冠心病气虚血瘀证大鼠模型的建立

黄烁 任建勋 王少辰 杨斌 董小霞 许晴 王琼 刘建勋

[摘要]應用疲劳跑步运动复合左冠状动脉前降支高位结扎的方法建立冠心病气虚血瘀证病证结合大鼠模型。该实验选用Wistar雄性大鼠，随机分为假手术组（JSS）、单纯结扎冠脉组（DZ）、疲劳跑步运动复合结扎冠脉组（PZ）。DZ组进行单纯冠脉结扎；PZ组利用小动物跑台进行为期2周的跑步运动造成疲劳模型，在此基础上进行冠脉结扎，术后以1次/2 d的频率维持28 d的力竭跑步；于术后28～31 d观察大鼠宏观体征，分别采集大鼠超声心动检测指标、呼吸幅度对大鼠冠心病气虚血瘀证的主症进行评价；采集空场实验相关指标、力竭运动时间、足底图像色彩饱和度对兼症进行评价；采集舌面色彩饱和度对舌象进行评价；采集脉搏搏动幅度对脉象进行评价。同时对血液流变学、凝血功能等指标进行检测。结果显示，术后第28天开始，PZ组大鼠主症、兼症、舌象、脉象均符合冠心病气虚血瘀证证候表现，结合相关病理性检测结果证明以疲劳跑步运动复合左冠状动脉前降支高位结扎的方法在大鼠体内可以成功建立冠心病气虚血瘀证病证结合模型。

[关键词]冠心病；病证结合；气虚血瘀证；大鼠；动物模型

[Abstract]To establish Qideficiency and bloodstasis syndrome type coronary heart disease models by fatigue running exercise and high ligation of left anterior descending coronary artery （LAD）， male Wistar rats were selected and randomly divided into sham operation group （JSS）， coronary ligation group （DZ）， fatigue running exercise+coronary ligation group （PZ） Coronary ligation alone was done in DZ group； while the rats in PZ group had running exercise in on the animal treadmill system for 2 weeks to establish fatigue models， and then coronary ligation was done based on the models The exhausted running was maintained for 28 days at the frequency of 1 time/2 days after operation Twentyeight to thirtyone days after the operation， all the rats were observed for macroscopic physical signs， and ultrasonic echocardiography indexes and breathing extent of the rats were collected to evaluate the main symptoms of rats with Qideficiency and bloodstasis syndrome type coronary heart disease； related indexes of open field test， exhaustive running time， and colorimetric analysis data on images of plantar were collected to evaluate the accompanied symptoms； colorimetric analysis data on lingual surface was collected to evaluate the tongue characteristics； pulse distension data was collected to evaluate the pulse condition， and meanwhile， blood rheology and coagulation function were also detected From the 28th day postoperatively， the main symptoms， accompanied symptoms， tongue characteristics and pulse conditions of rats in PZ group conformed to the symptoms of coronary heart disease and Qideficiency and bloodstasis syndrome Combined with related pathological results， the study revealed that Qideficiency and bloodstasis syndrome type coronary heart disease models could be successfully established by fatigue running exercise and high ligation of left anterior descending coronary artery for the rats

[Key words]coronary heart disease； diseasesyndrome combination； Qideficiency and bloodstasis； rat； animal model

doi：10.4268/cjcmm20160921

血管疾病是目前导致人类死亡与残疾的三大主要疾病之首，严重危害人类健康。世界卫生组织（WHO）最近的报告中指出，2000—2020年心肌梗死的死亡率将由第5位上升到第1位，因心血管病引发的死亡占全球死亡人数的30%，该病严重影响着广大患者的健康。Pillai H S等[1]调查显示，冠心病、高血压和慢性肾衰是南亚心力衰竭的主要三大病因，据统计大约65%的心力衰竭由冠状动脉疾病引发。葛永彬等[2]对7 512例冠心病中医证型分布规律的分析中得出冠心病中医证型中本虚标实属常见证型，其中气虚血瘀比例最高。建立规范化的疾病动物模型是研究疾病发生、发展进程，研究病因和寻求有效治疗方案的有效途径。病证结合动物模型融合了现代医学病理学动物模型和中医证候动物模型两者共同的特点和因素， 使模型动物同时具有西医疾病和中医证候的特征，是阐明中医基础理论、辨证论治关系、全面客观反映中药药效作用较为理想的载体[3]。

