山楂提取物对地高辛诱导大鼠心律失常的拮抗作用

李　馨　黄海燕

(重庆市江北区人民医院心血管内科，重庆　400020)

山楂提取物对地高辛诱导大鼠心律失常的拮抗作用

李馨黄海燕

(重庆市江北区人民医院心血管内科，重庆400020)

〔摘要〕目的探讨山楂提取物对地高辛诱导心律失常的拮抗作用。方法研究分为实验组(n=8)和对照组(n=8)。地高辛，以40 μg·kg-1·min-1剂量，注射到实验组和对照组大鼠诱导心律失常。与此同时，山楂提取物滴注实验组大鼠；等量0.9%NaCl滴注到对照组大鼠。分析大鼠心电图QRS波增宽及动脉血压变化。结果实验组大鼠比对照组存活时间长(P=0.002)。地高辛注射起始两组间QRS波增宽无统计学差异(P=0.812)。对照组心动过缓特别明显(P=0.01)。在地高辛和0.9%NaCl滴注期间对照组观察到最大QRS波时间是53.29±3.99 ms(P=0.001)。而实验组室性心律失常持续时间比较短。实验组动脉血压降低到(32.67±6.89)mmHg(P<0.001)。结论山楂提取物具有拮抗地高辛诱导心律失常作用。

〔关键词〕山楂摄取物；心律失常；地高辛

山楂中主要含黄酮类化合物、有机酸、微量元素及氨基酸等〔1〕。研究证明，山楂提取物能显著降低家兔和大鼠的血脂，并对动脉粥样硬化有治疗作用〔2〕。山楂中的黄酮苷及复杂的二聚黄烷和多聚黄烷类，有显著的扩张血管、降低血压效果〔3〕。另外，山楂还具有增加心肌收缩力、减慢心律的作用；可扩张冠状动脉并降低心肌耗氧量，改善心肌的血液供应，并能降低外周阻力，对心血管系统起到改善作用〔4〕。洋地黄中毒死亡通常是由于致命的心律紊乱〔5〕。尽管已有报道山楂提取物可以抑制乌头碱、氯化钙和肾上腺素所致的心律失常〔6〕。但是山楂提取物对地高辛诱导心律失常的作用未见相关报道。因而，本研究评价山楂提取物对地高辛诱导大鼠心律失常的拮抗作用。

1材料和方法

1.1试剂山楂提取物购于临沂爱康药业有限公司，批号AKH010-A，然后溶于0.9% NaCl，配成5 mg/ml溶液(pH7.4);地高辛注射液购于杭州民生药业有限公司(国药准H33021711)。

1.2动物及分组雄性Wistar大鼠，体重250～300 g(山西医科大学实验动物中心提供)，用随机数字表法分为对照组(n=8，同时滴注地高辛和0.9%NaCl)及实验组(n=8)，同时滴注地高辛和山楂提取物。

1.3方法

1.3.1手术操作取Wistar大鼠，称重，戊巴比妥钠(40 mg/kg)腹腔注射麻醉，先分离出大鼠右侧颈动脉，一手用显微外科镊子在靠近头侧结扎处小心夹起颈动脉,另一手用显微外科直剪小心在颈动脉上剪一斜口，小心将管插入,然后结扎固定，连接多导生理仪连续监测大鼠血压。左、右颈内静脉也同样插管，滴注山楂提取物或0.9%NaCl。

1.3.2地高辛诱导心律失常在研究开始前，6只大鼠被用于明确地高辛诱导心律失常的剂量。地高辛通过左颈内静脉滴注，起始剂量是5 μg·kg-1·min-1，滴注时间是60 min。如果没有观察到心律失常(QRS波延长；室性心律失常)，地高辛剂量逐渐增加到40 μg·kg-1·min-1〔7〕。最终，40 μg·kg-1·min-1的地高辛滴注10 min时观察到室性心律失常。比较各组大鼠QRS波延长间期、室性期前收缩持续时间、室性心动过速和室颤的持续时间。

1.3.3提取物滴注两组大鼠稳定30 min后(心率:340～380次/min;收缩压:100～140 mmHg)，通过左颈内静脉滴注地高辛(40 μg·kg-1·min-1)。同时，对照组以0.9%NaCl通过右颈内静脉滴注(1 ml·kg-1·min-1)；而实验组通过右颈内静脉滴注山楂提取物(4 mg·kg-1·min-1)。地高辛、0.9%NaCl和山楂提取物滴注时间都持续60 min,0.9%NaCl和山楂提取物滴注量相等。

1.3.4数据测量标准肢体导联心电图置于大鼠胸腔四肢附近的四个区域，记录心电图波形。心电图仪在整个实验过程中持续监视大鼠心电图，根据心电图分析心律失常。从心电图记录计算心率。多导生理仪连续记录大鼠动脉血压。

1.4统计学方法采用SPSS17.0软件进行Wilcoxon秩和检验及单因素方差分析。

2结果

2.1山楂提取物对大鼠心电图和存活的影响大鼠稳定以后(心率和血压在30 min内稳定)，对照组和实验组大鼠开始滴注地高辛，导致QRS间期延长、心动过缓、心脏停搏。对照组和实验组大鼠心动过缓分别起始于滴注后(21.03±1.67)min和(27.12±2.61)min。与对照组(49.86±2.34 min)相比，实验组(62.13±2.20 min)大鼠的存活时间更长(P=0.002)。实验组有4只大鼠在地高辛滴注后还存活。实验组与对照组间QRS波延长起始时间无显著差别〔(29.94±2.47)min vs (28.01±1.99)min,P=0.812〕。

