CLIA技术在新生儿TORCH感染检测中的应用研究

王俊育，王元白，张　娜，黄宝加

(福建医科大学教学医院泉州市妇幼保健院产前诊断中心　362000)



CLIA技术在新生儿TORCH感染检测中的应用研究

王俊育，王元白，张娜，黄宝加

(福建医科大学教学医院泉州市妇幼保健院产前诊断中心362000)

目的探讨化学发光免疫分析(CLIA)技术检测新生儿TORCH特异性抗体的临床意义，为相关疾病预防和临床诊断提供参考依据。 方法采用CLIA技术检测5 506例新生儿血清中TORCH特异性IgM抗体。结果受检新生儿 TORCH-IgM 总阳性率为7.3%，其中弓形体(TOX)、风疹病毒(RUB)、巨细胞病毒(CMV)、单纯疱疹病毒(HSV)感染率分别为0.18%、1.43%、5.41%、0.54%；不同疾病在402例TORCH-IgM阳性的新生儿中所占构成比不同，其中以高胆红素血症所占构成比最高，为48.51%。结论在新生儿感染性疾病中TORCH感染不容忽视，其中以CMV感染最为普遍，主要症状为高胆红素血症。由于TORCH病原体感染多缺乏典型症状，应采用CLIA技术对新生儿开展全面的TORCH特异性抗体检测，对治疗或保健有重大意义。

TORCH感染；化学发光免疫分析；新生儿

“TORCH”是Nahmias于1971年提出的，是一组易引起胎儿、新生儿和婴幼儿急慢性感染和小儿致畸、致残的重要病原体。其中T代表弓形体(TOX)，R代表风疹病毒(RUB)，C代表巨细胞病毒(CMV)，H代表单纯疱疹病毒(HSV)，O为其他病原体(others)，如EB病毒、人类免疫缺陷病毒(HIV)和人细小病毒B19等。因为新生儿TORCH感染早期临床表现不典型，易引起误诊而延误治疗，所以实验室检测TORCH具有重要价值[1]。为探讨化学发光免疫分析法(CLIA)检测TORCH特异性IgM抗体的应用价值和临床意义，本研究采用CLIA技术检测5 506例新生儿血清中TORCH特异性IgM抗体，现将本次实验室数据分析如下。

1　资料与方法

1.1一般资料选择泉州市妇幼保健院2015年1～12月收治入院的新生儿5 506例为研究对象。

1．2仪器与试剂意大利DiaSorin公司LIAISON全自动化学发光免疫分析仪及相应配套TORCH-IgM检测试剂及质控品。

1．3方法对所有研究对象取样采集静脉血3 mL于非抗凝真空管内，待完全凝集后，3 000 r/min离心10 min分离血清待检，试验从采集全血到测出数据需在3 d内进行，以保证数据的准确性。采用CLIA检测血清中TOX、RUB、CMV、HSV(1+2型)特异性IgM抗体，操作步骤严格遵照仪器操作规程和试剂盒说明书进行，所有试剂均在有效期内使用，试剂的定标和质控均符合要求。

1.4结果判定标准阳性结果判定：TOX-IgM>8 AU/mL；RUB-IgM>25 AU/mL； CMV-IgM>22 U/mL；HSV(1+2型)-IgM>1.1 Index者为阳性。

1．5统计学处理 采用统计软件SPSS17.0对实验数据进行分析，计数资料以率表示，组间比较采用χ2检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

2　结　　果

2．1新生儿TORCH特异性抗体IgM检测结果5 506例受检新生儿中TORCH特异性IgM抗体阳性402例，总的阳性率是7.3%。402例阳性病例中有15例患儿同时感染2种病原体，1例同时感染3种病原体。TOX、RUB、CMV、HSV(1+2型)特异性IgM抗体阳性率依次为0.18%、1.43%、5.41%、0.54%，CMV的特异性IgM阳性率远高于TOX、RUB、HSV(1+2型)，差异有统计学意义(P<0.05)，见表1。

表1　　新生儿TORCH特异性IgM抗体检测结果

注：*阳性病例中有15例患儿同时感染2种病原体，1例同时感染3种病原体。

2.2402例TORCH感染新生儿疾病构成情况不同疾病在402例TORCH-IgM阳性的新生儿中的构成比不同，其中以高胆红素血症所占比例最高，为48.51%，其次是心功能异常。新生儿高胆红素血症与其他疾病相比，检出率差异有统计学意义(P<0.05)，见表2。

表2　　402例新生儿TORCH病毒感染中不同疾病构成情况

3　讨　　论

TORCH感染在世界范围内流行，感染率因当地经济、文化、环境不同而有所差别[2]。新生儿相关临床症状的轻重、感染范围的大小，与宫内接触病原体的时间及接触量的多少密切相关[3]。

新生儿TORCH感染后可引起急性病毒感染，严重时可发生多器官功能受损[4]。主要为听力异常、高胆红素血症、肝功能异常、神经系统损伤、心肌损伤、血小板减少、先天性心脏病等[5]。因此TORCH特异性抗体的检测在临床中越来越受到人们的重视。

