自拟催乳汤对溴隐亭致大鼠产后缺乳的治疗效果观察

董世起,李欢欢,卞艺斐,范迎赛,Naw rasHamdan,王婷婷,高宗勤,范开,刘钟杰

(中国农业大学动物医学院,北京海淀100193)

自拟催乳汤对溴隐亭致大鼠产后缺乳的治疗效果观察

董世起,李欢欢,卞艺斐,范迎赛,Naw rasHamdan,王婷婷,高宗勤,范开,刘钟杰

(中国农业大学动物医学院,北京海淀100193)

本试验旨在观察自拟催乳汤对大鼠产后缺乳模型的效果.采用溴隐亭灌胃SD大鼠方法建立缺乳模型,同时用自拟的催乳汤灌胃进行治疗,通过观察母鼠每小时泌乳量、仔鼠每窝净增重、母鼠乳腺湿重等方面的变化,评价自拟催乳汤对产后缺乳的治疗效果.结果发现,自拟催乳汤能极显著提高母鼠每小时泌乳量(P<0.01)、显著提高仔鼠每窝净增重(P<0.05),显著提高母鼠乳腺湿重(P<0.05),同时方剂治疗组和空白对照组相关数据也具有显著差异性.证明自拟催乳汤可以显著提高泌乳量,维持产后缺乳母鼠乳腺的结构,对产后缺乳具有治疗作用,但其治疗效果还需进一步的观察和优化改进.

产后缺乳;溴隐亭;方剂;催乳汤

如果在母畜分娩后出现乳汁不足或无乳,仔畜因吃不到乳汁而表现饥饿、逐渐消瘦,如不及时采取治疗措施,往往导致仔畜最终死亡[1-2].因此本病的防治可以提高仔畜的存活率,而对产后缺乳症开发新的治疗药物,具有巨大的应用前景和经济效益[3].本研究尝试根据传统中医理论[4],以调理气血,通络下乳为主要原则自主拟定方剂[5],尝试探索治疗产后缺乳的新药.

1　材料与方法

1.1试验材料

1.1.1试验药品甲磺酸溴隐亭片,由匈牙利吉瑞大药厂生产,生产批号:T33129A;方剂所需中药药材均购自北京同仁堂大药房马连洼店;实验用SD大鼠由北京军事医学科学院实验动物中心提供,合格证号:SCXK(军)2012-0004,所有SD大鼠均为SPF级,体重范围为215 g～235 g.

1.1.2催乳汤制备本研究自拟的催乳汤由黄芪、党参、当归、王不留行、白术、甘草等组成.用电子天平分别称取所需中药药材放于陶瓷煎药罐中,加入药重量10倍体积的蒸馏水,浸泡30 min后大火煮沸再调至小火煎煮30 min,将药液用8层脱脂细纱布过滤到大烧杯中后第2次加入8倍药量体积的蒸馏水,直接大火煮沸后再调至小火煎煮20 min后,将药液用8层脱脂细纱布过滤倒出,合并两次过滤药液,用24层脱脂细纱布过滤,过滤后用双层分析滤纸加压过滤,最后收集药液的过滤液用旋转蒸发仪减压浓缩至生药浓度1 g/m L,4℃保存待用.

1.1.3溴隐亭溶液配制取甲磺酸溴隐亭片(2.5 mg)32片置于棕色试剂瓶中,量取100 mL烧开后冷却至室温的蒸馏水,充分溶解即制得0.8 mg/mL的溴隐亭药液,4℃避光保存备用.

1.2试验方法

1.2.1实验动物分组及给药将未经产SD母鼠和公鼠按照3∶1比例自然配种,分娩后随机将母鼠分成3组,每组母鼠10只,调整每只母鼠带仔鼠12只.3组分别做为空白对照组、缺乳对照组和汤剂治疗组.每天早晚对各组母鼠按以下药量灌胃:空白对照组:2 mL蒸馏水,分两次1 mL进行灌胃;汤剂治疗组:1 mL溴隐亭溶液+1 mL催乳汤;缺乳对照组:1 mL溴隐亭溶液+1 mL蒸馏水.

1.2.2试验结果记录每天早晨灌胃给药2 h后,将母鼠和仔鼠进行分离,称量每窝仔鼠的总重,记为W1;仔鼠和母鼠隔离4 h后,再次称量每窝小鼠的总重,记为W2;哺乳1 h后第3次称量每窝仔鼠的总重,记为W 3.连续7 d称量仔鼠的重量,第7天称重结束后将母鼠处死,称量并记录母鼠腹部两侧乳腺的总重量.母鼠每天每小时泌乳量为:W3-W2+(W1-W2)/4;仔鼠每窝净增重为:W3(Ⅹ)-W 1(Ⅰ),其中,W3(Ⅹ)是最后1天的仔鼠窝总重W 3,W1(Ⅰ)是第1天的仔鼠窝总重W 1.缺乳对照组在试验后期有母鼠出现仔鼠全窝死亡,记该母鼠每小时泌乳量为0,窝净增重为0.

