小儿健胃糖浆质量标准提升的研究

袁红英，杨雪萍

(1.解放军第88医院药剂科，山东 泰安　271000； 烟台市福山区人民医院药剂科，山东 烟台　265500)

小儿健胃糖浆质量标准提升的研究

袁红英1*，杨雪萍2#

(1.解放军第88医院药剂科，山东 泰安271000； 烟台市福山区人民医院药剂科，山东 烟台265500)

摘要目的：提升小儿健胃糖浆的质量标准。方法：用薄层色谱法对麦冬、陈皮进行鉴别；用高效液相色谱法对芍药苷含量进行测定，采用C18色谱柱(250 mm ×4.6 mm，5 μm)，以乙腈-含0.04%三乙胺的0.1%冰醋酸溶液(V ∶V=12 ∶88)为流动相，流速为1.0 ml/min，检测波长为230 nm。结果：在薄层色谱中，麦冬、陈皮斑点清晰，易于识别；芍药苷含量在0.403～2.015 μg呈良好的线性关系，平均回收率为99.17%，RSD为1.14%。结论：建立的方法简便、重复性好，可很好地控制该药品的质量。

关键词小儿健胃糖浆； 质量标准； 芍药苷

小儿健胃糖浆为治疗小儿厌食的有效药，由沙参、稻芽、白芍、玉竹、麦芽(炒)、山楂、麦冬、陈皮等8味中药制成，具有健脾消食、清热养阴的作用，常用于脾胃阴虚所致的食欲减退、消化不良等。该药为《中华人民共和国卫生部药品标准：中药成方制剂(第十册)》收载品种[1]，但原标准未对该药成分的鉴别及含量测定做出规定。为保证临床疗效，本研究对麦冬、陈皮进行薄层色谱鉴别考察，并对芍药苷的含量测定进行方法学考察。

1材料

1.1仪器

岛津LC-2010高效液相色谱仪(自动进样、四元泵、柱温箱，日本岛津公司)；C18色谱柱(250 mm×4.6 mm，5 μm，大连依利特分析仪器有限公司)；超声提取仪(HENGAO HS3120)；电子天平(AE-240型)。

1.2药品与试剂

试验样品为市售小儿健胃糖浆(广东益和堂制药有限公司)；麦冬对照药材(中国药品生物制品检定所，121013-200607)、橙皮苷对照品(中国药品生物制品检定所，110721-200613)、芍药苷对照品(中国药品生物制品检定所，736-9407)。硅胶G板(青岛海洋化工试剂厂)；乙腈、三乙胺、冰醋酸均为色谱纯；水为纯化水；其他试剂均为分析纯。

2方法与结果

2.1定性鉴别

2.1.1麦冬的鉴别：精密量取本品40 ml，置于圆底烧瓶中，加氯仿20 ml及浓盐酸2 ml，于沸水浴回流提取1 h，放冷，转移至分液漏斗中，氯仿层弃去，余水液加氯仿提取3次，每次20 ml，合并氯仿液，蒸干，残渣加甲醇1 ml使之溶解，制成供试品溶液。取麦冬对照药材2 g，置于圆底烧瓶中，加水15 ml、氯仿20 ml及浓盐酸2 ml，于沸水浴回流提取1 h，其余操作同供试品溶液，制成对照药材溶液[2-5]。按照《中华人民共和国药典》(2015版)[6]中的薄层色谱法，分别吸取对照药材溶液2 μl、供试品溶液10 μl，点于硅胶G板上，以甲苯-丙酮(V∶V=9 ∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，于105 ℃下烘至斑点显色清晰。供试品色谱在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

2.1.2橙皮苷的鉴别：精密量取本品20 ml，置于分液漏斗中，以乙醚洗涤3次，每次20 ml，取水液以醋酸乙酯提取3次，每次20 ml；合并醋酸乙酯液，置于分液漏斗中，以5%碳酸氢钠溶液洗涤3次，每次20ml，水液弃去；取醋酸乙酯液，以水洗至近中性，挥干乙酸乙酯，残渣加甲醇1 ml使之溶解，制成供试品溶液。取橙皮苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1 ml含1 mg的溶液，制成对照品溶液[2，7]。按照《中华人民共和国药典》(2015版)[6]中的薄层色谱法，分别吸取供试品溶液10 μl、对照品溶液5 μl，于硅胶G薄层板上，以醋酸乙酯-甲醇-水(V∶V∶V=100 ∶17 ∶13)为展开剂，展开约3 cm，取出，晾干；以甲苯-醋酸乙酯-甲酸-水(V∶V∶V∶V=20 ∶10 ∶1 ∶1)的上层溶液为展开剂，进行二次展开，展开约10 cm，取出，晾干，喷1%三氯化铝乙醇试液，于紫外光灯(365 nm)下检视，供试品色谱在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

2.2含量测定

2.2.1色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-含0.04%三乙胺的0.1%冰醋酸溶液(V∶V=12 ∶88)为流动相，检测波长230 nm，流速1.0 ml/min[2，6]。理论板数按芍药苷峰计应不低于2 000。

