抗眩颗粒对内分泌型高血压大鼠模型的影响

王希东，郝少君，王　灵，张正臣

解放军第三七一中心医院，河南 新乡 453000



*通信作者

抗眩颗粒对内分泌型高血压大鼠模型的影响

王希东，郝少君，王灵*，张正臣

解放军第三七一中心医院，河南 新乡 453000

[摘要]目的观察抗眩颗粒对内分泌型高血压大鼠模型的影响。方法取造高血压模型成功大鼠72只，按血压高低随机分为6组，每组12只，分别灌服大、中、小剂量抗眩颗粒混悬液、养血清脑颗粒混悬液、卡托普利混悬液和同体积的蒸馏水；空白对照组灌同体积的生理盐水，连续给药7 d。于第7天造模，给药后2 h测各组大鼠血压值。结果与模型组比较，大、中、小剂量抗眩颗粒组、养血清脑颗粒组及卡托普利组大鼠血压(SBP、DBP)均显著降低。与空白对照组比较，模型组血浆ANG-2、ET水平均显著性升高(P<0.01)。与模型组比较，大、中、小剂量抗眩颗粒组、养血清脑颗粒组及卡托普利组大鼠血浆ANG-2水平均显著降低(P<0.01或P<0.05)；大、中剂量抗眩颗粒组、养血清脑颗粒组及卡托普利组大鼠血浆ET水平均明显降低(P<0.05)。结论抗眩颗粒对内分泌型高血压大鼠有良好的改善作用。

[关键词]抗眩颗粒；大鼠；内分泌型高血压模型；养血清脑颗粒；卡托普利片

0引言

眩晕在临床上非常多见，现代医学认为，其发生与脑部微循环功能障碍、血液流变学异常、细胞内自由基损伤等诸多因素有密切关系。目前治疗该疾病的药物较多，西药虽见效快，但持续时间短且不良反应较大。市售中药制剂效果也不太理想，根据多年的临床经验我们研制了抗眩颗粒，该方剂由磁石、夏枯草、葛根、牛膝、钩藤、姜半夏、川芎、丹参组成，具有平肝潜阳、活血通窍、息风定眩的作用，临床用于因高血压、脑动脉硬化、椎基底动脉供血不足、美尼尔氏病、植物神经功能紊乱引起的眩晕、头重足轻、行走不稳等疗效较好。为验证其作用并探讨其作用特点，本研究观察了该颗粒对内分泌型高血压大鼠模型的影响。

1实验材料

1.1药品抗眩颗粒，中国人民解放军第三七一中心医院提供。制法：按处方称取原材料，洗净，加6～8倍水煎煮2次，第1次2 h，第2次2 h，合并煎液，过滤，滤液浓缩至室温，加乙醇使药液含醇量达60%，静置24 h滤过，含醇药液回收乙醇，药液浓缩至相对密度为1.15～1.30，约0.5 kg(80 ℃)。加适量糊精及适量糖粉(约3～4份)混匀，制粒整粒，分装，每袋10 g(每袋相当于原生药24 g)，即得。批号：20110620，口服，每次10 g，每日3次。养血清脑颗粒，天士力制药集团股份有限公司，批号：120802；卡托普利片，常州制药厂有限公司，批号：12032812；氯化钠注射液，河南双核华利药业有限公司，批号：A12050807；丙酸睾酮注射液，上海通用药业股份有限公司，批号：120309，规格：1 mL∶25 mg。大豆油，河南爱厨植物有限公司；试剂盒：ANG-2，R&D,批号：DZE30668.ET，R&D。

1.2动物大鼠，SD，清洁级，由山东省实验动物中心提供，合格证号：0013913。

1.3仪器BP-98A Series大鼠无创血压仪，北京软隆生物技术有限公司；可调式移液器，上海雷勃分析仪器有限公司；TGL-16G台式离心机，上海安亭科学仪器厂。