1.3结果处理对获得的各组数据,使用IBM SPSS Statistics 20版软件进行单因素方差分析,多重比较时,如果方差齐则采用LSD法,如果方差不齐则采用Tamhane法,以P<0.05认为差异具有统计学意义[6].试验结果用平均值±标准差(X±s)表示(小数点后保留两位有效数字).

2　试验结果与分析

2.1母鼠每小时泌乳量比较如表1、图1所示,汤剂治疗组的每小时泌乳量比缺乳对照组高,但低于空白对照组.对于各组间比较的统计学结果显示,与空白对照组相比,缺乳对照组和汤剂治疗组在前两日的每小时泌乳量均不具有差异性,缺乳对照组的每小时泌乳量在第3天极显著性降低(P<0.01),而汤剂治疗组的每小时泌乳量在第3天出现显著性降低(P<0.05),到第5天才出现极显著性降低(P<0.01);与缺乳对照组相比,汤剂治疗组的每小时泌乳量在第5天出现了显著性升高(P<0.05),在第6天就出现极显著性升高(P<0.01).而对于各组内,空白组自第3天起每小时泌乳量不再线性增加,而是保持稳定,略有增加;缺乳对照组的每小时泌乳量自第3天起急剧下降,到第7天的时候每小时泌乳量极小,母鼠泌乳几乎停止;汤剂治疗组的母鼠每小时泌乳量在第3天略有下降,此后保持稳定,略有下降后呈上升趋势.由于溴隐亭的作用是抑制催乳素的分泌,而催乳素的作用则是启动和维持泌乳,因此,本试验的自拟催乳汤可以促进催乳素的分泌,对抗溴隐亭的抑制作用,并且其促进作用具有稳定性.

表1　母鼠每小时泌乳量

2.2仔鼠每窝净增重比较对各组母鼠的仔鼠每窝净增重分析如表2,汤剂治疗组的仔鼠每窝净增重比缺乳对照组高,但低于空白对照组.统计学结果显示,与空白对照组相比,汤剂治疗组和缺乳对照组的仔鼠每窝净增重均极显著性的降低(P<0.01);与缺乳对照组相比,汤剂治疗组的仔鼠每窝净增重具有显著性增高(P<0.05).

图1　母鼠每小时泌乳量C:空白对照组;T:汤剂治疗组;M:缺乳对照组

2.3母鼠乳腺(腹部)重量对各组母鼠的乳腺(腹部)重量分析,如表3,汤剂治疗组的母鼠乳腺(腹部)重量比缺乳对照组高,但低于空白对照组.统计学结果显示,与空白对照组相比,汤剂治疗组和缺乳对照组的乳腺(腹部)重量均极显著性降低(P<0.01);与缺乳对照组相比,汤剂治疗组的母鼠乳腺(腹部)重量具有显著性增加(P< 0.05).

表2　仔鼠每窝净增重

表3　母鼠乳腺(腹部)重量

3　讨论

母鼠泌乳的调节是催乳素依存型调节,乳腺组织在催乳素的作用下分泌乳汁并排入乳腺管内[7].溴隐亭可以降低催乳素的分泌,阻止和减少乳汁的分泌[8],因此单纯灌服溴隐亭的缺乳对照组,其每小时泌乳量在第3天与空白对照组出现了显著性差异,并且从第3天起每小时泌乳量持续急剧降低,缺乳对照组的仔鼠也由于母鼠乳汁分泌不足而生长严重不足,每窝净增重与空白对照组相比极显著性降低,说明用甲磺酸溴隐亭片制备溴隐亭药液经口灌服获得了差异性极显著的产后缺乳大鼠模型.催乳素在哺乳期能够维持乳腺的发育结构,催乳素分泌不足会导致母鼠在孕期发育成熟的乳腺结构退化.缺乳对照组母鼠的泌乳量随给药天数急剧降低,第7天的乳腺重量也和空白对照组有了显著性差异,有效证明了溴隐亭抑制母鼠催乳素分泌的作用,引起了缺乳对照组的乳腺退化.具体的乳腺结构和乳腺中的催乳素分布变化,还需要通过免疫组化等研究方法进一步研究.

