雌激素受体、孕激素受体及原癌基因Her-2在肺腺癌中的表达

2016-09-12秦文婧张双林河南大学第一附属医院呼吸内科河南开封475000

中国现代医生 2016年12期

秦文婧　张双林河南大学第一附属医院呼吸内科，河南开封　475000

秦文婧张双林
河南大学第一附属医院呼吸内科，河南开封475000

目的探讨雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）及原癌基因Her-2（C-erbB-2）在肺腺癌发生发展过程中的作用。方法选择2013年3月～2015年2月在我院手术治疗的肺腺癌患者组织切块60例为研究对象。分析不同性别、年龄、分化程度、临床分期患者肺腺癌中ER、PR及C-erbB-2的表达，分析肺腺癌患者组织中C-erbB-2的表达与ER、PR表达的相关性，分析骨转移患者与无骨转移患者肺腺癌组织中ER、PR、C-erbB-2的表达。结果 60例患者，14例ER阳性表达，占23.3%，13例PR阳性，占21.7%，6例C-erbB-2阳性，占10.0%。分化程度越低的患者ER阳性率及C-erbB-2阳性率越高（P＜0.05）。不同性别、临床分期肺腺癌患者组织中ER、PR及C-erbB-2表达无差异（P＞0.05）。相关性分析：C-erbB-2与ER表达呈显著正相关的关系（r=0.461），C-erbB-2表达与PR呈正相关（r=0.326）；C-erbB-2与ER及PR均为阳性呈显著正相关的关系（r=0.329），ER与PR表达无相关性（r=0.081）。骨转移患者与无骨转移患者肺腺癌组织中ER、PR及C-erbB-2表达无差异（P＞0.05）。结论肺腺癌中均可表达一定程度的雌激素受体、孕激素受体及原癌基因Her-2水平。

雌激素受体；孕激素受体；原癌基因Her-2；肺腺癌

[Abstract]Objective To discuss expression of ER，PR and C-erbB-2 with lung adenocarcinoma.Methods Diced tissues of 60 cases with lung adenocarcinoma from Mar 2013 to Feb 2015 were selected.ER，PR and C-erbB-2 levels in patients of different sex，age，degree of differentiation，clinical stage were analyzed.Association of C-erbB-2 expression with ER and PR was analyzed.ER，PR and C-erbB-2 levels in patients with bone metastases and non bone metastasis were analyzed.Results In 60 cases，ER positive expression in 14 cases，accounted for 23.3%，13 cases of PR positive，accounted for 21.7%，and 6 cases of C-erbB-2 positive，accounted for 10%.ER and C-erbB-2 positive rates in patients with the lower the degree of differentiation were higher（P＜0.05）.ER，PR and C-erbB-2 positive rates in patients with different sex，there was no significant difference in the clinical stage（P＞0.05）.C-erbB-2 and ER expression was significantly positive correlation relationship（r=0.461），C-erbB-2 expression and PR were positively correlated（r=0.326）;C-erbB-2，ER and PR were positive significant positive correlation relationship（r=0.329），ER and PR expression no correlation（r=0.081）.ER，PR and C-erbB-2 expressions showed no significant difference in patients with bone metastases and non bone metastasis（P＞0.05）.Conclusion ER，PR and C-erbB-2 express in lung adenocarcinoma.

[Key words]ER;PR;C-erbB-2;Lung adenocarcinoma

近年来内分泌治疗肿瘤取得了较大的进展，相关研究也越来越多，尤其是前列腺癌、乳腺癌等内分泌相关癌症。有学者报道肺癌组织中存在雌激素受体（estrogen receptor，ER）、孕激素受体（progesterone receptor，PR），随后这种结论由多种方法证实[1]。肺腺癌容易发生骨转移，而骨骼中雌激素受体高表达，且两者之间可能存在一定的相关性。孕激素是雌激素的调控基因产物，反映了雌激素的功能及活性，而原癌基因Her-2（Proto-oncogene HER-2，C-erbB-2）是与雌激素受体表达相关受体，与肺癌的预后相关[2，3]。本研究分析肺腺癌患者ER、PR及C-erbB-2表达，现报道如下。

