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豫南地区猪场猪高热病的调查分析与防控

2016-08-10强,王

信阳农林学院学报 2016年3期
关键词:防控措施调查分析猪场

陈 强,王 瑞

(1.信阳市动物疫病预防控制中心,河南 信阳 464000;2.信阳农林学院 牧医工程学院,河南 信阳 464000)



豫南地区猪场猪高热病的调查分析与防控

陈强1,王瑞2

(1.信阳市动物疫病预防控制中心,河南 信阳 464000;2.信阳农林学院 牧医工程学院,河南 信阳 464000)

摘要:调查了豫南地区数家猪场猪高热病的发生原因,对送检病例进行了分子生物学和细菌学实验室检测。结果表明,该地区猪场原发性疾病为多病原混合感染所致。

关键词:猪场;猪高热病;调查分析;防控措施

猪高热病又称猪无名高热综合症,是指以猪体温升高、皮肤发红和呼吸急促等临床症状为主要特征的猪病。从2006年5月在安徽、江西、浙江、湖南、湖北、江苏等省部分地区发生并命名为猪高热病[1]。2015年10月下旬以来,在河南省南部地区数家猪场发生疑似猪高热病现象,病程持续,病死率高,对猪场造成了较大的经济损失,现以接诊的三家不同规模化猪场为例,浅谈对此类疾病诊治的认识。

1发病经过

病例一 河南省信阳市潢川县某母猪存栏100头猪场,于2015年12月10日先从体重30斤左右仔猪开始发病,表现为发烧、喘气、采食下降,伴有跛行。同时产房仔猪有腹泻现象。育肥猪群出现喘气、卧地不起、一般发病3~5天后即可死亡,发病率在50%,死亡率在20%。

病例二 河南省驻马店市遂平县某存栏母猪200头猪场,于2015年12月17日出现体重在160~200斤猪只发烧、耳部和后驱发紫,呼吸困难,发病率在30%,死亡率在40%。

病例三 河南省南阳市唐河县某存栏母猪600头猪场,于2015年12月18日先从体重在100斤左右猪只发病,表现为高热不退,采食量下降50%,大群挤压在一起,个别皮肤发红、零星有流鼻涕。半个月内波及到3栋,前后损失有110头。

2免疫程序及治疗经过

发病场一 饲料添加替米考星和氟苯尼考。病猪单独使用氟苯尼考注射液。该场母猪猪瘟和伪狂犬及猪蓝耳病疫苗每年普免3次,商品猪猪瘟疫苗在21天和55~60天免疫,伪狂犬只在断奶时免疫1次。

发病场二 病猪注射头孢类药物及氟苯尼考。该场母猪免疫猪瘟、伪狂犬、蓝耳病疫苗,猪瘟跟胎免疫,其余按季度普免。商品猪猪瘟疫苗在21天和55~60天免疫,伪狂犬疫苗3天内滴鼻,猪瘟二免后间隔一周加强免疫一次。商品猪蓝耳疫苗在14日龄时免疫。

发病场三 大群使用清瘟败毒散、荆防败毒散、氟苯尼考。病猪使用清开灵注射液、头孢噻呋,该场母猪猪瘟、伪狂犬、猪蓝耳病疫苗每年普免3次。商品猪猪瘟疫苗在21天和55~60天免疫,伪狂犬在1日龄和35日龄免疫。商品猪圆环与蓝耳疫苗在14日龄同时免疫。

3病理剖检

发病场一:病死肥猪肺脏淤血,肺叶部分区域有紫红色实变区,气管内充斥粘液。

发病场二:肺尖叶、心叶、膈叶肉变。肺间质增宽、出血,脾脏卷曲,淋巴黄疸。

发病场三:肺脏大叶性肺炎,脾脏败血,淋巴结出血。

4病原体检测

4.1RT-PCR检测猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪瘟病毒

4.1.1引物的设计根据GenBank已发表的序列,应用PrimerPremier5. 0软件设计猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪瘟病毒引物。上游引物: 5’-CCTGCACCGCGTAGAACTG-3’,下游引物: 5’-GCGAAACGCCTGGTAAGC-3’。引物扩增特异性目的片段,出现540bp大小条带判断为 PRRSV经典株阳性,出现450bp大小带判断为PRRSV缺失株阳性。上游引物5’-CTCCCTGGGTGGTCTAAG-3’,下游引物: 5’-GGTTCCTCCACTCCCATTG-3’。出现290bp大小条带判断为 CSFV阳性。引物由上海生工公司合成。

4.1.2RNA的提取根据动物总RNA快速提取试剂盒(Trizol-离心株型)说明书操作。试剂购自上海捷瑞生物工程有限公司[2]。

4.1.3反转录程序RNA模板4μL,5*反转录缓冲液4μL,dNTP mix 2μL,反转录引物(CSFV-A和PRRSV-A混合物,均为10μM)2μL,反转录酶1μL,RNA酶抑制剂1μL。42℃ 45min。65℃ 5min,4℃ 10min。基因组RNA反转录试剂盒购自Thermo公司[2]。