本文依据中医对冠心病气虚血瘀证的病机认识，在既往实验研究的基础之上，尝试选择疲劳运动结合高位结扎左冠状动脉前降支双因素复合刺激的方法建立大鼠冠心病气虚血瘀证病证结合动物模型，使其更加符合中医气虚血瘀证候的病机特点。

1材料

健康雄性Wistar大鼠40只，SPF级，体重（200±10）g，购置于北京维通利华动物中心有限公司，许可编号SCXK（京）20130012。

动物专用心电图机（日本Softron）；高分辨率小动物超声影像系统Vevo 2100（加拿大VisualSonics公司），探头型号MS250；MouseOx小动物无创脉搏血氧仪（美国Starr Life Sciences Inc公司）；Nikon D90单反相机；台湾TES1330A数位式照度计；空场计算机图像实时监测分析系统（中国航天员训练中心和中国医学科学院药用植物研究所联合研制开发）；ZHPT动物实验跑台（安徽正华生物仪器设备有限公司）；LBYN6C血液流变测定仪（北京普利生）；COALAB1000血凝仪（德国蓝波）；美国MatrxVIP3000小动物麻醉机凝血酶时间（TT），活化部分凝血活酶时间（APTT），凝血酶原时间（PT），纤维蛋白原（FIB）测定试剂盒（上海太阳生物技术有限公司）；异氟烷（100 mL/瓶，鲁南贝特制药有限公司，批号H20020267）；注射用青霉素钠（400万 U/支，华北制药股份有限公司，批号H13020656）；盐酸利多卡因注射液（5 mL，01 g/支，中国大冢制药有限公司，批号H20065378）。

2方法

21分组

实验大鼠饲养于中国中医科学院西苑医院SPF级动物房，饲养条件：温度（25±2） ℃，湿度（40±5）%，大鼠随意饮食饮水。大鼠适应性喂养2 d后，進行3 d的适应性跑台训练，每天1次，每次15～30 min。当大鼠能够以20 m·min-1的速度持续跑30 min，开始进行模型的建立。淘汰不能完成上述运动的大鼠[4]。将大鼠随机分为3组：假手术组（JSS组，10只）、单纯高位结扎左冠状动脉前降支组（DZ组，15只）、疲劳运动复合高位结扎左冠状动脉前降支组（PZ组，15只）。

22冠心病气虚血瘀证造模方法

假手术组（JSS）方法：手术方法同DZ组，但穿线不结扎。

单纯高位结扎左冠状动脉前降支组（DZ）方法：具体方法在参照文献[5]的基础上进行改进，大鼠用小动物麻醉机维持麻醉状态（氧气压强01 MPa，氧气流量300 mL·min-1，麻醉药物浓度2%）。用止血钳撑开大鼠左侧第3，4肋间隙，轻微按压胸廓挤出心脏，用0号手术线结扎左冠脉前降支根部，结扎后心脏表面立刻给予利多卡因注射液2～3滴，立即将心脏放回胸腔，排出进入胸腔空气，缝合皮肤。关胸后立刻注射青霉素01～02 mL。

疲劳跑步运动复合高位结扎左冠状动脉前降支组（PZ）方法：大鼠在跑台水平状态中进行每天1次为期2周中等强度的跑步运动[67]，造模实验方案见表1。在造成疲劳模型后对大鼠进行左冠状动脉前降支高位结扎。术后恢复4 d，开始让大鼠进行力竭运动（速度20 m·min-1，频率：1次/2 d）。

黄烁等：冠心病气虚血瘀证大鼠模型的建立表1大鼠疲劳运动训练方案

Table 1Training program for exerciseinduced fatigue in the rat modelsm·min-1×min

周次第1天第2天第3天第4天第5天第6天第7天第1周15×1515×1518×2018×2018×2518×2520×25第2周25×2525×2525×3025×3030×3030×3030×30

23指标采集方法

231心电图采集术后第3天上午8：00，大鼠用2%异氟烷维持麻醉状态，背位固定，用日本Softron动物专用心电图机采集心电图。检测异常Q波是否出现，对大鼠成模情况进行评价。

