通心络对急性心肌梗死患者PCI术后血清EMPs及MMP-9的影响*

李红昆，陆永光，严　华，黄军章，何东明，仇昌智

(广西壮族自治区钦州市第二人民医院心血管内科　535000)



通心络对急性心肌梗死患者PCI术后血清EMPs及MMP-9的影响*

李红昆，陆永光△，严华，黄军章，何东明，仇昌智

(广西壮族自治区钦州市第二人民医院心血管内科535000)

[摘要]目的探讨通心络胶囊对急性心肌梗死(AMI)患者接受急诊冠状动脉介入性治疗(PCI)治疗后血清内皮细胞微粒(EMPs)及基质金属蛋白酶9(MMP-9)的影响。方法选取该院2012年1月至2014年12月AMI并接受急诊PCI患者共128例，按数字随机法分为通心络组(A组，n=65)和常规治疗组(B组，n=63)，A组在B组基础上加用通心络胶囊2粒，每日3次。分别于急诊PCI术前及术后7 d抽血检测患者血清EMPs及MMP-9。结果与B组相比，A组在治疗7 d后，血清EMPs 和MMP-9差异有统计学意义(P<0.05)。AMI患者血清EMPs 和MMP-9呈正相关(P<0.01)。结论对于AMI PCI术后，在常规治疗基础上，通心络可以进一步抑制炎性反应，稳定斑块，改善内皮细胞功能的。

[关键词]心肌梗死；冠状动脉疾病；基质金属蛋白酶9；内皮细胞微粒；通心络

急性心肌梗死(acute myocardial infarction，AMI)多为冠状动脉粥样硬化基础上出现的斑块破裂及血栓形成所造成的。动脉粥样硬化病变的形成是动脉内膜内皮细胞对损伤作出的炎症-增生反映的结果。内皮细胞微粒(endothelial microparticles，EMPs)是内皮细胞受到各种刺激后从其表面释放的小囊泡，在冠心病中，EMPs在一定程度上可反映血管内皮细胞的功能状态，且与冠心病的发展密切相关[1]。基质金属蛋白酶9(matrix metallo proteinase-9，MMP-9)在体内主要参与细胞外基质的降解、重构及炎性反应，在冠心病中主要可影响斑块的稳定性[2]。本研究主要通过观察AMI患者冠状动脉介入性治疗(PCI)术前、术后患者血清EMPs及MMP-9的变化，以探讨通心络对AMI PCI术后患者内皮细胞的保护作用。

1资料与方法

1.1一般资料选取本院2012年1月至2014年12月患有AMI并接受急诊PCI患者共128例，按随机数字法分为通心络组(A组，n=65)和常规治疗组(B组，n=63)。两组患者年龄，性别，吸烟，合并高血压、糖尿病等差异均无统计学意义(P>0.05)。A组和B组在发病至再灌注时间、Killp分级、支架植入数量、药物治疗[(包括β受体阻滞剂、他汀类药物、血管紧张素转化酶抑制剂(ACEI)或血管紧张素受体抑制剂(ARB)]等方面比较差异无统计学意义(P>0.05)，见表1。排除标准：严重感染；自身免疫疾病；使用免疫抑制剂；恶性肿瘤；甲状腺疾病和严重肝肾功能异常。

1.2方法

1.2.1治疗方法A、B组入选患者均在入院后接受急诊PCI，术前给予300 mg阿司匹林，300 mg氯吡格雷，80 mg阿托伐他汀钙片，术后给予低分子肝素、ACEI或ARB、β-受体阻滞剂、阿司匹林肠溶片、氯吡格雷片(波立维)、阿托伐他汀钙片等药物。A组在此治疗基础上加用通心络胶囊2粒(每粒0.26 g)，每日3次。

