围手术期输血对膀胱癌患者免疫功能的影响

王维维 熊亚南 于丹军 刘波周 明璐 林翠 张颖

围手术期输血对膀胱癌患者免疫功能的影响

王维维 熊亚南 于丹军 刘波周 明璐 林翠 张颖

目的通过对围术期膀胱癌患者输血前后T淋巴细胞群及NK细胞活性的变化的观察，探讨输血对膀胱癌患者免疫功能的影响。方法随机选择70例膀胱癌手术病例，分成输血组(BT)47例与非输血组(NBT)23例，分别采集手术前1周之内，以及术后第1天、第3天、第7天的外周静脉血，用流式细胞仪测定T淋巴细胞亚群CD3＋、CD4＋、CD8＋及NK细胞活性，并计算CD4＋/CD8＋比值，分析其变化规律。结果BT组与NBT组术前各项指标相比较无显著性差异(P＞0.05)；术后第1天，BT组和NBT组各项指标相比较于术前均有显著性差异(P＜0.05)，但BT组与NBT组各项指标相比较无显著性差异(P＞0.05)；术后第3天、第7天，BT组各项指标相比较于术前有显著性差异(P＜0.05)；NBT组各项指标相比较于术前无显著性差异(P＞0.05)；BT组各项指标与NBT组相比较均有显著性差异(P＜0.05)。结论输血对膀胱癌患者的细胞免疫功能有较强的抑制作用。

输血；膀胱癌；T细胞亚群；NK细胞；围手术期

1 材料与方法

1.1 一般资料收集2015-01—11秦皇岛市第一医院和唐山市工人医院膀胱癌患者70例，其中男性48例，女性22例；年龄为40～69岁。上述患者均经病理确诊。根据术前3 d到术后10 d内有无输血史分为两组。其中输血组(BT组)男性为30例，女性为17例。未输血组(NBT组)男性18例，女性5例。输血组围手术期输血量(2～4)单位，均为库存悬浮红细胞。术前3个月内无输血史，术前及围手术期内未进行放疗、化疗及免疫治疗。

1.2 检测方法分别采集手术前1周之内，以及术后第1天、3天、7天的外周静脉血2～3 mL。以流式细胞仪测定T淋巴细胞亚群CD3＋、CD4＋、CD8＋及NK细胞，并计算CD4＋/CD8＋比值。

2 结果

围术期T活性细胞亚群与NK细胞活性的变化百分比(表1～2)。结果显示：①BT组术后第1天与术前各项指标相比较，CD3＋T细胞、CD4＋T细胞、CD4＋/CD8＋比值、NK细胞均显著性减少(P＜0.05)，但CD8＋T细胞无显著性差异(P＞0.05)；BT组术后第3天、第7天与术后第1天相比较，CD3＋T细胞、CD4＋T细胞、CD4＋/CD8＋比值、NK细胞均无显著变化(P＞0.05)，但与术前相比较，均有显著性减少(P＜0.05)。②NBT组术后第1天与术前各项指标相比较，CD3＋T细胞、CD4＋T细胞、CD4＋/CD8＋比值、NK细胞均显著性减少(P＜0.05)，但CD8＋T细胞无显著性差异(P＞0.05)；NBT组术后第3天、第7天与术后第1天相比较，CD3＋T细胞、CD4＋T细胞、CD4＋/CD8＋比值、NK细胞均有显著变化(P＜0.05)，但各项指标与术前相比较，均无显著性差异(P＞0.05)，基本恢复至术前水平。③BT组与NBT组相比较：术前的CD3＋T细胞、CD4＋T细胞、CD8＋T细胞、CD4＋/CD8＋比值、NK细胞均无显著差异(P＞0.05)，CD8＋T细胞无显著性差异(P＞0.05)；术后第1天，BT组与NBT组的CD3＋T细胞、CD4＋T细胞、CD4＋/CD8＋比值、NK细胞均无显著差异(P＞0.05)，但明显低于术前水平，CD8＋T细胞无显著性差异(P＞0.05)；术后第3天、第7天，BT组CD3＋T细胞、CD4＋T细胞、CD4＋/CD8＋比值、NK细胞均明显低于NBT组(P＜0.05)，CD8＋T细胞无显著性差异(P＞0.05)。

表1 围手术期CD3+、CD4+、CD8+T细胞及CD4+/CD8+比值的变化百分比(±s)

表1 围手术期CD3+、CD4+、CD8+T细胞及CD4+/CD8+比值的变化百分比(±s)

?

表2 围术期NK细胞活性的变化百分比(±s)

表2 围术期NK细胞活性的变化百分比(±s)

?