232大鼠舌面、足底（统一右侧后肢足底）图像采集参照文献方法[8]，术后第28天上午8：00—10：00，在动物房利用色温5500K柔光箱进行布光，根据国际照明委员会CIE推荐的标准照明和观测条件，采用45/0（照明/观察）的照明几何条件安排光路。光源照度测量采用台湾泰仕TES1330A 照度计，舌面处照度范围控制在1 500～2 000 lx。图片采集应用尼康D90数码单镜反光相机，联合尼康AFS 微距尼克尔60 mm f/28G ED镜头，相机用三脚架固定，镜头与舌面、足底距离15 cm。应用灰卡手动设定白平衡，图像采集时选用相机手动（M）档，自动对焦，以光圈F8，快门1/80 s，ISO 400 的条件采集舌面图像。拍照时保证比色卡与舌面、足底在同一平面，舌面足底照片以JPG格式输出。图像采集后利用Adobe Photoshop CS5软件选取舌面、足底区域3点，读取像素区域R（红色）、G（绿色）及B（蓝色）分量值。

233超声心动检测方法术后第29天，利用异氟烷维持大鼠麻醉状态后[维持大鼠心率在（350±20） bpm]，对大鼠胸部左侧锁骨至肋骨下缘进行备皮处理。在左室长轴及胸骨旁短轴各切面进行二维扫查，选用左室短轴切面M超测量计算左室收缩末内径（LVIDs），左室舒张末内径（LVIDd），左室收缩末容积（LVs Vol），左室舒张末容积（LVd Vol），射血分数（EF），短轴缩短率（FS），各项指标均连续测量3个周期，取平均值。

234大鼠呼吸幅度、脉搏幅度检测术后第29天，利用2%异氟烷维持大鼠麻醉状态后，利用Mouse Ox小动物无创脉搏血氧仪对大鼠呼吸幅度、脉搏幅度进行检测。记录每只动物连续10个有效数据，取平均值。

235大鼠空场实验相关指标检测术后第30天进行，空场实验室保持安静，室内暗光，实验人员位置以操作角度无法观测到箱中实验动物为准。空场测试箱直径80 cm，高50 cm，内壁与底部涂黑。实验前，将动物在测定房间中适应10 min。实验开始时捏住大鼠尾巴距根部1/2处放入测试箱底部中心，显示器中观察动物10 min内活动情况，每次测定结束后将动物排泄物清理干净，并用75%乙醇擦拭箱底驱散气味。实验结束后利用软件进行录像分析。描绘动物运动轨迹，测量动物运动距离、平均速度、运动时间。

236大鼠力竭运动时间测定术后第30天将大鼠放进小动物实验跑台（跑台速度25 m·min-1，电击强度15 mA）进行力竭跑步测试。以大鼠3 s内被连续电击5次仍无法跑步为标准判断是否力竭。记录时间。

237大鼠血液流变学、凝血功能检测各组大鼠在术后第31天，禁食24 h后腹腔注射35%水合氯醛（10 mL·kg-1）麻醉，腹主动脉取血3 mL，加入肝素化抗凝试管中，立刻进行血液流变学测定。腹主动脉取血3 mL，38%柠檬酸钠抗凝，常温1 800×g离心10 min，进行凝血酶时间（TT）、活化部分凝血活酶时间（APTT）、凝血酶原时间（PT）、纤维蛋白原（FIB）含量检测，操作步骤按照说明书进行。

238大鼠心肌MASSON染色心脏切片脱蜡至水，经过天青石蓝、Mayer氏苏木素、丽春红苦味酸、1%淡绿等染色后，再脱水，树胶封固。显微镜下观察，胶原纤维染为蓝色，胞核染为蓝黑色，肌纤维染为红色。

239大鼠心肌HE染色大鼠心肌组织放于4%多聚甲醛固定24 h，石蜡包埋，切片（5 μm），苏木精伊红染色，光学显微镜下观察心肌结构。

24统计学方法

统计软件采用SPSS 200进行统计。实验获得的各数据以±s表示。若数据符合正态分布方差齐用LSD检验反之用Tamhane′s T2检验。P<005表示差异有统计学意义。