4.1.4RT-PCR扩增体系2ⅹ MasterMix 12.5μL,PRRSV与CSFV上游和下游引物各0.5μL, DNA模板3μL, 无菌双蒸水7.5μL。95℃预变性5min,然后95℃变性30s,53℃ 退火30s,72℃延伸30s,35个循环后,72℃延伸10 min。2ⅹPower PCR MasterMix 购自北京百泰克生物技术公司[2]。

4.2PCR检测猪伪狂犬病毒

4.2.1引物的设计根据GenBank已发表的序列,应用PrimerPremier5. 0软件设计猪伪狂犬病毒引物。引物序列为:上游引物: 5’-ATGGGCATCGGCGACTACCT-3’;下游引物: 5’- GCGAGAAGAGCTGCGAGTGGA-3’。引物扩增特异性目的片段,出现270bp大小条带判断为 PRV阳性。引物由上海生工生物工程技术服务有限公司合成[2]。

4.2.2DNA的提取按伪狂犬病病毒DNA提取和纯化试剂盒说明书进行病料组织中DNA提取及纯化。试剂购自上海捷瑞生物工程有限公司。

4.2.3PCR扩增体系2ⅹMasterMix 12.5μL , PRV上游和下游引物各2μL, DNA模板8.5μL。95℃预变性5min,然后95℃变性30s,63℃退火30s,72℃延伸30s,35个循环,72℃延伸10 min。反应结束后产物经1%琼脂糖凝胶电泳检测,在凝胶成像系统上观察是否有目的条带出现。DNA Marker购自宝生物工程(大连)有限公司[2]。

4.3细菌培养方法

培养时先将病变组织接种于固体培养基上,做分离培养。再进一步对所得单个菌落进行形态、生化及血清学反应鉴定。一般细菌在有氧条件下,37℃中放18~24h生长。厌氧菌则在无氧环境中放2~3d后生长。

4.4弓形体检测的方法

采集病猪脾脏,直接涂片姬姆萨染色后镜检。弓形虫速殖子呈新月形,一端较尖而另一端钝园,胞浆蓝色,中央有一紫红色的核。

4.5附红细胞体的检测

猪耳静脉采血,滴加到载玻片上,加等量生理盐水混匀,盖上盖玻片,放在600 倍显微镜下观察,可见形状呈球形或颗粒状的附红细胞体。

5实验结果与分析

实验结果见表1、表2及图1、图2、图3。

从图1可见发病场一有伪狂犬感染,图2和图3可见发病场二有蓝耳病、伪狂犬病混合感染,发病场三有蓝耳伪狂犬感染。从表1猪场病原检测结果可知:发病场一存在巴氏杆菌和胸膜肺炎放线杆菌混合感染情况,发病场二存在蓝耳病、伪狂犬病和巴氏杆菌混合感染情况,发病场三有蓝耳病、伪狂犬病、链球菌和巴氏杆菌混合感染情况。从表2可见,发病场一、二、三所分离出的细菌分别对卡那霉素、磺胺嘧啶、阿莫西林敏感,而对新生霉素、环丙沙星、庆大霉素不敏感。

病毒与细菌的混合感染是该地区猪场发生高热病的主要原因。比较近三年该地区猪场秋冬季发病史,2015年秋冬季猪场在育肥猪和母猪的生产上不稳定性比较突出。主要有四个方面的诱发因素:第一,从2015年10月份开始,豫南地区连续四个月无有效降雨和降雪,气候持续干燥,有利于病原微生物在猪场内外环境中持续存在;第二,发病率高的地区养殖密度较大,猪场间距不符合传染病控制要求,猪场规模参差不齐,尤其是2015年下半年,由于行情下跌,很多养殖场抱希望于春节前行情走高,肥猪的压栏率高,由于经营成本压力大,一些猪场在疫苗和饲料的使用上出现更迭,给猪群后期的抗病能力带来负面影响;第三,部分规模化猪场因病因不明,出现盲目用药,配伍不合理,加大剂量,饲养管理差等不当措施,从而造成死亡率高而损失惨重的现象;第四,自2013年起豫南地区猪场伪狂犬病原及伪狂犬野毒抗体检出率呈上升趋势,许多过去伪狂犬阴性场也出现反弹。伪狂犬感染压力的上升,可能造成猪场其他疫病疫苗防控失败,加之伪狂犬病毒感染特点,也会加剧猪群呼吸道症状的复杂化。

表1 猪场病原检测结果

表2 细菌药敏结果

6防控对策

6.1保持日常管理工作的常态化

疫病的发生是各种发病诱因积累的结果,日常管理工作的漏洞,必然会加剧疫病发生的风险。行情波动是商品经济的必然规律,无论是疫苗还是饲料品质均是猪群健康的基石。而猪场管理水平的好坏则体现在日常管理制度的落实与延续上。

