Agilent1100、1200液相色谱仪的维护与维修

2016-06-24宋学英吴英婷樊媛洁

分析仪器 2016年3期

关键词：漏液液相色谱仪柱塞

宋学英　杨　华　吴英婷　樊媛洁

(首都医科大学医学实验与测试中心，北京 100069))

仪器使用与维修

Agilent1100、1200液相色谱仪的维护与维修

宋学英杨华吴英婷樊媛洁

(首都医科大学医学实验与测试中心，北京 100069))

摘要：介绍了Agilent1100、1200液相色谱仪的维护与维修的方法。通过日常对仪器的观察，发现故障的发生原因，提出解决方法。有助于延长仪器的使用寿命，保证仪器的完好率与使用率。

关键词：液相色谱仪维护

高效液相色谱(HPLC)具有高分离效率、高选择性和高灵敏度的特点，目前已成为化学、生物化学、医药卫生、石油化工和环境保护等领域中不可缺少的检测工具[1]。安捷伦1100、1200液相色谱仪是8～10年以前的产品，目前这些仪器由于购买年限较长，早已过了保修期，进入了故障频发期，如果总是请厂家上门维修即花钱又耽搁时间，影响仪器的使用，所以做好仪器的日常维护工作，学会自己动手排除一些小故障十分必要，同时可节省时间保证仪器的正常使用。

1液相色谱的工作原理

色谱分离原理：溶于流动相(mobile phase)中的各组分经过固定相时，由于与固定相(stationary phase)发生作用(吸附、分配、离子吸引、排阻、亲和)的大小、强弱不同，在固定相中滞留时间不同，从而先后从固定相中流出[1](图1)。

HPLC系统一般由输液泵、脱气机、进样器、色谱柱、检测器、数据记录及处理装置等组成，输液泵、自动进样器、色谱柱、检测器是关键部件[2，3]。

图1　液相色谱仪的工作原理

2Agilent1100、1200日常维护与故障排除

2.1泵的维护与故障排除

2.1.1泵的工作原理

高压输液泵是液相色谱仪分析系统中重要单元部件，用于将流动相和样品输入到色谱柱和检测器中，从而使样品得到分析，其性能的好坏直接影响整个仪器和分析结果的可靠性。

液相色谱仪的高压输液泵有两种类型，即通常称谓的恒流泵和恒压泵。恒流泵使输出的液体流量稳定；而恒压泵则使输出的液体压力稳定。恒流泵中有往复泵，注射泵。

Agilent1100、1200泵是一个累积型柱塞往复串联泵，累积型柱塞往复泵有两个泵头，以串联方式连接在一起，这样可以提供平稳的液流。之所以如此是因为两个泵腔排液体积不同，第一级泵腔是第二级泵腔的2倍。整个泵系统包含：一个入口单向阀(主动阀)和一个出口单向阀(purger阀)，2个柱塞杆和2个柱塞杆密封垫，阻尼器和压力传感器。原理示意图如图2所示，实物图如图3所示。

图2　Agilent1100、1200液相色谱仪泵原理示意图

图3　Agilent1100 1200液相色谱仪泵的实物图

2.1.2泵故障排除与日常维护

在日常工作中常常可以遇到系统超压的现象，首先应断开泵出口的管路，排除进样器以后和泵以后故障的原因。如果是泵的故障，解决方法：首先应该检查出口阀的阀芯，观察阀芯是否变黑，如果阀芯变黑，更换出口阀芯(注：出口阀芯是一次性的，不可超声清洗后再使用，否则会污染整个系统。)，便可以解决问题。如果更换了出口阀芯，仍不能解决问题，可更换柱塞杆密封垫，基本上可解决出现泵超压的问题[4]。

泵压低或无泵压，应检查流路，看是否有漏液情况或溶液根本就没进入系统中。一般系统漏液，会有漏液提示，无论是泵、自动进样器、柱温箱及检测器均有提示。如果是没有泵进溶液，应检查溶剂过滤头和主动阀。溶剂过滤头的检查方法：把溶剂过滤头拔掉，看流动相是否会因重力的作用而流下，如果溶剂过滤头被污染，可用30%硝酸浸泡，然后再用超纯水清洗干净，玻璃材质溶剂过滤头不可用超声的方法清洗。排除了溶剂过滤头的原因后，应检查主动阀，看进入主动阀的管路内是否有气泡，如果有，说明是主动阀芯故障，这时应把泵的电源关闭，拔掉主动阀电源，拆开主动阀芯，用50%异丙醇超声清洗主动阀芯10分钟，再把主动阀复原，打开泵的电源，观察主动阀是否能够正常泵液，如果还不能解决问题，说明主动阀芯过脏，如果有备用的阀芯，请更换。如果没有，实验又不能中断，可用10%的磷酸超声清洗2～3分钟，然后用超纯水把酸清洗掉，这样清洗一般可解决问题。注意：用磷酸清洗时时间不宜过长，否则会损坏阀芯中的金属。

主动阀漏液：如果有备用的主动阀，可换一个新的主动阀，如果没有，可试着拆开主动阀体的四个六角形螺丝，更换主动阀体上的密封垫(图4)。

图4　主动阀拆开后各个部件

泵的日常维护：首先流动相要清洁，要使用色谱级的试剂和超纯水作为流动相，如果使用缓冲盐，要过0.22μm的滤膜。水相使用不超过48小时且要用棕色瓶装，因为水特别是缓冲盐在阳光照射下易长菌。如果有机相用的是乙腈，要把原来瓶中的试剂倒掉换成新试剂，用棕色试剂瓶装，因为乙腈长时间在阳光的照射下易产生聚合现象，出现絮状沉淀。如果泵带有seal wash装置，一定要打开seal wash(10%异丙醇)装置，且要定期更换[2]。实验完后，要把含有缓冲盐的流动相用等比例的不含盐的流动相替换，用甲醇冲洗系统，使系统保存在甲醇中，然后将水相的流路用甲醇灌注，以免长时间不用时管路内长菌[5]。

2.2Agilent1100、1200自动进样器的故障排除与维护

自动进样器经常出现的故障有进样针和进样针座堵塞、六通阀中的转子损坏及由于突然停电等原因造成的机械手被卡死，不能移动等故障。如果发现机械手被卡死的故障，关闭自动进样器的电源，过1～2分钟后再开启电源，让自动进样器自检或点击进样器的复位键，使其重新复位，如果还不能解决问题，可转动自动进样器后面的丝杠，使机械手转出后再点击复位键，问题即可解决。

如果发现系统压力升高，在排除了泵及色谱柱、检测器的原因后，可以检查进样针和进样针座是否被堵塞，清洗进样针座的方法：可将六通阀上的管线5、6反接(如图5所示)，设流速为1mL/min冲洗，(注意：不要让液体流到漏液传感器上)或将针座拆下来，接到泵的出口上冲洗针座，洗干净后，可把针座再装回去即可。