奶牛乳房炎的实验室诊断技术探讨
2016-07-28蒋道智甘肃省卓尼县畜牧工作站甘肃卓尼747600
蒋道智(甘肃省卓尼县畜牧工作站,甘肃 卓尼 747600)
奶牛乳房炎的实验室诊断技术探讨
蒋道智
(甘肃省卓尼县畜牧工作站,甘肃 卓尼 747600)
摘要:奶牛乳房炎是威胁奶牛产奶率及奶品质的重要原因之一。通过对奶牛乳房炎的实验室诊断技术进行实践,掌握诊断牛隐性乳房炎的一些常用实验室诊断方法,比较各种方法的准确性及各自的优缺点,为临床诊断打好基础。
关键词:奶牛乳房炎;诊断技术;讨论
目前较为常用的奶牛乳房炎诊断技术是检测乳汁中的乳细胞,根据乳细胞的含量对奶牛乳房炎进行诊断,加利福尼亚乳房炎检测法、H2O2玻片法和苛性钠乳检验法是公认的乳细胞检测方法。
1 乳中细胞检验法
1.1CMT(加利福尼亚乳房炎检测法)
此法简易,效果准确,可以定量。基本原理是用一种阴离子表面活性物质——烷基或羟基硫酸盐破坏乳中体细胞,释放其中的蛋白质,蛋白质与试剂结合沉淀或凝胶。细胞中聚合的脱氧核糖核酸(DNA)是CMT产生阳性反应的主要成分。乳中体细胞数越多,释放的DNA越多,产生的凝胶就越多,凝胶越紧密。
诊断方法:先将2 ml的被检乳置于塑料乳房炎检验盘中,再加入2 ml试剂,缓慢做同心圆状搅拌10 s,观察判定,标准如表1。
1.2 H2O2玻片法(过氧化氢酶法)
此法为间接测定乳中白细胞的方法,即测定乳中白细胞的过氧化氢酶,以推断白细胞的含量。
诊断方法:将载玻片置于白色衬垫物上,滴被检乳1滴,再加H2O21滴,混合均匀后,静置2 min后观察。判定标准见表2。
表2 H2O2诊断乳房炎的判断标准
表1CMT法判断标准
1.3苛性钠乳检验法
这种方法操作比较简单,但不适用于检验泌乳初期几接近干乳期的牛乳。
将载玻片置于黑色衬垫物上,加入被检乳5滴,再加入4%苛性钠溶液2滴(冷藏2 d以内的乳样加一滴
即可),用细玻棒或火柴梗迅速搅拌,使其扩展成直径2.5 cm的圆形,并继续搅拌20~25 s,观察判定如表3。
表3苛性钠凝乳判断检验标准
1.4乳汁pH检验法——溴香草酚蓝(BTB)检验法
将载玻片置于白色衬垫物上,滴被检乳1滴,再加BTB试剂1滴,混合观察。判定标准如表4。
表4 BTB试验判定标准
2 实验结果分析
用CMT法,除右前乳房是强阳性外,其余都是隐性型。而H2O2玻片法检查乳汁时,四个乳房均呈阴性,NaOH法检测结果是弱阳性和可疑,BTB法检测结果都为阴性。不同检测方法对同一乳房的检测结果不同,可能是因为每种检测方法的判断标准不同。综合分析,右前乳房乳房炎判为强阳性,其余都判为可疑。
3 总结
在实验过程中一定要把握好用量,检测量的多少及试剂的用量均能影响检测的结果。在检测过程中,要注意在规定时间内观察乳液变化,不同时间乳液的变化程度不一样,影响判断。搅拌时间要遵守实验要求,时间过长或过短均会影响判断分析。最后要根据判断标准表及时判断乳液情况并做好记录,记录时要有条不紊。注意不要把不同乳房的检测结果混乱。
(编辑:高真贞)
中图分类号:S283
文献标识码:A
文章编号:1006-799X(2016)04-0075-01
作者简介:蒋道智(1983-),男,甘肃卓尼人,助理畜牧师,主要从事畜牧兽医方面工作。