3 讨论

2010年全球肿瘤学统计资料显示，随着环境污染的加重和生活水平的不断提高，肿瘤发病率正逐步上升[1]。恶性肿瘤就是人们所说的癌症，它是100多种相关疾病的统称。当身体内细胞发生突变后，它会不断地分裂，不受身体控制，最后形成癌症。膀胱癌是泌尿系统最常见的恶性肿瘤，发病率居泌尿系统恶性肿瘤的首位。输血是指从静脉输入血液，是临床上一项重要的抢救和治疗措施。输血的治疗作用除了用以补给血量，维持血容量，提高血压以抗休克和防止出血性休克的措施外，还可供给具有带氧能力的红细胞以纠正因红细胞减少或其带氧能力降低所导致的急性缺氧症；补充各种凝血因子以纠正某些患者血液凝固障碍。但输血不仅可以传播传染病、引起严重的输血反应，甚至可以引起输血相关移植物抗宿主病和输血相关的免疫抑制(TRIM)[2]。TRIM的机制尚不是很清楚，可能的机制包括非特异性免疫抑制、封闭性抗体、血浆抑制因子、克隆缺失、抗独特型抗体、抑制淋巴细胞、抑制NK细胞的活性、供受者微嵌合体白细胞的形成[3]。但它的发生主要与输注同种异体白细胞或白细胞产物有关，其中包括通过细胞因子网络调节使受者机体免疫反应趋向Ⅱ型免疫应答[4]。

T细胞在细胞免疫中发挥着重要的作用[5]。其中，CD3＋代表细胞免疫的总体水平；CD4＋辅助其他细胞参与免疫应答；CD8＋抑制其他免疫细胞的功能。CD4＋/CD8＋比值也是重要的免疫指标，比值显著降低说明机体免疫调节功能低下，常被作为癌症预后不良的标志。NK细胞也是重要的免疫细胞，它对T细胞、B细胞、骨髓干细胞等均有调节作用，并通过释放淋巴因子对机体免疫功能进行调节。NK细胞能直接或分泌细胞毒因子而杀伤肿瘤细胞。它的活性降低，代表着肿瘤发展和发生远处转移[6]。手术对机体也会产生免疫抑制[7]。本实验研究也验证了此说法。结果显示膀胱癌患者术后第1天和第3天时，CD3＋、CD4＋、CD4＋/CD8＋比值和NK细胞均较术前显著性减少，CD8＋显著性增加(P＜0.05)。

对于膀胱癌患者，无论是术前患者血尿导致的严重贫血，还是术中患者出血，输血都是治疗膀胱癌患者的一种有效的辅助手段。但输血与肿瘤的复发有关。输血可以增加肿瘤复发率是1981年Gantt提出的。到目前为止，不少文献报道了如食管癌、肺癌、胃癌等患者围手术期输血可能使患者机体免疫功能低下、增加了癌症复发率[8-11]。同时通过实验也观察到了输血可导致癌症患者手术后感染率增高。Silliman对直肠癌患者进行观察与研究，得出结论输血增加术后感染率[12]。Blajchman总结了最近几年前瞻性的研究结果发现，肿瘤患者围手术期输血，术后细菌感染率明显增加[13]。本实验的结果显示：术前的CD3＋、CD4＋、CD8＋、CD4＋/CD8＋比值和NK细胞无显著性变化。CD3＋、CD4＋、CD4＋/CD8＋比值和NK细胞在术后第1天均明显下降，达到最低点。提示术后机体免疫状况下降。在术后第3天左右，NBT组逐渐恢复，然而BT组持续处于较低水平，恢复缓慢，两组间进行比对，差异有统计学意义(P＜0.05)。CD8＋在膀胱癌BT组术后水平高，与NBT组术后3 d比较差异有统计学意义(P＜0.05)。提示围手术期输血患者较非输血患者机体免疫功能有明显下降。

为了减少输血后肿瘤的复发与感染，我们采取以下措施[14]。第一应避免不必要的输血，提高临床输血水平，避免不必要的血液输注是保证血液输注安全的一项重要措施[15]。第二应该用去除白细胞的血液或血液制品。刘杰等人[16]对100例恶性肿瘤化疗患者分别输注全血和成分血液(去除白细胞)，然后对输血前后T细胞亚群、NK细胞活性、红细胞C3b受体花环率等细胞免疫功能进行检测。得出结论对恶性肿瘤患者输去除白细胞的血液能提高机体的细胞免疫功能。还有很多实验也证明了应使用白细胞过滤器去除血液中的白细胞，可以减少肿瘤的复发和术后感染[17-18]。第三应该尽量做到自体输血。王世端等人[19]选择了直肠癌、结肠癌和胃癌患者30例，将其随机分成两组，一组输全血，另一组是术中自体血回输给患者。用流式细胞仪测定T细胞亚群和NK细胞的数量。然后进行分析，得出结论围术期输异体血抑制患者免疫功能，自体输血免疫抑制轻微，且术后免疫功能很快恢复。

4 结论

本实验研究证明输血对围手术期膀胱癌患者免疫功能具有抑制作用，且免疫抑制作用在短期内不易清除，可能促进膀胱癌患者的复发、增加术后感染和降低术后远期生存率。所以在对膀胱癌患者进行治疗和手术时，能不输血就尽量不要输血，在不得不输血的情况下，尽量输去除白细胞的血液。在医疗设备齐全及条件允许的情况下，最好自体输血。我们要做到合理科学的输注血液。

[1]Jemal A，Bray F，Center MM，et al.Global cancer statistics[J].CA Cancer J Clin，2011，61(1)：69-90.

