芪红散对慢性心衰大鼠BNP及ET-1水平的影响

王　东, 刘　江, 王晓峰

(新疆医科大学附属中医医院VIP病房, 乌鲁木齐　830000)



芪红散对慢性心衰大鼠BNP及ET-1水平的影响

王东, 刘江, 王晓峰

(新疆医科大学附属中医医院VIP病房, 乌鲁木齐830000)

目的探讨芪红散对慢性心衰大鼠血浆中脑钠肽(brain natriuretic peptide，BNP)及内皮素(Endothelin-1，ET-1)水平的影响。方法选用健康雄性SD大鼠，采用腹主动脉结扎法，建立慢性心衰动物模型。将造模成功的大鼠随机分成5组：假手术组、模型组、阳性药物组、芪红散低剂量组和芪红散高剂量组，每组10只。正常喂养及喂药4 w后，使用多普勒超声心动图测定各组大鼠心功能，采用ELA 法测定各组血浆中BNP 的含量；采用放免法测定各组血清中ET-1的含量。结果芪红散低剂量组、芪红散高剂量组、阳性药物组心功能较模型组明显提高(P<0.01～0.05)；芪红散低剂量组、芪红散高剂量组、阳性药物组血浆中BNP及ET-1的含量较模型组明显下降(P<0.01～0.05)。结论芪红散可以降低血浆中BNP及ET-1水平，改善心功能，减轻心力衰竭症状。

芪红散； 慢性心衰； 脑钠肽； 内皮素

Urumqi830000,China)

慢性心力衰竭(chronic heart failure，CHF)简称心衰，是一种由各种心脏疾病导致心功能不全的复杂的临床综合征，是各种心血管疾病终末阶段的临床表现，同时也是所有心血管疾病的最终归宿[1]。CHF的发病机制为心脏功能障碍，无法充分排出静脉回心血量，导致左心室扩张、神经内分泌紊乱，且常伴有心脏增大、心功能不全病症，对患者的生活质量造成严重影响[2]。近年来，CHF发病率和病死率也呈明显上升趋势[3]。本实验通过复制CHF动物模型, 观察该模型血浆脑钠肽(BNP)、内皮素( ET)水平的变化 , 从细胞因子水平探讨芪红散对实验性 CHF 大鼠的作用机制,为中医药治疗心力衰竭提供新的思路。

1　资料与方法

1.1仪器与材料

1.1.1仪器与试剂 哺乳类动物手术器械 ( 手术刀、组织剪、有齿镊、止血钳、12号灌胃针、5 mL注射器、4号头皮针), MSE-25 型高速冷冻离心机(上海安亭科学仪器厂),低温冰箱、电子秤 (湖南仪器仪表总厂天平厂) ，VEvo2100彩色多普勒超声心动图(由VisualSonics Inc公司生产)。脑钠素试剂盒(上海贝西公司),内皮素-1放射免疫分析试剂盒(解放军总医院科技开发中心放免所)。

1.1.2实验动物健康雄性 SD大鼠(由新疆医科大学实验动物中心提供,合格证号:524426), 60 只,体质量250～300 g。

1.1.3药物芪红散由黄芪24 g、当归12 g、红景天9 g、桂枝12 g、丹参9 g、红花9 g、桃仁12 g、鸡血藤15 g、全栝蒌12 g、薤白9 g、郁金9 g、贝母9 g、葶苈子9 g 等组成(由新疆医科大学附属中医院制剂室制备, 生产批号：1012113)。实验时分别配制成浓度为 0.15 g /mL(低剂量) 和 0.30 g /mL(高剂量) 水溶液。卡托普利片(北京天惠参股份有限公司生产，批号:1206135)，蒸馏水稀释成0.2 mg /mL浓度,灭菌备用。

1.2实验方法

1.2.1造模方法参考Anversea等[4]的方法，在双肾动脉上方分离腹主动脉,沿腹主动脉平行置一直径为 0.7 mm 的小圆棒，用丝线绕腹主动脉和小圆棒一起结扎，随后抽出小圆棒,造成腹主动脉狭窄。造模后4 w进行血流动力学检测，鉴定慢性心衰模型成功与否，经多普勒超声心动图检测左室射血分数计算EF值≤60%为心衰，同时出现精神萎靡、毛色无光泽的大鼠列入观察对象。