1　资料与方法

1.1一般资料

选择2013年3月～2015年2月在我院手术治疗的肺腺癌患者的组织切块60例为研究对象。纳入标准：手术治疗，术后病理确认，标本石蜡固定；所有患者在手术前未接受放疗或者化疗治疗；临床资料及随访资料完整。排除标准：合并其他系统肿瘤，合并其他疾病，随访过程中因其他原因死亡。60例患者男39例，女21例，年龄37～77岁，平均（56.1±12.7）岁；其中Ⅰ期22例，Ⅱ期29例，Ⅲ期9例。随访：28例发生骨转移，其中男19例，女9例；32例患者未发生骨转移，其中男20例，女12例。

1.2方法

组织切块中ER、PR及C-erbB-2的表达检测采用免疫组化方法，试剂盒由上海抚生实业有限公司提供。操作严格按照说明书进行。石蜡切块制作为4～5 μm切片，脱蜡，梯度酒精水化，蒸馏水冲洗2次，随后PBS液冲洗3次，每次冲洗3 min，轻微震荡。进入浓度为0.01 mol/L，pH 6.0的枸橼酸盐内煮沸15 min。加53%过氧化氢，室温下孵育10 min，PBS冲洗，每次3 min，共3次。除去PBS，加1∶100的50 μL一抗，室温下孵育60 min，PBS冲洗，每次3 min，共3次。除去PBS，加即用型 Max Vision试剂50 μL，室温下孵育10 min，PBS冲洗，每次3 min，共3次。除去PBS，加DAB溶液100 μL，3~5 min后，自来水冲洗，苏木素复染，PBS冲洗，梯度浓度乙醇脱水，风干，二甲苯溶液过2 min，树胶封片。

1.3结果判断[4]

在光镜下随机选择10个高倍视野，计1000个细胞。核表达受体判断细胞核有黄棕色颗粒为阳性。每个高倍镜视野内，阳性细胞占0%~10%为阴性，11% ~33%为（+），34%~66%为（++），67%~100%为（+++）。膜表达受体判断细胞膜染色：阴性为无染色细胞；超过10%的癌细胞细胞膜染色，染色在细胞膜上间断分布，为环绕细胞膜为（+）；癌细胞细胞膜染色超过10%，染色强度为弱到中度，连续，环绕整个细胞膜为（++）；癌细胞细胞膜强度染色超过10%，连续，环绕整个包膜为（+++）。阴性为0-+；弱阳性为++，强阳性为+++。

1.4观察指标

分析肺腺癌患者ER、PR及C-erbB-2阳性情况，分析不同性别、分化程度、临床分期患者ER、PR及C-erbB-2的阳性表达。分析C-erbB-2阳性与ER、PR阳性表达的相关性。分析患者是否发生骨转移与ER、PR及C-erbB-2阳性表达的相关性。

1.5统计学方法

采用SPSS13.0统计学软件对数据进行分析。计数资料采用χ2检验，计量资料以均数±标准差表示，采用t检验。相关性分析采用Pearson相关分析。P＜0.05为差异有统计学意义。

表1　ER、PR及C-erbB-2在肺腺癌组织中的表达[n（%）]

2　结果

2.1ER、PR及C-erbB-2在肺腺癌组织中的表达

60例患者，14例ER阳性表达，占23.3%，13例PR阳性，占21.7%，6例C-erbB-2阳性，占10.0%。不同性别、年龄、临床分型、临床分期患者ER、PR及C-erbB-2阳性表达比较见表1。分化程度越低的患者ER阳性率及C-erbB-2阳性率越高（P＜0.05）。

2.2C-erbB-2在肺腺癌组织中的表达与ER及PR表达的相关性

相关性分析：C-erbB-2与ER表达呈显著正相关的关系（r=0.461），C-erbB-2表达与PR呈正相关（r= 0.326）；C-erbB-2与ER及PR均为阳性呈显著正相关的关系（r=0.329），ER与PR表达无相关性（r=0.081）。