[2]Hendrickson JE，Hillyer CD.Noninfectious serious hazards of transfusion[J].Anesth Analg，2009，108(3)：759-769.

[3]BlajchmanMA.Immunomodulationandbloodtransfusion[J].Ann J Ther，2002，9(5)：389.

[4]Vamvakas EC.Possible mechanisms of allogoncic blood transfusionassociatedpostoperativeinfection[J].TransfusionMed Rev，2002，16(2)：144.

[5]Boileau S，Hoffmann S，Janot C，et al.Comparative study of immunologicconsequencesof autotransfusionandhomologous transfusion in lung cancer surgery[J].Ann Fr Anesth Reanim，1993(12)：251-259.

[6]Lechin F，van der Dijs B，Lechin AE，et al.Natural killer cells activity and neuroimmunological treatment of cancer[J].Clin Cancer Res，2004，10(23)：120.

[7]Romano F，Cesana G，Berselli M，et al.Biological，histological，andclinicalimpactofpreoperativeIL-2administration inradically operablegastriccancerpatients[J].Journalof Surgical Oncology，2004，88(4)：240-247.

[8]陈健，王伟，李兴慧，等.异体输血对食管癌患者术后免疫功能的影响[J].中国综合临床，2006，22(5)：445-447.

[9]魏秀琴，赵福元，张连祥，等.肺癌患者手术前后细胞免疫功能的动态研究[J].现代肿瘤医学，2015，19(1)：2766-2768.

[10]刘新君.围术期输血对恶性肿瘤患者的影响[J].中国实用期刊，2015，42(24)：52-53.

[11]高波.围术期输血对胃癌根治术患者预后及免疫的影响[J].实用癌症杂志，2015，30(8)：1224-1226.

[12]Silliman CC.The epidemiology and clinical manifestations of TRALL[J].Transfusion Alternatives in Transfusion Medicine，2004，6(1)：46-47.

[13]BlajchmanMA.Allogeneicbloodtransfusion，immunomodulation，andpostoperativebacterialinfection：do wehavethe answers yet[J].Transfusion，1997，37(2)：121.

[14]张颖.探讨如何合理调控成分血液资源，避免血液浪费[J].中国现代医生，2015，53(9)：119-121.

[15]刘绪华，高爱兰，李波.合理用血避免不必要的血液输注[J].社区医学杂志，2009，7(1)：69-70.

[16]刘杰，邹旭红，梁天孚.去白细胞输血对恶性肿瘤患者细胞免疫功能的影响[J].中国卫生检验杂志，2006，16(3)：353-354.

[17]Kao KJ，del Rosario ML.Role of class-Ⅱmajor histocompatibility complex(MHC)-antigen-positive donor leukocytes intransfusion-in-ducedalloimmunizationto donorclass-ⅠMHC antigens[J].Blood，1998，92(2)：690.

[18]Blajchman MA.Transfusion-associatedimmunomodulationand universal white cell reduction：are we putting the cart before the horse[J].Transfusion，1999，39(7)：665.

[19]王世端，王士雷，江岩，等.等容血液稀释自体输血对肿瘤病人围术期T淋巴细胞亚群、NK细胞影响的比较[J].中华麻醉学杂志，2001，21(9)：525-527.

ObjectiveTo study the influence of perioperative blood transfusion on immunologic function of bladder cancer sufferers through the observation on the changes of T lymphocyte mass and NK cell activity before and after blood transfusion.Methods70 cases of bladder cancer surgery were selected randomly and divided into blood transfusion group(BT)of 47 cases and non-blood transfusion group(NBT)of 23 cases.Peripheral venous blood of the samples was obtained one week before the surgery，and on the 1st，3rd and 7th day after surgery.CD3＋，CD4＋，CD8＋of T lymphocyte subsets and the cell activities of NK were tested by flow cytometry(FCM)，and the ratio of CD4＋/CD8＋was calculated，then the change regularities were analyzed.ResultsThere was no significant difference in the indicators between BT group and NBT group before surgery(P＞0.05)；the indicators in both BT group and NBT group showed clear changes on the 1st day after surgery compared with those before surgery(P＜0.05)，but the difference in indicators between BT group and NBT group was not obvious(P＞0.05)；the indicators of BT group on the 3rd and 7th day after surgery had significant differences compared with the preoperative results(P＜0.05)，while the indicators of NBT group changed little compared with the preoperative results(P＞0.05).The indicators between BT group and NBT group showed significant differences(P＜0.05).ConclusionPerioperative blood transfusion shows strong inhibitory effect on immunologic function of bladder cancer sufferers.

Blood transfusion；Bladder cancer；T cell subset；NK cell；Perioperative period

2016-02-26)

1005-619X(2016)06-0628-03

10.13517/j.cnki.ccm.2016.06.029

063000华北理工大学基础学院(王维维，熊亚南)；

066000秦皇岛市第一医院(于丹军，刘波，周明璐，林翠)；

110000辽宁中医药大学杏林学院(张颖)

熊亚南