1.2.2实验分组将60只大鼠随机分为 5 组，每组 12 只 ，所有动物均常规喂养。由于在造模过程中，技术不娴熟，造成部分大鼠死亡，最后共剩余50只大鼠。(1) 假手术组：手术时只分离动脉不造成动脉狭窄，手术4 w后，灌服蒸馏水，1次/d, 连续4 w；(2) 模型组: 造模 4 w后,灌服蒸馏水，1次/d,连续4 w; (3) 芪红散低剂量治疗组(低剂量组): 造模4 w后，灌服芪红散每日用药剂量为1.5 g/kg体质量(相当于成人剂量 10倍) , 1 次/d, 连续 4 w; (4) 芪红散高剂量治疗组( 高剂量组) : 造模 4 w后, 灌服芪红散每日用药剂量为 3.0 g/kg体质量(相当于成人剂量 20倍) ,1次/d,连续 4 w; (5) 阳性药卡托普利治疗：造模4 w后, 灌服卡托普利水溶液1.6 mg/kg体质量(相当于成人剂量20倍),1 次/d,连续 4 w。每次用药体积均按 1 mL/100 g 计算。

1.2.3各项指标的测量

1.2.3.1心衰大鼠心功能的测定动物造模分组饲养4 w后,由超声科医生为大鼠做彩色超声多普勒心动图,测定射血分数(LVEF)、左室收缩末容量(ESV)、左室舒张末容量(EDV)、左室每分搏出量(SV)。

1.2.3.2心衰大鼠血浆中BNP及ET-1的测定动物造模分组饲养4 w后，于最后1次给药禁食12 h后股动脉取血2 mL，注入试管中，摇匀，4℃、3 000 r/min离心10 min，取血浆置于-20℃保存，冷存待检。血浆 BNP 的测定采用 ELA 法；血浆ET-1的测定采用放免法，均严格按说明书操作,

2　结果

2.1芪红散对心衰大鼠心功能的影响模型组LVEF显著低于假手术组，提示造模成功；与模型组比较，芪红散低、高剂量组及阳性药物组LVEF、ESV、EDV、SV各项指标均有良好改善，差异有统计学意义(P<0.01～0.05)，芪红散低、高剂量组治疗效果较阳性药物组明显(P<0.05)，见表1。

表1　芪红散对心衰大鼠心功能的影响(±s)

注：与模型组比较，*P<0.05，**P<0.01； 与阳性药组比较，△P<0.05。

2.2芪红散对心衰大鼠血浆中BNP及ET-1水平的影响模型组血浆BNP、ET-1水平较假手术组显著升高。芪红散低、高剂量组血浆BNP、ET-1水平较模型组显著下降，差异有统计学意义(P<0.01～0.05)，芪红散高剂量组血浆BNP、ET-1水平较阳性药物组下降明显(P<0.05)，见表2。

组别nBNP(ng/mL)ET-1(pg/mL)假手术组10128.46±21.54*132.48±24.56*模型组10353.83±55.28285.04±28.31阳性药物组10190.87±36.29**183.39±32.16**芪红散低剂量组10203.51±39.85**194.33±30.16**芪红散高剂量组10178.35±30.62**△179.12±28.23**△

注：与模型组比较，*P<0.05，**P<0.01； 与阳性药物组比较，△P<0.05。

3　讨论

中医学将慢性心力衰竭归于“心水”、“喘证”、“水肿”等范畴，病属本虚标实。中医认为心衰的发生主要在于脏腑的损害，其病位在心，并与肺、脾、肾的功能紊乱有关，与气、血、水关系密切[5]。凡病至心衰，多为多脏器合而为病，中医的整体观念及辨证施治则具有其优势，治疗上可根据病人的具体情况予以辨证施治，或助心阳，或益脾气，或养气血，或滋肾阴，同时抓住扶正这一关键，调整脏腑的阴阳不足，使正气得复，阳气得壮，取得疗效[6-7]。因此，本研究在常规治疗基础上联合芪红散治疗CHF，以提高其疗效。

随着现代医学的不断发展，人们对CHF认识从单纯血流动力学的心脏收缩不良，发展为血流动力学异常与神经内分泌系统的激活相互作用才形成了心力衰竭证候群，临床对CHF治疗不仅局限于改善血流动力学，更重要的是兼顾到神经内分泌激活的干预和对心室重构的干预。大量研究表明，心脏神经激素内皮素、脑钠肽参与了CHF发生、发展的生理病理过程，对CHF的诊断、鉴别诊断、严重程度的判断及预后评估具有重要的意义[8-12]。