2实验方法

2.1动物分组及给药取清洁级雄性大鼠120只，每只大鼠造模前连续测大鼠血压3 d，取血压相近的100只大鼠，3次血压平均值作为大鼠初始血压。

随机取12只大鼠作为空白对照组，其余大鼠造内分泌型高血压模型，每日皮下注射丙酸睾酮注射液5 mg/kg造模，每天注射1次，连续造模14 d。空白对照组每日皮下注射相同剂量大豆油。分别于造模第7、14天测大鼠血压值。大鼠收缩压升高15 mmHg以上者为造模成功。第14天，取造高血压模型成功大鼠72只，按血压高低随机分为6组，每组12只，分别灌服大、中、小剂量抗眩颗粒混悬液(10、5、2.5 g/kg，用蒸馏水配成0.5、0.25、0.125 g/mL，2 mL/100 g)、养血清脑颗粒混悬液(2 g/kg，用蒸馏水配成0.1 g/mL，2 mL/100 g)、卡托普利片混悬液(12.5 mg/kg，用蒸馏水配成0.625 mg/mL，2 mL/100 g)和同体积的蒸馏水；空白对照组灌同体积的生理盐水，每天给药1次，连续给药7 d；给药期间仍给造模用药。于第7天造模，给药后2 h(禁食不禁水12 h)测各组大鼠血压值；然后眼眶取血，EDTA抗凝管抗凝，离心取血浆测血管紧张素Ⅱ、内皮素ET含量。

2.2大鼠血浆血管紧张素Ⅱ、内皮素水平测定分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同)、待测样品孔。

在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40 μL，然后再加待测样品10 μL(样品最终稀释度为5倍)。将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。以空白孔调零，450 nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15 min以内进行。以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。

3结果

各组初始血压(SBP、DBP)之间比较差异无统计学意义(P>0.05)，说明分组均匀；造模第7、14天，与空白对照组比较，模型组血压显著升高(P<0.01)，但在第7天，大鼠收缩压多未升高15 mmHg以上，在第14天，大鼠收缩压均升高15 mmHg以上，说明造模型成功，符合模型要求。给药后，与模型组比较，大、中、小剂量抗眩颗粒组、养血清脑颗粒组及卡托普利组大鼠血压(SBP、DBP)均显著降低，差异有统计学意义(P<0.01)。见表1。

表1　抗眩颗粒对内分泌型高血压大鼠模型血压的影响(mmHg，n=12)

注：与模型组比较，*P<0.05，**P<0.01

与空白对照组比较，模型组血浆ANG-2、ET水平均显著性升高(P<0.01)，说明造模型成功。与模型组比较，大、中、小剂量抗眩颗粒组、养血清脑颗粒组及卡托普利组大鼠血浆ANG-2水平均显著降低(P<0.01或P<0.05)；大、中剂量抗眩颗粒组、养血清脑颗粒组及卡托普利组大鼠血浆ET水平均明显降低(P<0.05)。见表2。