3结果

31大鼠术后3 d心电图检测及术后28 d一般状态

術后第3天单纯高位结扎组、疲劳运动复合高位结扎组大鼠心电图中出现异常Q波，假手术组大鼠心电图正常；术后28 d单纯高位结扎组、疲劳运动复合高位结扎组大鼠精神萎靡，被毛枯黄失去光泽，活动度降低，喜欢聚拢在一起，嗜睡，对外界刺激反应迟钝，稀便；假手术组大鼠状态正常。疲劳运动复合高位结扎组大鼠与假手术组大鼠比较，体重下降，存在统计学差异（P<005）；疲劳运动复合高位结扎组大鼠与单纯高位结扎组大鼠比较，体重有所下降，但不存在统计学差异；单纯高位结扎组大鼠与假手术组大鼠比较，体重有所下降，但不存在统计学差异，见表2。

32大鼠足底、舌面图片分析

术后28 d观察单纯高位结扎组、疲劳运动复合高位结扎组大鼠鼻尖、口唇、掌心、舌面与假手术组大鼠比较，均发生不同程度的变紫变暗，见表3。本研究着重记录大鼠右侧后肢足底及舌面的R，G，B值，单纯高位结扎组、疲劳运动复合高位结扎组大鼠与假手术组大鼠比较，足底R，G，B值均显著降低（P<001）；疲劳运动复合高位结扎组大鼠与单纯高位结扎组大鼠比较，足底R，G值有所降低，但不存在统计学差异。单纯高位结扎组、疲劳运动复合高位结扎组大鼠与假手术组大鼠比较，舌面R，G，B值均显著降低（P<001）；疲劳运动复合高位结扎组大鼠与单纯高位结扎组大鼠比较，足底G，B值有所降低，但不存在统计学差异。

33大鼠超声心动图检测

术后第29天，单纯高位结扎组、疲劳运动复合高位结扎组大鼠与假手术组大鼠比较，EF，FS显著下降（P<001），LVIDd，LVIDs，LVd，LVs显著上升（P<001）；疲劳运动复合高位结扎组大鼠与单纯高位结扎组大鼠比较，EF，FS显著下降（P<001），LVIDs和LVs显著上升（P<005），LV d上升但不存在统计学差异，见表4。

34大鼠呼吸幅度、脉搏幅度检测

术后第29天单纯高位结扎组、疲劳运动复合高位结扎组大鼠与假手术组大鼠比较，呼吸幅度、脉搏幅度显著下降（P<001）；疲劳运动复合高位结扎组大鼠与单纯高位结扎组大鼠比较，呼吸幅度、脉搏幅度显著下降（P<001），见表5。

35大鼠空场实验相关指标、力竭运动时间检测结果

术后第30天，单纯高位结扎组大鼠与假手术组大鼠比较，运动距离、爬壁次数、力竭运动时间显著下降（P<005，P<001），平均速度、运动时间下降但不存在统计学差异；疲劳运动复合高位结扎组大鼠与假手术组大鼠比较，运动距离、平均速度、运动时间、爬壁次数、力竭运动时间显著下降（P<005，P<001）；疲劳运动复合高位结扎组大鼠与单纯高位结扎组大鼠比较，运动距离、平均速度、运动时间、爬壁次数、力竭运动时间下降，但不存在统计学差异，见表6。

36大鼠血液流变学检测

术后第31天，单纯高位结扎组、疲劳运动复合高位结扎组大鼠与假手术组大鼠比较，在低切变率、高切变率下的全血黏度显著升高（P<001），中切变率下的全血黏度升高，但不存在统计学差异；疲劳运动复合高位结扎组大鼠与单纯高位结扎组大鼠比较，低切变率、中切变率、高切变率下的全血黏度升高，但不存在统计学差异，见表7。

37大鼠凝血功能检测

术后第31天，单纯高位结扎组、疲劳运动复合高位结扎组大鼠与假手术组大鼠比较，PT，APTT，FIB降低，TT升高，但不存在统计学差异；疲劳运动复合高位结扎组大鼠与单纯高位结扎组大鼠比较PT，FIB降低，APTT，TT升高，但不存在统计学差异，见表8。