2.2.2溶液的制备：精密吸取本品20 ml，置于分液漏斗中，依次加乙醚、醋酸乙酯分别洗涤2次，每次25 ml，取余水液以水饱和的正丁醇提取5次，每次25 ml，合并正丁醇溶液，蒸干，残渣加流动相使之溶解，定量转移至10 ml容量瓶中，并加流动相至刻度，摇匀，以微孔滤膜(0.45 μm)滤过，制成供试品溶液；取芍药苷对照品适量，精密称定，加流动相制成每1 ml含40 μg的溶液，以微孔滤膜(0.45 μm)滤过，制成对照品溶液；按处方比例不加白芍和牡丹皮药材，制得缺白芍和牡丹皮的模拟制剂，按供试品溶液制备的方法，制成阴性对照溶液[8-10]。

2.2.3方法学考察：(1)线性关系考察：取五氧化二磷中干燥至恒质量的芍药苷对照品适量，精密称定，加流动相制成0.403 mg/ml的对照品溶液。分别精密吸取上述溶液1、2、3、4、5 ml置于10 ml容量瓶中，加流动相稀释至刻度；分别进样10 μl，以芍药苷进样量(X，μg)为横坐标，以相应的峰面积(Y)为纵坐标，计算得线形回归方程，Y=1 576 551.42X-1 674.11，r=0.999 9[11-13]。结果表明，芍药苷进样量在0.403～2.015 μg范围内线性关系良好。(2)阴性对照试验：取阴性对照溶液，按供试品溶液测定方法检测，在芍药苷保留时间处无吸收，见图1。(3)稳定性试验：取供试品溶液，分别于0、4、8、16、24 h测定1次。结果显示，RSD=1.15%(n=5)，表明供试品溶液在24 h内稳定性良好。(4)精密度试验：取芍药苷对照品溶液(40.45 μg/ml)，连续进样5次，计算RSD。结果显示，RSD=0.89%(n=5)，表明仪器精密度良好。(5)重复性试验：精密吸取样品5份各20 ml，按供试品液的制备方法制备样品，测定。结果显示，平均值为0.435 mg/g，RSD=1.14%。(6)加样回收率试验：精密吸取样品5份各10 ml，至于50 ml容量瓶中，分别精密加入用流动相溶解的芍药苷对照品溶液(0.369 6 mg/ml)各1 ml，加水至刻度，摇匀，按供试品溶液的制备方法制备，测定，计算回收率，结果见表1。(7)3批样品含量测定：取本品3批，分别按供试品液的制备方法制备，测定。结果显示，3批样品中芍药苷含量分别为16.24、15.23、16.10 μg/ml。

A.对照品；B.样品；C.阴性对照A.control；B.sample；C.negative control图1　HPLC图Tab 1 HPLC chromatogram

取样相当量/mg添加量/mg测得量/mg回收率/%平均回收率/%RSD/%0.36970.36960.738199.680.36970.36960.736899.320.36970.36960.734398.6599.171.140.36970.36960.730497.590.36970.36960.7416100.62

3讨论

本研究采用薄层色谱法分别对麦冬、陈皮进行了鉴别，结果特异性强，重现性良好。对方中稻芽、谷芽、山楂、玉竹、山药等也曾做薄层鉴别，但由于无特征性斑点、阳性结果不明显或干扰太严重等原因未获成功。

小儿健胃糖浆为含沙参、稻芽、白芍等药材的复方制剂，原标准无含量测定。沙参、稻牙中主要含多糖类、酶类等成分，本方其他药材中亦含有该类成分，专属性较差，含量测定研究较少，不适宜作为含量测定指标。白芍亦为方中要药，芍药苷专属性较强，含量测定的方法报道较多，高效液相色谱法比较成熟。因此，综合以上因素考虑，本试验采用高效液相色谱法对该制剂中的芍药苷进行含量测定。

在高效液相色谱法测定芍药苷含量的过程中，对水饱和的正丁醇提取次数进行优选，结果显示，用水饱和的正丁醇提取5次即可提取完全。

本法测定芍药苷的含量，有效成分分离较好，该制剂中其他成分对测定基本不形成干扰，并且稳定、准确、重现性好，可作为小儿健胃糖浆含量测定的检测方法。

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Study on Improvement of Quality Standard of Xiao’erjianwei Syrup

YUAN Hongying1, YANG Xueping2

(1.Dept.of Pharmacy, the 88th Hospital of PLA, Shandong Tai’an 271000, China; 2.Dept.of Pharmacy, Pepole’s Hospital of Yantai Fushan Districst, Shandong Yantai 265500, China)

ABSTRACTOBJECTIVE：To improve the quality standard of Xiao’erjianwei syrup. METHODS: ophiopogonis radix and citri reticulatae pericarpium in Xiao’erjianwei syrup were identified by TLC and paeoniflorin was determined by HPLC. The analysis was carried out on C18column(250 mm×4.6 mm, 5 μm)by HPLC. The mobile phase was acetonitrile-0.04% triethylamine and 0.1% acetic acid(V ∶V=12 ∶88). The flow rate was 1.0 ml/min and the detection wavelength was at 230 nm. RESULTS: TLC spots of ophiopogonis radix and citri reticulatae pericarpium were quite clear and easy to be identified; and the contents of paeoniflorin show a good linear range in 0.403-2.015 μg. The average recovery was 99.17% and RSD was 1.14%. CONCLUSIONS: The method is simple, rapid with a good reproducibility, which can be used for the quality control of Xiao’erjianwei syrup.

KEYWORDSXiao’erjianwei syrup; Quality standard; Paconiflorin

中图分类号R927.11

文献标志码A

文章编号1672-2124(2016)05-0630-03

DOI10.14009/j.issn.1672-2124.2016.05.022

(收稿日期：2015-11-27)