2.2山楂提取物对大鼠心率的影响尽管在稳定期间两组大鼠心率相似，但在滴注地高辛后两组大鼠心率逐渐降低，对照组大鼠心动过缓更加明显(P=0.01)。对照组大鼠在地高辛和0.9%NaCl滴注期间最大QRS期间更长(P=0.001)。实验组QRS持续时间在滴注期长于稳定期(P=0.001)，见表1。

表1　实验组和对照组测量数据的比较±s,n=8)

与本组稳定期比较：1)P<0.01；与对照组地高辛滴注期比较：2)P<0.001

2.3山楂提取物对大鼠心律失常的影响实验组大鼠室性期前收缩持续时间为(29.25±1.98) min，室性心动过速持续时间是(39.19±8.02)min,室颤时间是(11.94±4.46)min,均低于对照组(48.56±7.19)min、(41.25±7.03)min及(23.12±6.71)min(均P<0.001)。

2.4山楂提取物对大鼠血压的影响各组大鼠的动脉血压都降低。实验组大鼠血压降低幅度更显著(P<0.05)。对照组大鼠动脉血压在滴注期降低(P<0.05)。见表2。

表2　各组大鼠研究期间动脉血压的变化

与对照组同时点比较：1)P<0.05，与本组0 min比较：2)P<0.05

3讨论

本研究表明，山楂摄取物对地高辛诱发大鼠心律失常具有保护作用。由于不同大鼠诱导产生不同类型的心律失常，本研究采用QRS间期延长以及室性期前收缩、室性心动过速和室颤的持续时间作为心律失常的标志。结果证实,与对照组相比，实验组大鼠室性心律失常均下降。

研究已经发现，地高辛引起动物心脏毒性模型，包括多种室性和室上性心律失常〔7〕。而且，QRS间期延长早于其他心律失常出现。动物实验证实，过量洋地黄与心肌细胞膜上Na+-K+-ATP酶结合而抑制该酶活性，使心肌细胞膜内外Na+-K+主动耦联转运受损，心肌细胞内Na+浓度升高，使细胞膜上Na+-Ca2+交换增多，细胞内Ca2+增多，肌浆网内Ca2+也增多，导致正性肌力和心律失常〔8〕。最近Gonano等〔9〕人证实激活的钙-钙调蛋白激酶Ⅱ通过磷酸化Ryanodine受体，导致肌浆网内Ca2+漏出，调节哇巴因诱发的心律失常和毒性影响。山楂提取物抗心律失常的确切机制目前尚不清楚。在一项研究中发现山楂提取物可以延长动作电位时程并且推迟复极；另一方面，还可以阻止心肌细胞K+外流，这与Ⅲ类抗心律失常药物的作用机制一样〔10〕。山楂提取物抗心律失常的机制可能是通过调节相关信号通路。同时，研究发现山楂当中的皂苷和黄酮化合物分别具有降低血压和抗心律失常作用〔11〕。

山楂植物提取物是世界公认的药物来源。山楂中分离得到的物质主要有黄酮类、黄烷及其聚合物类、有机酸类，另外还有三萜类和甾体类等。Salehi等〔12〕研究发现，在缺血性心肌损伤大鼠模型中，山楂提取物具有抗低血压和心律失常的效应。此外，Swaminattan等〔13〕人实验结果提示山楂提取物减少大鼠心脏缺血再灌的氧化应激反应，抑制细胞凋亡，具有保护心脏的作用。本研究进一步证实了山楂提取物对地高辛诱发的大鼠心律失常具有保护作用。

本研究具有一定的局限性。首先，我们没有具体分析山楂提取物中各种不同成分对地高辛诱发的大鼠心律失常的影响。其次，地高辛诱导大鼠心律失常剂量是40 μg·kg-1·min-1，但没有进一步的增加剂量，还需要在临床上进一步的研究。

4参考文献

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3张劲松.山楂的药理作用和临床应用新说〔J〕.中国中医药咨讯,2012;4(3):97．

4楼陆军,罗洁霞,高云.山楂的化学成分和药理作用研究概述〔J〕.中国药业,2014;23(3):92-4.

5王和平,韩艳艳,王建明,等.苦参总碱贴片抗心律失常作用的实验〔J〕.中医药信息，2008;25(5):80-1．

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10Muller A,Linke W,Klaus W.Crataegus extract blocks potassium currents in guinea pig ventricular cardiac myocites〔J〕.Planta Medica,1999;65(4):335-9.

11Chang Q,Zou Z,Harrison F,etal.Hawthorn〔J〕.J Clin Pharmacol,2002;42(6):605-12.

12Salehi S,Long SR,Proteau PJ,etal.Hawthorn(Crataegaus monogyna jacq.) extract exhibits atropine-sensitive activity in a cultured cardiomyocyte assay〔J〕.J Nat Med,2009;63(1):1-8.

13Swaminattan JK,Khan M,Mohan IK,etal.Cardioprotective properties of Crataegus oxycantha extract against ischemia-reperfusion injury〔J〕.Phytomedicine,2010;17(10):744-52.

〔2015-12-30修回〕

(编辑曹梦园)

〔中图分类号〕R514.7

〔文献标识码〕A

〔文章编号〕1005-9202(2016)11-2628-02；

doi：10.3969/j.issn.1005-9202.2016.11.027

第一作者：李馨(1980-)，女，主治医师，在读硕士，主要从事心血管内科疾病研究。