本研究表明TORCH是在本院就诊的患儿中感染性疾病重要的病原体，约占7.3%(其中CMV-IgM 5.41%，RUB-IgM 1.43%，HSV-IgM 0.54%，TOX-IgM 0.18%)。4种病原体中，CMV-IgM阳性率显著高于其他几种病原体，说明新生儿中TORCH感染最常见的是CMV感染，其次是RUB。TORCH感染分布情况是从高到低依次是CMV>RUB>HSV>TOX，与其他地区的情况有所不同[6]，说明TORCH感染有区域差异。

TOX病是一种常见的胎儿宫内感染性疾病，TOX感染可出现典型的三大临床表现，即脑积水，脑内钙化和视网膜脉络炎。本研究中TOX-IgM阳性率为0.18%，阳性率最低，可能与本市优生优育宣传工作有一定关系，这也说明避免不良接触史，改变不良的生活习惯可以明显降低TOX在人群中的感染率。但TOX是TORCH 病原体中唯一的人畜共患传染病，人群大多呈隐性感染，且感染后多无临床症状，须通过检测血清特异性抗体来发现。近年来，随着人类饲养宠物的增多，感染率有上升的趋势[7]。

RUB感染是经呼吸道传播，人群对该病毒普遍易感，临床症状轻微，预后良好，是易被忽视的急性病毒传染病，但孕妇早孕期感染后，病毒可通过血液、胎盘屏障、羊水等感染胎儿，引起流产、早产、先天性风疹综合征(CRS)。CRS有三大主症，即先天性白内障、心脏畸形和先天性耳聋。本研究中RUB检出率略低，为1.43%，可能是由于近些年来风疹疫苗的广泛应用以及成年人群因RUB感染史而获得的自然免疫力，使新生儿中RUB感染率已经大大降低。

CMV先天感染是引起新生儿疾病和先天畸形的重要感染因素之一，发生率占全部活产新生儿的1%[8]。CMV先天感染可引起先天性巨结肠、肝脾肿大、持续性黄疸、皮肤淤点、小头畸形、脉络膜视网膜炎、智力低下、运动障碍、耳聋等，上述任何一项表现都可单独存在，也可多器官、多系统病变，危害巨大。因出生时仅有小部分患儿有临床症状，故多数不能确定诊断。新生儿CMV感染与母亲密切相关，母婴之间主要通过3种途径传播：宫内感染、经产道感染及经母乳传播，宫内感染是主要因素，妊娠妇女早孕期感染CMV对胎儿影响更严重[9]。本研究结果显示CMV-IgM阳性率最高，为5.41%，与文献中认为CMV为新生儿宫内感染最常见病原体的报道一致[10]，应加强对孕产妇的CMV感染筛查。

HSV感染在胚胎中比较少见，大多数新生儿为HSVⅡ型感染，是分娩时胎儿经产道而受感染，经产道感染的新生儿表现为全身播散性，肝、脑、肺、肾等多器官同时受累，也可局限于皮肤、眼部或口腔，可导致新生儿疱疹性皮疹、视网膜脉络膜炎、小头畸形、颅内播散性钙化、出现单纯疱疹脑膜炎时有明显颅内压升高、频繁而不易控制的抽搐，病死率及后遗症都较高。在本研究中，有25例新生儿HSV感染，其中大部分在分娩过程中感染，很少经胎盘或血行感染，因此在孕后期检测HSV抗体，可以有效避免此类疾病在新生儿的发生。

本研究中结果显示，不同疾病在TORCH-IgM阳性的新生儿中所占构成比不同，其中以高胆红素血症最多见，为48.51%，目前研究表明新生儿感染TORCH病毒后，会诱发体内肿瘤坏死因子-α释放和抑制葡萄糖醛酸转移酶活性，从而损伤新生儿肝脏，造成胆汁转运排泌受阻，引起胆汁淤积，最终导致新生儿高胆红素血症发生[11]。

由于TORCH后临床症状不是很典型，其诊断方式仍需依靠实验室检查，目前诊断TORCH感染的方法主要为聚合酶链反应(PCR)、血清学检测和病原体分离培养等方法。PCR灵敏度、特异度较高，但对实验平台要求较高，无法广泛推广；病毒分离准确率最高，但费时费力，临床推广较难；血清学检测相对较简单易行，已在临床工作中广泛推广。本研究采用CLIA 技术检测TORCH特异性抗体，此方法采用磁微粒子包被方法，提高检测灵敏度，减少人为因素的影响，结果快速、准确[12]，是一种比较可靠、易于推广的TORCH 感染筛查的检测方法。

通过对本院新生儿TORCH特异性IgM抗体检测结果和相关疾病的分析，表明TORCH感染情况不容乐观，今后在新生儿感染性疾病的诊治过程中应重视TORCH感染的血清学筛查，对出现上述临床症状而又不明原因者，应及时采用CLIA技术检测TORCH特异性抗体，以便早干预、早治疗。因此TORCH感染的血清学筛查对新生儿保健具有重要现实意义，临床上应常规开展基于CLIA技术的TORCH血清学定量检测。

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10.3969/j.issn.1673-4130.2016.16.040

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1673-4130(2016)16-2304-03

2016-01-21

2016-03-27)