2.3是否发生骨转移患者肺腺癌组织中ER、PR及C-erbB-2表达比较

见表2。骨转移患者与无骨转移患者肺腺癌组织中ER、PR及C-erbB-2表达无差异（P＞0.05）。

3　讨论

越来越多的研究证实，性激素参与了多种恶性肿瘤的发生及发展，包括子宫内膜癌、乳腺癌、前列腺癌，性激素具有促癌作用。近来的研究显示，性激素受体也广泛存在肺癌组织中。性激素具有调节肺细胞分化、成熟的作用，同时肺癌组织中雌激素受体、孕激素受体高表达导致肺癌组织内分泌环境发生变化。另外肺癌细胞在癌变过程中，可能启动了雌激素受体及孕激素受体的蛋白合成基因，合成受体蛋白[5，6]。雌激素与雌激素受体结合发挥生理效应。既往认为ER是一种配体依赖性转录激活因子，近年来的研究显示，在没有配体的情况下，ER也会与其他细胞信号传导通路发生作用，即配体非依赖性激活，包括其磷酸化，其与生长因子、孕激素受体、癌基因/抑癌基因蛋白等通路的相互作用，从而参与靶细胞的分化、增生、正常生理功能维持的调节，并且雌激素相关肿瘤发病以及对雌激素拮抗剂药物耐药等与ER的这些作用有关[7-9]。雌激素是乳腺癌的生物学标志物，是目前用于比较可靠的治疗、判断乳腺癌预后的指标[10，11]。研究显示乳腺癌ER呈阳性的组中，ERαmRNA水平呈高表达，且ERα基因突变率高，这些变化导致雌激素受体对雌激素的敏感性显著增加，从而促使细胞增殖，诱发癌症的发生[12，13]。也有学者研究，结肠癌、直肠癌中ER的表达水平也显著升高，尤其是进展期的结肠癌及直肠癌，其水平高于早期，并且同时表达ER及PR的患者生存期缩短，因此认为雌激素受体及孕激素受体的表达与恶性肿瘤的进展具有相关性[14]。

表2　是否发生骨转移患者肺腺癌组织中ER、PR及C-erbB-2阳性表达比较[n（%）]

肺腺癌（lung adenocarcinoma）是肺癌的一种，属于非小细胞癌。不同于鳞状细胞肺癌，肺腺癌较容易发生于女性及不抽烟者[15]。起源于支气管黏膜上皮，少数起源于大支气管的黏液腺。发病率比鳞癌和未分化癌低，发病年龄较小，女性相对多见。多数腺癌起源于较小的支气管，为周围型肺癌。早期一般没有明显的临床症状，往往在胸部X线检查时被发现。表现为圆形或椭圆形肿块，一般生长较慢，但有时早期即发生血行转移。淋巴转移则发生较晚。在本次研究中，肺腺癌组织均有不同程度的ER、PR表达，提示肺腺癌为内分泌相关的恶性肿瘤。在不同性别、临床分期的肺腺癌组织中ER、PR表达没有显著差异。但是ER表达与肿瘤细胞的分化程度具有一定的相关性，对于低分化及中分化的腺癌，ER的表达更高。但是PR的表达与肺腺癌分化程度没有明显的相关性，不同分化程度的肺腺癌PR的表达相似。目前的研究显示，ER、PR在不同的肿瘤组织中与临床分期、病理分型、分化程度等的相关性不同。目前的研究显示性激素与肺癌的关系具有两方面性，一方面具有抑癌的作用，一方面也有致癌的作用。机体内的激素环境失衡，无论过多或者减少，都是导致癌症发生的诱因。性激素本身不致癌，但是其能够促进靶细胞增殖，导致致癌物质更容易发生作用，启动致癌过程。性激素也有促催化剂作用，促进癌细胞起始阶段的增殖，还能够促使癌细胞的迅速增殖。在本次研究中C-erbB-2在肺腺癌中的阳性表达率为10.0%。研究显示，C-erbB-2阳性表达提示肺腺癌的恶性程度较高。本研究发现低分化腺癌的阳性率更高，提示患者预后较差。另外本研究还提示，发生骨转移患者与未发生骨转移的患者ER、PR及C-erbB-2的阳性率比较差异无统计学意义。

综上所述，肺腺癌组织中ER、PR及C-erbB-2均有一定程度的表达，说明肺腺癌是内分泌相关肿瘤，内分泌靶向治疗可以作为今后研究的方向之一。

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