38大鼠心肌Masson染色

假手术组大鼠心肌染色以红色的心肌细胞为主，心肌组织分布均匀，结构清晰，细胞排列整齐，

4讨论

本实验室在建立各类动物模型的探索过程当中，逐步形成了“病证结合动物模型拟临床”这一概念。原则上首先在實验动物的选择上应尽量选择与人类接近或相似的动物[8]，在冠心病气虚血瘀证动物模型的建立当中，因为心血管系统与人类颇为相似所以小型猪是最为适合的实验动物，但由于实验动物价格较为昂贵，并且在实际应用过程中推广起来有一定难度，所以本研究选用大鼠作为实验动物。其次选用无创或微创的手段获取有价值的实验数据[8]。本研究在造模的手术方法中，选取了创伤最小（皮肤切口15 cm），手术过程时间最短（约30 s）的方法，尽量减小对原有胸腔稳定环境的破坏。最后动物模型的建立方法应最大可能符合疾病实际的发展过程[8]，由于大鼠具有抵抗动脉粥样硬化形成的能力，在大鼠身上模拟冠脉粥样硬化又有一定难度，所以目前大鼠冠心病心衰模型的建立方法主要有注射异丙肾上腺素[9]、脑垂体后叶素[9]、麦角新碱[10]、冠脉结扎[11]等方法。针对大鼠气虚血瘀证候模型的建立方法主要有游泳+饥饿+高脂饮食[12]、老年+阿霉素+外伤[13]、饥饿+心得安+高分子右旋糖酐[14]、甲硝基亚硝基胍+雷尼替丁+饥饱失常的综合法[15]、饥饿+疲劳+寒凉[16]、力竭游泳+皮下注射肾上腺素[17]、饥饿+高脂饮食+寒湿或+惊恐[18] 。目前冠心病气虚血瘀病证结合动物模型的建立过程中最为突出表现的问题是建立模型的干预因素无法有机结合与临床实际发病原因相脱节。本研究遵循中医病因病机“血瘀多由日久气虚所致，血瘀进一步阻滞气机致虚”，先通过呈阶梯递增强度的跑步运动使大鼠处于疲劳状态，模拟人体生理上呈现出的疲劳状态，正气消耗开始出现气虚证的表现；在此基础上结扎大鼠冠状动脉前降支，模拟人体心肌梗死的发生，日久气虚导致心脉瘀阻；术后维持一定强度的跑步运动，继续模拟人类正气的消耗，由心肌梗死导致心力衰竭过程的发生，伴随气虚血瘀证候的出现。

本研究在模型评价体系的建立当中，参照临床冠心病致心力衰竭气虚血瘀证侯诊断标准：胸痛胸闷，心悸气短，身倦乏力，面色紫暗，舌淡紫，脉弱而涩。同时考虑到实验动物本身特点，制定大鼠冠心病气虚血瘀中医证候诊断标准如下。主症（胸痛胸闷、心悸气短）：用反映心脏功能的超声心动图指标诊断是否胸痛胸闷；用呼吸幅度诊断是否心悸气短。兼症（身倦乏力、面色紫暗）：用反映大鼠运动能力的空场实验指标、力竭运动时间诊断是否身倦乏力；由于大鼠面部图像采集以及分析存在一定困难，而大鼠足底图像方便采集且色泽变化较为明显所以用足底图像色彩饱和度来诊断是否面色紫暗。舌象（舌淡紫）：用舌面色彩饱和度变化来诊断是否舌色淡紫。脉象（脉弱而涩）：用反映大鼠脉搏搏动强度的指标来诊断是否脉弱而涩。同时结合相关病理指标，能够对冠心病气虚血瘀证大鼠模型进行一个较为完整的疾病以及证候诊断。

利用西医病因病理造模方法单纯高位结扎左冠状动脉前降支建立的冠心病气虚血瘀证大鼠模型虽然在证候上表现出了心气虚证与血瘀证的相关特点，比如心功能下降，运动能力变差，掌心色彩饱和度下降等，但这种模型的建立方法均与特异的病理变化有所关联，只能够反映临床病理表现的一个方面，缺少临床病因学基础，与中医相关理论体系缺乏联系，很难完整体现出中医证候的特征，出现的病理状态并不能够与特定的中医证候对等。相比较之下，本研究利用疲劳跑步运动结合高位结扎左冠状动脉前降支双因素复合刺激的方法建立的冠心病气虚血瘀证大鼠模型则更具有优势，模型在冠心病气虚血瘀中医证候的表现上更加显著。

