益母草碱的研究概况※

宋韶鹤　苗明三

（1　河南中医学院第一附属医院药学部，郑州　45008；2　河南中医学院科研处，郑州　450008）

益母草碱的研究概况※

宋韶鹤1苗明三2*

（1河南中医学院第一附属医院药学部，郑州45008；2河南中医学院科研处，郑州450008）

益母草碱有较强的活血化瘀、利水消肿作用，在治疗前列腺增生的研究中有重要意义。综述近年来有关益母草碱的研究情况，包含其理化性质、制备和测定方法、药理评价及毒性研究等，以期为益母草碱的进一步开发应用寻找新的信息和思路。

益母草碱；理化性质；制备和测定方法；前列腺增生；综述；中药化学

益母草碱(Leonurine)是益母草的有效成份，具有广泛的生物学活性［1］。近年来研究揭示了其治疗前列腺增生的良药［2］，还具有改善抗血小板聚集、改善血循环、抗炎镇痛、兴奋子宫、保钾利尿和保护心肌等功效［3-4］。文章对近几年益母草碱的研究进行简要概述，以期为益母草碱的进一步开发应用寻找新的信息和思路。

1　理化性质

益母草碱是生物碱。几乎不溶于水，熔点238℃（分解），溶于戊醇。益母草碱在自然界中只有极少一部分是以单体的形式存在，多以其盐的形式存在，含一结晶水的盐酸盐（如图1）。益母草碱水加氯化钡生成白色沉淀，再加硝酸，沉淀不溶解。

图1　盐酸益母草碱结构

2　制备方法

2.1硅胶柱色谱法硅胶柱色谱法是常用的方法，在一定条件下，硅胶与被分离物质之间产生作用，这种作用是由于硅胶表面与溶质分子之间的范德华力、硅胶表面的硅羟基与待分离物质之间的氢键产生作用，这种方法分离效果好，处理量大是天然产物提取有效成分的常用手段。张琳等［5］应用硅胶柱色谱对益母草碱提取分离。

2.2大孔吸附树脂法大孔吸附树脂采用特殊吸附剂，通过物理吸附从水溶液中选择性地吸附有机物。该法设备简单、易操作、产品纯度高等优点，因此大孔树脂吸附法在中药精制纯化应用日益广泛。李雪丽等［6］在大孔吸附树脂对益母草总碱提取分离，应用SP825树脂对益母草总黄酮和总生物碱提取分离，并且能提高药材使用率。

2.3合成法研究报道益母草中益母草碱含量很低，提取法制备得到量很少，分析结构可用化学合成方法来制备。以丁香酸为原料，用氯甲酸乙酯对其活泼的碳基保护和酰化、路易斯酸催化条件下四氢呋喃开环、酰氯的醇解等反应制备羰基化产物（4-乙氧羰基-氧基-丁香酸-丁酯），用该盖布瑞尔成胺法制备益母草胺，最后与甲基异硫脲反应制成益母草碱［7］。此法减少了反应步骤和操作的技术难度，并提高了收率，是常用得到益母草碱的方法。

2.4超声波和微波提取法传统益母草碱回流提取率较低。相比较微波具有加热迅速和均匀、穿透力强等特点；超声波辅助提取能使细胞破碎完全提取效率高、提取物生物活性不受影响。周本宏等［8］应用超声波提取法的超声频率和强度对益母草碱提取结果影响的探讨。

3　测定方法

3.1化学法

3.1.1沉淀反应原理是利用益母草碱中硫酸根离子与钡离子形成不溶于硝酸白色沉淀。方法是在益母草碱中加水溶解后，加氯化钡液，生成白色沉淀，加入硝酸后，沉淀不溶解。

3.1.2显色反应原理是利用益母草碱中含有酚羟基与三氯化铁反应显色。方法是样品加水溶解，加入三氯化铁振摇，溶液显茶褐色。

3.2紫外分光光度法(U V) 鉴于益母草碱结构中的共轭结构，在200～400 nm的紫外区有两个吸收峰，一般在217 nm和277 nm有最大吸收峰，但217 nm易受甲醇吸收干扰，277 nm没有影响，所以选择277 nm作为检测波长。UV快速和精确，不需要贵重仪器，是实验室简单测定益母草碱的方法。

3.3高效液相色谱法(H P L C) 高效液相色谱法高效、高灵敏度、分析和载液速度快、样品不被破坏等，是现代研究益母草碱测定常用方法。巩长芹等［9］发现用酸性流动相测定益母草碱单体时只出现单一的峰。Zhu Q等［10］对益母草碱混悬液经口服后，用高效液相色谱-质谱联用技术，检测大鼠血浆中样品的含量，这种方法简便且灵敏度高，为益母草碱混悬液口服后的药物代谢动力学研究提供帮助。