中医认为乳汁是由气血津液化生,资于冲任,乳汁减少或不足是由于气血亏虚、津液不足或因乳脉不行而致[1].而分娩则会导致母畜气血亏损,津液丢失,而应激或者环境的影响又往往导致母畜经脉淤壅,乳血滞行,所以产后缺乳的治疗临床上以调理气血,通络下乳为主.本研究中拟定的汤剂中黄芪、党参、当归等是补益气血的药物,王不留行是疏经解郁,通络下乳的常用药物,因此在方剂中各味药物的综合作用下,汤剂治疗组母鼠的每小时泌乳量在第3天略有下降后保持稳定,并逐渐呈上升趋势,出现此种情况可能是由于溴隐亭的抑制泌乳作用直接作用于垂体,见效快,而中药的调理和通络下乳治疗则在于综合调整机体的生理状态,因此产生临床可见效果的时间会比溴隐亭较长,因此出现了汤剂治疗组的母鼠每小时泌乳量先降后升的变化情况.而汤剂治疗组的每小时泌乳量在第3天和空白对照组相比出现显著性降低,到第5天才出现极显著性降低,随后的差异性开始呈下降趋势,也说明了本研究中的催乳汤剂可以增加乳汁的分泌,但由于中药的药效显现需要时间,本研究是在7 d内进行,所以更多天数的作用效果和影响还需要进一步的研究论证.

溴隐亭的化学名称为2-溴-α麦角环肽,是一种单成分化学合成物,可以直接激活多巴胺受体而产生作用[8],而中药汤剂的治疗作用则多是通过多组分调整恢复机体平衡,增强机体部分器官或者组织的机能来达到治疗恢复,因此汤剂治疗组和空白对照组的差异性提醒我们要关注中药方剂治疗的药效时间问题,并提醒我们应参考现代化学药的研究思路对传统中药治疗进行成分研究和现代化研究.

4　结论

本试验中自拟的催乳汤具有显著促进乳汁的分泌和排泄,提高缺乳母鼠泌乳量的功能,能够用于产后缺乳证的治疗;但其用于产后缺乳证的治疗效果还需要进一步观察.

[1]花丽茹.中草药在治疗母猪产后疾病的应用[J].养殖技术顾问,2010(7):113-114.

[2]万鹏,聂慧,邓时贵.归芪通乳合剂对溴隐亭诱导大鼠产后缺乳的催乳作用[J].中药新药与临床药理,2013(1):42-44.

[3]张明海,张虹虹.母猪产后缺乳症的防治办法[J].今日养猪业,2012(1):22-24.

[4]杨小红,杜静,王玉强,等.缺乳的中医药治疗现状[J].中国中医药现代远程教育,2010(6):175-176.

[5]毛成荣.辩证施治母猪产后缺乳[J].山东畜牧兽医,2011 (1):69-70.

[6]黄波.尼古丁对敲除小鼠调节性细胞及对人脐静脉内皮细胞凋亡的影响[D].广州:南方医科大学,2012.

[7]唐立刚.激动素对大鼠乳腺的作用及相关机制研究[D].杨凌:西北农林科技大学,2012.

[8]马爱团,钟秀会,孟立根,等.溴隐亭对小鼠生育的影响及其作用机理[J].动物学,2006(3):536-541.

Observation on the Effect of self-made lactogenic decoction on Postpartum Hypogalactia Rats Induced by Bromocriptine

DONG Shi-qi,LI Huan-huan,BIAN Yi-fei,FAN Ying-sai,Nawras Hamdan, WANG Ting-ting,GAO Zong-qin,FAN Kai,LIU Zhong-jie
(College Of Veterinary Medicine,China Agricultural University,Beijing 100193,China)

The object is to observe the effect of self-made lactogenic decoction on model rats with postpartum hypogalactia. SD rats were given bromocriptine by gavage to establish the hypogalactia model,and were treated with self-made lactogenic decoc⁃tion.And then,the changes of maternal milk production per hour,weight increment of rat pups per nest,maternal galactophore(ab⁃domen)weight were observed to evaluate the effect of self-made lactogenic decoction on postpartum hypogalactia.It was found that Self-made lactogenic decoction could significantly increase the amount of maternal milk production per hour(P<0.01),improve weight increment of rat pups per nest(P<0.05),increased maternal galactophore(abdomen)weight(P<0.05),at the same time the related data between treatment group and blank control group also has significant difference.Conclusion was that Self-made lacto⁃genic Decoction can significantly improve maternal milk production,reduce the degradation of galactophore in mothers with hypo⁃galactia,and has a therapeutic effect on postpartum hypogalactia,but the effect still needs further observation and improvement with optim ization.

Postpartum hypogalactia;Bromocriptine;Prescription;Lactogenic decoction

LIU Zhong-jie

R 271.44

A

0529-6005(2016)02-0053-03

2014-05-28

"十二五"国家科技支撑计划重点课题"防治母猪胎产病与提高免疫力中兽药创制"(2011BAD34B02-02)

董世起(1986-),男,博士,从事中兽药方剂研究, E-mail:dsq@cau.edu.cn

李欢欢(1988-),女,硕士,从事中兽药方剂研究,E-mail: 1HH198861@163.com

注:李欢欢与董世起对本文具有同等贡献

刘钟杰,E-mai:liuzhongjiecau@163.com