1.2.2血样采集及检测MMP-9检测：采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测试，试剂盒由武汉华美生物有限公司提供。取外周静脉血5 mL，室温静置30 min，3 000 r/min 离心15 min分离血清，留取上层血清在-80 ℃冰箱中，3个月内同批检测，操作按照说明书严格进行。EMPs检测：治疗前后采集静脉血3 mL于真空枸杞酸盐抗凝管中，160 g离心10 min获取富含血小板血浆后，1 500 g离心6 min获取血小板贫瘠血浆。取50 μL血小板贫瘠血浆，加抗体CD42-异硫氰酸荧光素(FITC)、抗CD31-藻红蛋白(PE)0.5 μg或等量同型对照抗体(PE标记小鼠IgG，FITC标记小鼠IgG，美国BD公司)，室温下孵育20 min后加1 mL磷酸盐缓冲液(PBS)，用流式细胞仪检测EMPs水平。检测过程在血样收集后4 h内完成。EMPs定义为直径小于1.0 μm且CD31+/42-阳性的微粒。

表1　两组发病及治疗资料比较

2结果

2.1两组血清中EMPs及MMP-9水平比较PCI术后7 d，A组及B组血清中EMPs及MMP-9水平均明显低于PCI术前(P<0.01)，其中，A组血清EMPs及MMP-9水平低于B组(P<0.05)，见表2。

表2　两组血清中EMPs及MMP-9水平比较

a：P<0.01，与PCI术前比较；b：P<0.05，与B组比较。

2.2EMPs及MMP-9相关性分析分别对AMI患者PCI术前及PCI术后7 d，血清MMP-9与EMPs进行相关分析。结果显示，PCI术前血清MMP-9与EMPs呈正相关(r=0.738，P<0.01)，PCI术后7 d血清MMP-9与EMPs呈正相关(r=0.588，P<0.01)。

3讨论

EMPs是内皮细胞被激活或者凋亡的产物，内皮细胞受到缺氧及多种炎性介质的刺激后便开始在刺激部位出现钙离子聚集，并激活钙蛋白酶使踝蛋白降解导致细胞骨架裂解并重组，使内皮细胞出芽形成EMPs[1]。在冠心病及其他伴有内皮功能障碍的心血管疾病中，EMPs均有明显的增高[2]。EMPs不仅可反应内皮细胞炎症和功能障碍，而且可反过来作用于内皮细胞，进一步加重内皮功能失调，内皮细胞被激活后表达大量黏附分子，使得外周的单核细胞易于附着并迁移入血管内膜，促使各种炎性介质及细胞因子分泌，进一步加重血管内膜炎性反应，促进动脉粥样硬化的发生、发展[3-4]。

MMP-9是一种由可由多种细胞如中性粒细胞、单核巨噬细胞、血管平滑肌细胞及内皮细胞分泌的明胶酶，在细胞外基质的降解及重构过程中起重要作用。研究证实，在冠心病中，尤其是不稳定斑块内易发生破裂斑块肩部区域MMP-9活性明显增加，MMP-9可使斑块胶原纤维降解，纤维帽变薄，从而影响斑块的稳定性[5-6]。

本研究中，AMI后患者PCI术后7 d较术前，血清MMP-9和EMPs水平可明显降低(P<0.01)，且MMP-9和EMPs存在明显的直线相关。可能为随着动脉粥样硬化斑块内炎症细胞及炎性因子逐渐加重，不断分泌大量的MMP-9，在冠心病中主要由巨噬细胞分泌[7]。MMP-9的分泌增多会导致细胞外基质的降解和纤维帽的变薄，增加斑块的不稳定性，不稳定斑块破裂后导致AMI，AMI进一步加重内皮细胞缺血缺氧，释放大量的EMPs，EMPs又反作用于内皮细胞，加重内皮细胞功能障碍，促使各种炎性介质及细胞因子大量分泌[8-9]。因此，EMPs和MMP-9与冠心病患者内皮细胞功能状态和炎性反应密切相关。