4　药理作用

4.1对子宫作用益母草碱对子宫有兴奋作用，明显增加收缩力和作用时间。文献报道益母草碱能显著抑制药物流产后大鼠子宫的出血量和出血时间［11］。静脉注射益母草半分钟后，出现子宫兴奋，证明其剂量与强度成正相关。

4.2对血液系统作用实验表明益母草碱能抗血小板聚集，降低动脉粥样硬化进程。刘新华等［12］报道益母草碱用于炎性血管疾病研究，通过抑制NF-kB信号通路和ROS产生发挥抗炎作用。另有报道益母草碱能改善微循环和红细胞的变形能力，降低血液黏度来治疗血淤症。

4.3对心肌作用实验表明益母草碱是从抗氧化、抗细胞凋亡和调节线粒体功等方面对心肌保护具有一定作用。另外其还能强化缺血预处理，对大鼠心肌再灌注的保护作用［13］。

4.4对脑部作用益母草碱对神经毒素6-羟基多巴损伤的神经细胞有保护和改善作用，益母草碱对大脑也有保护作用。Loh［14］发表在《Stroke》上的研究表明经益母草碱预处理一周的脑缺血大鼠，在神经行为学症状中能减少中风引起梗死面积，而且增强脑组织抗氧化，提高超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶的活性，降低自由基损伤保护缺血性损伤。实验发现脑缺血能引起线粒体功能下降，但是益母草碱能保护线粒体功能。

4.5对前列腺作用刘绍龑等［15］发现益母草碱能显著降低前列腺小鼠前列腺湿重和前列腺指数，减轻前列腺病理变化以及睾丸、附睾病理变化，同时益母草碱有保钾利尿作用。

5　毒性研究

5.1急性毒性益母草碱能兴奋呼吸中枢，之后麻醉中枢神经；具有箭毒样作用，肌肉松弛；有麦角碱样作用，收缩子宫、扩张小动脉、血压下降；前益母草素可使纤维蛋白原和血黏度降低［16］。黄伟等［17］比较益母草不同炮制品95%乙醇热回流提取物对小鼠急性毒性大小，发现鲜益母草急性毒性最大，酒炙益母草毒性最低，并通过酒炙益母草MTD得出益母草主要毒性成分是益母草总碱。

5.2亚急性毒性谢敏妍等［18］报道益母草总生物碱对肝功能和肾功能无明显毒副作用，但大剂量服用益母草总碱对肝功能有潜在影响。罗毅等［19］也报道益母草总生物碱对小鼠肝和肾的亚急性毒性，大剂量能影响小鼠肝功能，对肾功能影响不明显，提示小鼠肝脏比肾脏对益母草生物碱更敏感。

5.3靶器官毒性近些年来临床报道益母草能引起药物性肾损害，经罗毅等研究报道益母草对动物的肾脏产生毒性，机制可能是脂质过氧化的损伤。文章没有发现益母草碱对肾损害的临床报道和研究报告。

6　结语

益母草碱具有显著改善微循环和抗血小板聚集、抗炎镇痛、兴奋子宫、保钾利尿和保护心肌等功效。益母草碱是益母草中一种单体活性有效成分。由于仅存在于益母草中，全草中的含量较少，且提取分离工作量大、纯度也不高，因此多采用全合成的方法得到益母草碱。有关益母草碱的研究取得了一定成果，对其开发成新型药物有着广阔的应用前景。

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Research Surveyon Leonurlne

SONG Shaohe1， MIAO Mingsan2*
(1. Department of Pharmacy， The First Affi1iated Hospita1 of Henan University of TCM， Zhengzhou 450000， China；
2. Scientific Research Office， Henan University of TCM， Zhengzhou 450008， China)

Leonurine has effect on Promoting b1ood circu1ation for removing b1ood stasis and inducing diuresis for removing edema，which has imPortant in the treatment of benign Prostatic hyPerP1asia.The recent survey of 1eonurine was summarized，inc1uding PreParation and determination method，Physica1 and chemica1 ProPeries of bioactivity and toxicity，in order to seek further deve1oP-ment and aPP1ication of new information and ideas.

1eonurine；Physica1 and chemica1 ProPerties；PreParation and determination method；benign Prostatic hyPerP1asia；review；Chemistry of Chinese Materia Medica

10.3969/j.issn.1672-2779.2016.03.066

1672-2779（2016）-03-0141-03

国家自然科学基金项目（No：81173474）

miaomingsan@163.com

（本文编辑：苏玲本文校对：张洪玮2015-10-28）