤膜UF1，UF2，UF3和UF4，及2种反渗透膜RO1和RO2对绿原酸提取液的过滤特性，结果表明，MF1，UF1和RO2膜的过滤性能明显优于其他同类型膜[8]。

2.3 其他纯化方法

除了上述分离纯化方法外，其他方法也较为常用，如凝胶柱层析、聚酰胺柱层析等。

3 生物活性

3.1 抑菌、抗病毒作用

金银花中绿原酸对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、酵母菌、黑曲霉、枯草芽孢杆菌均有一定的抑制作用；而且，其抑菌效果主要受温度影响，绿原酸抑菌效果随温度的升高而增加，但是当温度超过60 ℃时，抑菌效果明显下降；pH值和紫外灯照射时间对其抑菌效果影响不大，不过绿原酸在酸性条件下的抑菌效果略好。徐跃成的试验结果表明，绿原酸对革兰氏阴性菌（志贺氏菌、沙门氏菌）的抑菌活性比革兰氏阳性菌（金黄色葡萄球菌、李斯特菌）更强，绿原酸水溶液抑菌效果与0.1 mg/mL的卡那霉素的抑菌效果相当[9]。金银花主要活性成分绿原酸可以抑制烟曲霉生物膜胞外基质的形成，其抑制作用呈浓度依赖性。王林青的研究结果表明，在安全浓度范围内，金银花和山银花绿原酸类提取物在体外对PRV，NDV分别表现出显著的阻断病毒吸附，抑制病毒感染作用和中和病毒作用，且有一定的量效关系；而且金银花绿原酸类提取物能促进淋巴细胞增殖及协同LPS，ConA的作用[10]。

3.2 抗血栓作用

樊宏伟等人研究金银花中绿原酸、异绿原酸类化合物的体外抗血小板聚集作用及H2O2损伤的人脐静脉内皮细胞的保护作用，结果表明，金银花中有机酸类化合物有抗ADP诱导血小板聚集的作用；对H2O2损伤绿原酸虽然未观察到直接对抗作用，但具有预防性保护作用[11]。

3.3 抗氧化（清除自由基）作用

刘豪等人的研究结果表明，金银花95%乙醇提取物中绿原酸、总黄酮和总酚含量分别为123.99，242.62和48.76 mg/g；95%乙醇提取物清除

·OH和DPPH·能力也最强，清除率分别为90.69%和65.64%[12]。石奇的研究结果表明，金银花绿原酸具有较强的抗氧化能力，其抗氧化能力与绿原酸浓度在一定范围内呈线性关系。金银花绿原酸添加量为0.5 mg/mL时，对OH·的清除率比VC效果略好；添加量为0.4 mg/mL时，对O2-·的清除效果明显优于VC[13]。

3.4 解热和抗炎作用

雷玲的研究结果表明，金银花水提取物（绿原酸、木犀草素）于10 mg/mL具有抗内毒素作用，金银花为5.625 g/kg时具有解热作用，为45 g/kg时具有抗炎作用[14]。

3.5 防腐作用

杨明阳等人的研究结果表明，绿原酸对贡梨、红富士鲜切片都有保鲜效果，对圣女果的保鲜作用差[15]。詹晓如提取分离金银花活性成分绿原酸，然后将其用于医院常用几种制剂防腐试验，结果表明，0.02%绿原酸具有与0.03%尼泊金乙酯相同的防腐作用，证明绿原酸可以用于制剂防腐，以消除化学防腐剂毒副作用[16]。

3.6 防晒作用

张英等人的研究结果显示，金银花提取物在280～350 nm内具有良好的紫外吸收性能，金银花防晒霜体外评价SPF值与金银花提取物中绿原酸含量有关[17]。

4 结语

金银花作为传统的中药，对机体具有广泛的作用，是国家第一批药食兼用植物，具有极高的营养价值和保健作用，而其有效成分绿原酸是发挥作用的主要成分。目前关于金银花绿原酸的研究仍需进一步深入，还要做大量的试验研究，以促进金银花更大规模化生产和新型保健用品的开发。

参考文献

[1] 李杰，王学廷，吴银萍，等.金银花中绿原酸提取方法的研究进展[J].安徽农业科学，2014，2（16）：4 970-4 973.

[2] 田洋.黄芪甲苷提取与纯化工艺研究进展[J].农业科技与装备，2015（10）：42-43.

[3] 李春燕，曾婷，陈远谷.金银花中绿原酸不同提取方法的比较[J].食品科技，2015（9）：46-48.

[4] 袁飞.正交实验优化金银花中绿原酸超声提取工艺[J].中国医药导刊，2012，14（5）：913-914.

[5] 李燕婷，周文富.金银花中绿原酸的微波辅助提取工艺研究[J].化学与生物工程，2011（10）：65-69.

[6] 尤秀丽，池路花，曹芸梅.响应面法优化微波超声双辅助提取金银花绿原酸工艺[J].食品工业科技，2014，35（12）：272-276.

[7] 兰雪萍，郭思杙，李焰芳.金银花中绿原酸的大孔树脂纯化工艺[J].食品科技，2015（8）：223-228.

[8] 范远景，马凌云，徐晓伟.膜技术分离金银花绿原酸提取液工艺研究[J].食品科学，2010，31（20）：43-46.

[9] 徐跃成.金银花中绿原酸的提取分离及其抑菌作用研究[D].重庆：重庆大学，2008.

[10] 王林青. 金银花、山银花体外抗病毒与免疫增强活性研究[D].郑州：河南农业大学，2008.

[11] 樊宏伟，李英斌，孙敏.金银花中有机酸类成分抗血栓作用研究[J].中药药理与临床，2007，23（3）：33-36.

[12] 刘豪， 张冬青，刘硕.金银花不同提取物抗氧化活性的研究[J].食品研究与开发，2016（1）：48-52.

[13] 石奇.金银花绿原酸的酶解工艺及抗氧化活性研究[J].应用化工，2015（9）：1 643-1 646.

[14] 雷玲，李兴平，白筱璐.中药药理与临床金银花抗内毒素、解热、抗炎作用研究[J].中药药理与临床，2012（1）：115-117.

[15] 杨明阳，王光兰，刘伦沛.金银花中绿原酸提取及其在果蔬保鲜中的应用[J].凯里学院学报，2013，31（6）：66-73.

[16] 詹晓如，郑小吉.金银花活性成分绿原酸对制剂的防腐效果研究[J].时珍国医国药，2006，17（1）：75.

[17] 张英，林峰，饶长全.金银花中绿原酸防晒作用研究[J].日用化学工业，2014 （8）：448-453.