通心络是依据传统中药的络病理论而制成的用于治疗缺血性心脑血管疾病的中药复方制剂，具有增强内皮细胞功能、抑制炎症、阻止动脉粥样硬化和促进血管新生的作用。体外研究证实，通心络可以通过PI-3K/Akt/HIF依赖的信号通路，作用于内皮细胞上调内皮型一氧化氮合酶(eNOS)，以及抑制内皮骨架蛋白损伤，保持内皮细胞结构和功能的完整性，进而改善内皮细胞功能[10-11]。还可以通过腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)途径修复了内皮细胞中被软脂酸抑制的抗氧化系统，使硫氧还原蛋白表达增加，增加内皮细胞的抗氧化能力，抑制氧化低密度脂蛋白促进树突状细胞的分化和成熟，使其吞噬能力及分泌细胞因子的活性减弱，减少系统性炎症及局部炎症因子的表达，增加斑块稳定性[12-13]。本试验研究结果显示，PCI术后7 d血清MMP-9和EMPs水平均较术前明显降低(P<0.01)，且A组中EMPs和MMP-9水平较B组下降更加显著(P<0.05)，可能与通心络通过AMPK途径修复细胞的抗氧化系统，减少炎症细胞及炎性因子的释放，从而减少了MMP-9的分泌。另外，通心络也可上调细胞中eNOS，而EMPs正是通过影响内皮细胞eNOS的生成，损伤内皮骨架蛋白，通心络可以起到有效抑制和修复作用，减少对内皮细胞的损害[14-15]。因此通心络可以在常规药物治疗基础上进一步抑制内皮细胞炎性反应，改善内皮细胞功能，增强斑块稳定性。

综上所述，EMPs和MMP-9与冠心病的发展有着密切的关系，及时检测血清EMPs和MMP-9水平不仅可反应冠心病患者血管内细胞的功能状态，而且可评估药物治疗过程中疗效。

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Influence of tongxinluo on blood endothelial microparticles and MMP-9 in patients with acute myocardial infarction after percutaneous coronary intervention*

LiHongkun，LuYongguang△，YanHua，HuangJunzhang，HeDongming，QiuChangzhi

(DepartmentofCardiology，theSecondPeople′sHospitalofQinzhouCity，Qinzhou,theGuangxiZhuangAutonomousRegion535000，China)

[Abstract]ObjectiveTo study influence of tongxinluo on blood endothelial microparticles(EMPs) and matrix metalloproteinase-9(MMP-9) in patients with acute myocardial infarction after percutaneous coronary intervention(PCI).MethodsOne hundred and twenty-eight hospitalized patients with acute myocardial infarction after per-cutaneous coronary intervention were recruited from January 2012 to December 2014，All patients were randomly divided into tongxinluo group (n=65) and control group (conventional treatment，n=63).Tongxinluo group was on the basis of conventional treatment group with tongxinluo capsules 2 plus，3 times a day.We detected the EMPs and MMP-9 of two groups preoperatively and on the 7th postoperatively day.ResultsCompared with the conventional treatment group，blood EMPs and MMP-9 in tongxinluo group were lower after 7 days treatment，the difference was statistically significant (P<0.05).There was a positive correlation between the EMPs and MMP-9(P<0.05).ConclusionFor patients with acute myocardial infarction after percu-taneous coronary intervention，tongxinluo could further inhibit inflammatory reaction,make the plaque stability and improve the function of endothelial cells on the basis of conventional treatment groups.

[Key words]myocardial infarction；coronary artery disease；matrix metalloproteinase-9；endothelial microparticles；tongxinluo

doi:论著·临床研究10.3969/j.issn.1671-8348.2016.03.021

*基金项目：广西自然科学资助基金(2012GXNSFBA053113)；广西卫生厅自筹经费科研课题(Z2011103)。

作者简介：李红昆(1981-)，主治医师，硕士，主要从事冠心病防治研究。△通讯作者，E-mail:evershine_lu@hotmail.com。

[中图分类号]R542.22

[文献标识码]A

[文章编号]1671-8348(2016)03-0354-02

(收稿日期：2015-08-08修回日期：2015-10-26)