本研究应用芪红散治疗心衰大鼠，方中以黄芪为君大补脾胃之元气，使气旺以促血行，瘀祛络通化痰，改善患者胸闷、气短、胸痛、乏力等症状。予桂枝温通经络，温心阳，从而达到温通阳气、助膀胱气化，能达内外以温阳祛水；黄芪得桂枝，则补气与温阳相结合，则气行血运；桂枝得黄芪，加强温通经络及行水之功，则畏寒肢冷、咳痰、水肿等症状可缓解。红景天，为民族特色药材，具有扶正固本、调和阴阳作用，为气中之血药，补气养血，气为血之帅，气行则血行，气行则瘀祛络通，其可改善胸闷、气短、胸痛、乏力、心悸等症状。红花、丹参活血化瘀，使胸痛、心悸等症状得以改善；葶苈子、泽泻等药利水消肿化痰，使患者水肿、咳喘、咳痰等症状得以缓解。诸药配伍，共奏益气活血、温阳化痰利水之功效，则诸症缓解。本实验结果表明，芪红散能显著降低致心力衰竭大鼠血清BNP、ET-1水平，减少心衰大鼠的心肌张力,降低心脏前后负荷,减轻心室重构,，从而改善心功能，减轻心力衰竭症状,降低死亡率。

[1]Tariq G，Ahmad M，Felker N.Reply:applying cluster analysis to data of previously published chronic heart failure trials:systems biology and clinical phenotypes of heart failure syndrome[J].J Am Coll Cardiol，2015,65(12):1270-1271.

[2]Lei Z, Li YZ, Hong J, et al. Additional use of trimetazidine in patients with chronic heart failure: a meta-analysis[J]. J Am Coll Cardiol，2012, 62(9):913-922.

[3]黄峻.慢性心力衰竭的现状和中药治疗前景[J].中西医结合心脑血管病杂志,2015,8(1):1-2.

[4]Anversea P, Hagopian M, Alder V.Quantitative radioautographiclocalization of protein synthesis in experimental cardiac hypertrophy[J]. Lab Invest, 1973,29(3) : 282-284.

[5]Burrel LM，Chan R，Phillips PA，et al. Validation of Anechocardiographic assessment of cardiac functing fol. Lowing moderate size myocardial infarction in the rat [J].Clin Exp Pharmacol Physiol，1996,23(4):570-572.

[6]黄永生.心衰论治[J].湖南中医药导报, 2000, 6(9):31-35.

[7]王振涛, 朱明军,韩丽华.中药治疗心衰的动物实验研究[J].辽宁中医杂志, 2002;29(4):190-191.

[8]陈文垲,乔春华,方泰惠,等.仙附芪地强心口服液对实验性心衰血流动力学的影响[J].南京中医药大学学报,2000, 16(1):37-39.

[9]魏朝阳,漆波,王德荣,等. BNP监测指导慢性心衰患者早期应用β受体阻滞剂的临床价值[J].川北医学院学报,2013,28(2):117-120.

[10]刘奇峰,王笑宇,江珊.心力衰竭患者血浆N终端脑钠肽与心功能关系的研究[J].中国循环杂志, 2006, 21(3):172-174.

[11]韩琳，赵祥海，吴宜呜. 心功能Ⅲ、Ⅳ级慢性心衰患者血清CA1 25与NT Pro-BNP浓度相关性研究[J].中国循环杂志, 2006, 21(3):172-174.

[12]韩宝石,盖鲁粤.心血管系统内皮素B型受体研究进展[J].医学综述,2008, 14(12):1799-1801.

(本文编辑施洋)

Effect of Qi Hong San on BNP and ET-1 in chronic heart failure rats

WANG Dong, LIU Jiang, WANG Xiaofeng

(WardofVIP,AffiliatedTraditionalChineseMedicalHospital,XinjiangMedicalUniversity,

ObjectiveTo investigate the effect of Astragalus on plasma level of brain natriuretic peptide (BNP) and endothelin-1 (ET-1) in rats with chronic heart failure. MethodsThe animal model of chronic heart failure was established by abdominal aorta ligation in healthy male SD rats. The successful model rats were randomly divided into 5 groups: sham operated group, model group, positive drug group, low dose group and high dose group, 10 rats in each group. The rats were normally fed or fed the medicines in different groups for 4 weeks, then Doppler echocardiography was used to determination of heart function of rats in each group and the ELA method was used to determine the content of each group of plasma BNP. The content of ET-1 in serum was detected by RIA method. ResultsThe cardiac function in low dose group, high dose group and positive drug group was significantly higher than that in the model group (P<0.01～0.05). The content of BNP and ET-1 in plasma in low dose group , high dose group and positive drug group were significantly lower than that in model group (P<0.01～0.05). ConclusionQi Hong San can reduce the level of BNP and ET-1 in serum, improve heart function and reduce the symptoms of heart failure.

Qi Hong San； chronic heart failure； BNP； endothelin-1

新疆维吾尔自治区科技成果转化项目(201254126)

王东(1977 -),男，硕士,主治医师,研究方向:心衰的防治。

R541

A

1009-5551(2016)06-0721-03

10.3969/j.issn.1009-5551.2016.06.013

2015-8-4]