不同种类石韦的总多糖含量分析

高丽丽，吴　雪，高德民

(山东中医药大学 药学院，山东 济南 250355)



不同种类石韦的总多糖含量分析

高丽丽，吴雪，高德民*

(山东中医药大学 药学院，山东 济南 250355)

摘要对不同品种石韦的总多糖含量进行比较分析。取9种石韦经脱脂、除杂、超声水提、除蛋白、脱色、离心等得到总多糖溶液，再采用苯酚-硫酸法，以葡萄糖为对照品，在490nm处测定多糖的含量。结果显示，不同品种石韦多糖含量不同，庐山石韦总多糖含量最高，有柄石韦和石韦含量次之，西南石韦含量最少，其他品种石韦含量不高但相差不大。

关键词石韦；苯酚-硫酸法；总多糖含量

石韦是水龙骨科(Polypodiaceae)石韦属(Pyrrosia)植物庐山石韦[Pyrrosiasheareri(Bak.) Ching]、石韦[Pyrrosialingua(Thunb.) Farwell]和有柄石韦[Pyrrosiapetiolosa(Christ)Ching]的干燥叶，始载于《神农本草经》，具有利尿通淋，清肺止咳，凉血止血的功效，用于治疗热淋，血淋，石淋，小便不通，淋沥涩痛等[1]。 其主要活性成分为酚酸类，黄酮类以及多糖等。目前，人们对前两种成分研究较为广泛而关于多糖的研究文献较少， 且多糖具有多方面的生物活性，如抗肿瘤活性、抗病毒作用、抗炎作用、降血糖作用，特别是对机体免疫功能的调节作用尤为突出[2-3]。 为此，本实验对不同产地及不同部位中石韦的多糖含量进行初步测定与比较，以期为中药石韦的合理开发利用提供依据。

1仪器、试剂与材料

1.1仪器

上海菁华754PC紫外-可见光分光光度计、上海菁海FA2004N电子天平、昆山KQ-250E型医用超声波清洗器、菏泽鑫源SHB-III循环水多用真空泵、上海树立FXB101-1型电热鼓风干燥箱、上海苏阳移液器、上海顶帅DS-T250 型高速多功能粉碎机、济南启科HH-S 数显恒温水浴锅。

1.2试剂与材料

葡萄糖标准品、浓硫酸、苯酚、乙醇溶液、H2O2、浓氨水、石油醚、蒸馏水。石韦样品均经山东中医药大学高德民副教授鉴定。

2方法

2.1总多糖溶液的制备

精密称取石韦粉末10 g，置锥形瓶中用石油醚浸泡过夜。将药品粉末以料液比1∶20加入80%乙醇，在50℃下超声40 min, 过滤后晾干。再加入蒸馏水40 mL， 40℃下超声提取20 min[4], 放置至室温，过滤，收集滤液。加15% 的H2O2，并用氨水调pH至8.0，水浴脱色1 h[5-6]。用Sevage 法(氯仿-正丁醇4∶1) 除蛋白[7-8]，得到供试品溶液备用。

2.2总多糖含量的测定

依据苯酚硫酸法[9]，利用紫外可见分光光度计在490 nm处的吸光度与浓度的关系制备标准曲线，得回归方程为A=95.017C+0.030 2，R2= 0.998 8。 依照上述方法测定样品中总多糖溶液的吸光度并计算其含量。

3结果与分析

结果显示，不同品种石韦多糖的含量存在较大的差异 (表1)。其中以庐山石韦中的多糖含量最高(3.526%)，是绒毛石韦和毡毛石韦多糖含量的近2倍，有柄石韦及石韦中的多糖含量次之，中越石韦、华北石韦和纸质石韦多糖含量相差不大，约为2%左右，西南石韦中多糖含量最低(1.382%)。

表1　不同品种石韦的总多糖含量

注： 西南石韦现已被中国植物志合并为华北石韦，但根据二者形态有所差别，本次实验仍将二者分开进行含量测定。

4讨论

石韦中的多糖具有增强免疫力、降血糖等多方面的生物功能。本实验结果表明，除了药典记载的庐山石韦、有柄石韦及石韦外，民间习用的毡毛石韦和华北石韦等不同品种的石韦中也含有一定的多糖，这为民间用药提供了理论基础。同时，通过对这9种石韦多糖含量的测定，说明石韦属中的不同品种石韦多糖含量存在一定的差异，因此，建议对石韦属中的多种石韦进行更深层次的研究，以最大限度地利用石韦这一常用中药资源。

参考文献：

[1]国家药典委员会.中国药典：一 部[S]. 北京：中国医药科技出版社,2010:83-84.

[2]王兵，黄传贵. 石韦多糖降血糖作用的实验研究[J]. 亚太传统医药, 2008, 4(8):33-34.

[3]方积年，丁侃. 多糖的主要生物活性及分离方法[J]. 中国天然药物, 2007, 5(5):338-340.

[4]程丹丹，高德民.有柄石韦中多糖提取工艺的优化[J]. 中国野生植物资源， 2014, 33(3):16-17.

[5]陆颖，任爱农. 用过氧化氢对野菊花碱溶性多糖进行脱色的工艺研究[J]. 中南药学, 2012, 10(3):185-188.

[6]张丽萍，盛义保，马惠玲,等. 苹果多糖除杂脱色工艺的筛选[J]. 西北林学院学报, 2007, 22(1):141-144.

[7]万琴，萧伟，王振中,等.女贞子多糖除蛋白工艺的研究[J]. 中草药, 2010, 41(3):408-410.

[8]王婷婷，付超梅，李钰婷,等.麦冬粗多糖除蛋白工艺研究[J]. 中国新药杂志，2008, 17(9):769-771.

[9]杨勇杰，姜瑞芝，陈英红，等. 苯酚-硫酸法测定杂多糖含量的研究[J]. 中成药,2005(6): 706-708.

Determination of Total Polysaccharide Content in Different Species ofPyrrosia

Gao Lili, Wu Xue, Gao Demin*

(School of Pharmacy, Shandong University of TCM, Jinan 250355，China)

AbstractObject: To analysis the content of polysaccharide in diferent species ofPyrrosia. AfterPyrrosiapower was degreased, removed impurity, extracted, removing the protein and centrifuged, the total polysaccharide was obtained. Then taking the glucose as the reference substance to determine the content of polysaccharide in 490 nm by the phenol-sulfate method. The results showed that the content of total polysaccharide in different species is significantly different. The polysaccharide content inPyrrosiasheareriis highest, followed byPyrrosiapetiolosaandPyrrosialingua, thePyrrosiagrallais lowest and the others are similar with each other.

Key wordsPyrrosia; phenol-sulfate method; polysaccharide content

收稿日期:2015-06-18

基金项目：山东中医药大学2014年SRT项目资助(2014362)。

作者简介：高丽丽(1994—)，女， 山东中医药大学2012级中药学本科生。 *通讯作者：高德民，男，副教授，硕士生导师，研究方向为中药资源与质量控制。E-mail:gdm607@126.com

doi：10.3969/j.issn.1006-9690.2016.01.010

中图分类号：R284.1

文献标识码：A

文章编号：1006-9690(2016)01-0035-02