6.2加强实验室检测工作

实验室准确的检测结果对于明确疫病的性质,提出方向性的防治措施,具有十分重要的作用。上述三家猪场均是在前期药物使用无效的情况下,才进行实验室诊断,而结果显示均为病毒与细菌的混合感染,那么,之前抗生素的使用效果必然大打折扣,而且延误疾病治疗时机。建议猪场首先在疫苗免疫后1个月内分阶段采集适度比例的血液,通过实验室检测各项疫苗抗体水平,评估猪群健康程度。猪群出现发病动物时,应及时到各级实验室确诊,而不能简单依靠经验来处理,否则有可能误诊。

6.3重视防治细节

6.3.1用药原则猪场发生疾病后,不要盲目用药,要结合畜禽疾病检测单位,及时检测发病病原,进行药物敏感度实验,具有针对性的按疗程合理用药进行治疗,会收到良好的效果。同时选择大型知名兽药厂家产品,严格掌握剂量,适量给药。避免使用来路模糊不清的药品,造成治疗效果差进而影响判断的错误。

6.3.2给药途径商品猪在群体发病前,早期是个别猪只发病,此时可采取饲料加药等群体性饲喂保健防治,这个思路是正确的,但操作要适当。个别猪场在饲料加入了中成药,甚至直接加入大剂量退烧性西药,让大部分健康猪也随之降温的做法不妥。因为临床上发病猪采食量减退,再加上剂量过大或部分药品适口性不好,在饲料中大剂量用药是起不到很好的治疗作用的。如果发病猪群采食量下降70%以下,建议饮水加药,把药物加入水中会起到较好的治疗效果。

当猪只发生发热性疾病时,肌注是最有效的治疗方案。但要注意控制剂量。在实际生产中,往往在病猪反复发烧时,反复超剂量用药,甚至一日能肌注多种成份的药物。特别是含有退烧成份或盐酸氯丙嗪制剂的药物,极易导致病猪药物中毒死亡。此外还要注意防控病猪颈部坏死。商品猪自出生到体重40kg时,是采取疫苗防疫和保健措施的频繁期,由于操作人员习惯动作,只在猪只一侧防疫或保健,造成局部坏死或化脓,致使接种疫苗没有完全被吸收,猪只抗体没有提高,极易发生疾病,治疗时药物吸收也差。因此在编写免疫程序和保健方案时,就要注明左右两侧交替注射的部位,减少局部坏死机率。在猪病前期治疗时尽量避免使用浓度较高或不易吸收的药物。猪群大批发烧时,肌注治疗也只是起到退烧和消炎的作用,群体性肌注治疗不仅劳动量大,造成猪群应激也大。所以提倡抗菌素和退烧制剂通过饮水给药。

6.3.3正确消毒当附近猪场或本场猪群发生混合感染发热性疾病时,大部分猪场会采取加强消毒的措施。但是一部分猪场采取一日一消毒,同时直接对准熟睡的猪群进行喷雾消毒。这种做法在寒冷的冬天,极易加重猪群的病情。平时消毒宜间隔5~10d一次,发病期间根据情况1~2d消毒一次,但不要对准猪体直接喷雾消毒,而是对准圈舍屋顶呈45度角度进行消毒,并且速度一定要快,避免造成地面潮湿,引起气温急剧下降和湿度过大,特别是保育舍更需注意。

参考文献:

[1]徐辉,李晓成,陈伟杰,等.“猪高热病”的流行病学调查与主要病因分析[J].中国动物检疫,2007,24( 6) : 19-21.

[2]刘涛,王瑞,曲哲会,等.新生仔猪猪圆环病毒与葡萄球菌混合感染的实验室诊断[J].畜牧与兽医,2016(3):164-165.

(编辑:严佩峰)

收稿日期:2016-03-10

作者简介:陈强(1979—),男,河南信阳人,助理兽医师,研究方向:养殖场疫病防控.

中图分类号:S858.28

文献标识码:A

文章编号:2095-8978(2016)03-0110-04

Diagnosis and Analysis to Swine High Fever Disease in Southern Regions of Henan Province

CHEN Qiang1,WANG Rui2

(1.Animal Disease Prevention and Control Center of Xinyang,Xinyang 464000,China;2. College of Animal Husbandry and Veterinary Medicine, Xinyang Agriculture and Forestry University,Xinyang 464000,China)

Abstract:To investigate the cause of the swine high fever disease in farms of southern Henan, and take molecular biology and microbiology laboratory monitoring on the incidence of farm sampling. The results showed that the primary disease exists mixed infection pathogens.

Keywords:farms; swine high fever ; investigation and analysis; prevention and control measures

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