表2　抗眩颗粒对内分泌型高血压大鼠模型血浆ANG-2、ET水平的影响

注：与模型组比较，*P<0.05，**P<0.01

4讨论

我院研制的抗眩颗粒，方中用磁石、钩藤重在镇肝潜阳，牛藤补益肝肾，引药下行；川芎、丹参益气活血，葛根清浑发散；川芎益走散，上行头目巅顶，理气通脉；夏枯草祛肝风，行经络；半夏躁湿化痰，和胃上呕，痰湿不留，眩晕乃止[1-5]。组方以镇肝潜阳为主，辅以活血通络、化痰除湿。在先期应用汤剂，结合临床应用效果，不断调整处方的药物组成及用量的基础上，最终定下处方。经过筛选，加工提取制成方便服用、易于吸收的颗粒制剂。为确保其制剂质量，前期进行了工艺标准和质量标准[6]及药理[7-8]的研究，包括抗眩颗粒对小鼠微循环的影响、抗眩颗粒的镇静作用、抗眩颗粒对大鼠血瘀模型的影响。为探讨其疗效原理，本文对大鼠皮下注射丙酸睾丸素，成功建立了大鼠内分泌型高血压模型，在造模第17、14天，大鼠血压均显著升高，在第14天大鼠收缩压均升高15 mmHg以上，符合模型要求；模型组血浆ANG-2、ET水平显著性升高。与模型组比较，大、中、小剂量抗眩颗粒组、养血清脑颗粒组及卡托普利组内分泌型高血压大鼠模型血压(SBP、DBP)均显著降低；与模型组比较，大、中剂量抗眩颗粒组、养血清脑颗粒组及卡托普利组内分泌型高血压大鼠模型血浆ANG-2水平均显著降低，小剂量抗眩颗粒组可使内分泌型高血压大鼠模型血浆ANG-2水明显著降低；大、中剂量抗眩颗粒组、养血清脑颗粒组及卡托普利组内分泌型高血压大鼠模型血浆ET水平均明显降低。提示抗眩颗粒对内分泌型高血压大鼠模型有好的改善作用。本实验为抗眩颗粒的临床应用提供了依据。

参考文献：

[1]赵智强,陆跃鸣,周仲瑛,等.天麻钩藤饮等三方对高血压大鼠模型降压作用的药效动力学研究[J].中药药理与临床,1999,15(4):12-15.

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[3]顾施建.钩藤提取物对实验性高血压小鼠降压作用的实验研究[D].湖北:湖北中医药大学,2010.

[4]郭荣年,吴秀香,郭瑞珍,等.葡萄籽原花青素对肾血管性高血压大鼠血管内皮细胞功能的影响[J].中国现代医学杂志,2012,22(23):23-26.

[5]王桂红,刘丹,姜金凤,等.霉茶缓释片对肾性高血压大鼠血压及活性物质的影响[J].中华中医药学刊,2009,27(3):546-548.

[6]王希东,郝少君,李文俊,等.抗眩颗粒的制备及葛根素的含量测定[J].中国药师,2014,17(8):1279-1261.

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[8]王希东,郝少君,李文俊,等.抗眩颗粒对小鼠脑膜微循环的影响[J].实用药物与临床,2015,18(6):653-656.

Effect of anti-glare granules on the rat model of endocrine hypertension

WANG Xi-dong,HAO Shao-jun,WANG Lin*,ZHANG Zheng-chen

(371 Central Hospital of PLA,Xinxiang 453000,China)

[Abstract]ObjectiveTo observe the effect of anti-glare granules on the endocrine hypertensive rat model.MethodsSeventy-two hypertensive model rats were selected and randomly divided into 6 groups according to the level of blood pressure,12 rats in each group,and they were given large,medium and small doses of anti-glare granules suspension,yangxueqingnao granule suspension,captopril suspension and the same volume of distilled water;blank control group were given the same volume of physiological saline,administered for 7 d continuously.The blood pressure of rats after 7 d and at 2 h after drug delivery was measured.ResultsCompared with model group,the blood pressure (SBP,DBP) of large,medium and small dosage of anti-glare granule groups,yangxueqingnao granule group,and captopril group were significantly decreased;compared with blank control group,the serum ANG-2 and ET levels of model group were significantly decreased (P<0.01);compared with model group,the ANG-2 levels of large,medium and small dosage of anti-glare granule groups,yangxueqingnao granule group,and captopril group were significantly decreased (P<0.01 or P<0.05),the ET levels of large and medium dosage of anti-glare granule groups,yangxueqingnao granule group,and captopril group were significantly decreased (P<0.05).ConclusionAnti-glare granules have a good improvement effect on endocrine-type hypertensive rat model.

Key words：Anti-glare granules;Rat;Endocrine-type hypertension model;Yangxueqingnao granule;Captopril tablets

收稿日期：2015-08-05

基金项目：河南新乡重点科技攻关(ZG14013)

DOI:10.14053/j.cnki.ppcr.201604003