在动物模型的评价体系中，虽然有些指标的变化并没有出现统计学差异，比如代表凝血功能的PT，APTT，TT，FIB等，但并不代表这些指标的变化不存在任何生理学意义，PT，APTT的缩短说明血液处于高凝状态，FIB的减低常见与弥散性血管内凝血消耗性低凝溶解期，TT的增高常见于弥散性血管内凝血纤溶亢进期。临床诊断中不能轻易忽视这些指标的变化[19]，那么在动物模型的评价当中更加应该留意一些“不存在统计学差异”的指标变化所包含的生理学意义。

但是本研究利用疲劳运动结合高位结扎左冠状动脉前降支双因素复合刺激的方法建立的冠心病气虚血瘀证大鼠模型与人类临床上冠心病致心力衰竭气虚血瘀证实际的发展演变过程仍然存在一定的差距，研究者在日后研究过程当中，应当借助多学科交叉合作，建立更加稳定更加可靠规范化的病证结合动物模型，同时对模型的评价体系进行不断地完善。

[参考文献]

[1]Pillai H S， Ganapathi S. Heart failure in South Asia[J]. Curr Cardiol Rev，2013，9（2）：102.

[2]葛永彬，毛静远. 7512例冠心病中医证型分布规律分析[J]. 山东中医杂志，2011，30（4）：227.

[3]刘建勋，李欣志，任建勋. 中医证候模型拟临床研究概念的形成及应用[J]. 中国中药杂志，2008，33（14）：1772.

[4]刘晓莉，罗勇，乔德才. 大鼠一次性力竭跑台运动模型的建立及动态评价[J]. 中国实验动物学报，2012（3）：25.

[5]李贻奎，赵乐，何萍，等. 提高结扎冠状动脉在体大鼠心肌梗死模型制作速度和质量的实验研究[J]. 中国中西医结合杂志，2012（7）：948.

[6]汶希，潘华山，冯毅翀. 大鼠运动性疲劳模型的建立[J]. 中国实验动物学报，2009（5）：368.

[7]Bedford T G， Tipton C M， Wilson N C， et al. Maximal oxygenconsumption of rats and it s changes with various experimental produces [J]. J Appl Physiol， 1979，7：1278.

[8]李磊，林成仁，劉建勋，等. 小型猪痰瘀互结证冠心病证侯诊断研究[J]. 世界中医药，2013（10）：1132.

[9]Garjani A， Andalib S， Biabani S， et al. Combined atorvastatinand coenzyme Q10 improve the left ventricular function inisoproterenolinduced heart failure in rat[J]. Eur J Pharmacol，2011，666（1/3）：135.

[10]周兴光，高诚，徐平，等. 人类疾病动物模型复制方法学[M]. 上海：上海科学技术文献出版社， 2008：24.

[11]Xing L， Jiang M， Dong L， et al. Cardioprotective effects of the Yiqi Fumai injection and isolated compounds on attenuating chronic heart failure via NFkappaB inactivation and cytokine suppression[J]. J Ethnopharmacol，2013，148（1）：239.

[12]李净，王键. 益气活血法改善气虚血瘀证局灶性脑缺血再灌注模型鼠生物学特征的有效性评价[J]. 中国中医基础医学杂志，2003（4）：22.

[13]李萍，黄启福，杨丽彩，等. 气虚血瘀大鼠慢性伤口模型的研究——阿霉素对大鼠伤口的影响[J]. 中国中西医结合外科杂志，1999（2）：48.

[14]闫润红，王世民，闫志芳. 不同黄芪剂量的补阳还五汤对“气虚血瘀”家兔血粘度的影响[J]. 中药药理与临床，1999（1）：8.

[15]沈洪，单兆伟，陆为民，等. 胃舒胶囊治疗萎缩性胃炎癌前病变气虚血瘀证临床与实验研究[J]. 中医杂志，2001（9）：539.

[16]庞树玲，高金亮. 中年大鼠气虚血瘀证的模拟及其机制探讨[J]. 天津中医学院学报，1997（3）：29.

[17]蔡光先，白雪松，佘颜，等. 超微补阳还五汤对气虚血瘀证模型大鼠血液流变学的影响[J]. 湖南中医杂志，2007（3）：95.

[18]廖慧玲，尹思源，杨思进，等. 从血液流变学看多因素复合制作气虚血瘀脑缺血动物模型[J]. 陕西中医，2007（6）：750.

[19]李光伟. 统计学意义与临床意义距离有多远？——医学文献中统计分析结果解读需仔细[J]. 中华内分泌代谢杂志，2006（1）：1.

[责任编辑马超一]