液相色谱-串联质谱法测定芦荟苷方法的建立

2016-09-15廖建萌黄国方湛江市食品药品检验所湛江市质量计量监督检测所湛江市质量技术监督局

食品安全导刊 2016年21期

□ 郑　钰　廖建萌　黄国方　湛江市食品药品检验所　邢　华　湛江市质量计量监督检测所　罗　林　湛江市质量技术监督局

□ 郑钰廖建萌黄国方湛江市食品药品检验所邢华湛江市质量计量监督检测所罗林湛江市质量技术监督局

建立液相色谱-串联质谱法测定芦荟苷的方法，采用ESI负离子模式，多反应监测测定芦荟苷的分子离子峰为417.2，定量离子为297.2，定性离子为268.2和250.2；对方法进行验证，液相色谱-串联质谱法测定芦荟苷的线性R=0.999 4，出限为1.0 nμg/L，精密度RSD≤3%，是一种理想的检测方法，为芦荟制品质量检测、食品风险评估、合成分析研究、代谢研究提供数据及技术手段。

液相色谱-串联质谱法；芦荟苷；ESI负离子模式

1　芦荟苷概述

芦荟苷属蒽醌类化合物，是芦荟中的有机活性成分。据医学报导，芦荟苷有利于肠道内废物排除，研究发现芦荟苷具有杀菌、消炎解毒、促进伤口愈合等作用[3]。如今国家已正式将芦荟列入保健食品原料可利用的中药名单中，芦荟原料的安全评价列入食品安全专项研究课题中。

现有的检测芦荟苷方法有分光光度法，高效液相色谱紫外检测法（HPLC-UV）、液质联用、薄层扫描法等方法。目前液质联用法测定芦荟饮料中的芦荟苷未见相关报道。本文将用液相色谱-串联质谱法测定芦荟饮料中的芦荟苷，为产品的检测方法提供数据及技术手段支持。

2　实验部分

2.1仪器及试剂

LCMS-8030液相色谱质谱联用仪（日本岛津公司）、C18液相色谱柱（日本岛津公司）、XS205电子分析天平（METTELER TOLEDO）。

甲醇:高效液相色谱纯（天津大茂化学试剂厂）。乙腈：高效液相色谱纯（天津大茂化学试剂厂）。氨水、乙酸铵：优级纯（广州化学试剂厂）。

2.2实验方法及结果

2.2.1色谱条件

色谱柱：C18，150 mm×2.1 mm，5 μm。柱温：30℃。流动相：20%甲醇-80% 5 mmol/L乙酸铵水溶液（含0.1%氨水）。流量：300.0 μL/min。进样体积：10.0 mL。运行时间：10 min。

2.2.2质谱条件

检测模式：ESI负离子，多反应监测（MRM）。电喷雾电压（IS）：4 500 V。离子传输温度（TEM）：400℃。雾化气流量：3.0 L/min。干燥气流量12.0 L/min。

2.3结果与讨论

2.3.1分子离子峰的确定

将质谱仪调整到最佳状态，配制1.0 μg/mL的芦荟苷标准溶液，进样10 mL，分别在ESI正、ESI负离子的模式下进行全扫描监测，扫描范围100 ~500 u，发现在正离子模式下，419.2 u和436.2 u的响应较高。4417.2 u为负离子模式下[M-H]-分子离子峰。考虑到正离子模式下芦荟苷形成分子离子峰并不唯一，且正离子模式受到的干扰多使测定的灵敏度及稳定性下降，负离子模式测定芦荟苷含量的灵敏度更高，更稳定，因此选择负离子模式，417.2 u作为芦荟苷测定的母离子。

2.3.2二级质谱

配制1.0 μg/mL的芦荟苷标准溶液，进样10 mL，扫描模式为Q1全扫描-质子扫描，能量（CE）范围为10 ev~50 ev，结果如图1所示。图1中，芦荟苷分子离子417.2产生的二级质谱较稳定的有297.2、268.2和250.2，其中相对丰度最高的为297.2，因此确定297.2作为芦荟苷测定的定量离子，268.2和250.2作为定性参考离子。