血清mindin检测在2型糖尿病肾病早期诊断的意义

赵倩 陈袁 徐台林 蓝雅琳

血清mindin检测在2型糖尿病肾病早期诊断的意义

赵倩 陈袁 徐台林 蓝雅琳

目的 通过检测血清中mindin的水平，分析血清mindin与糖尿病肾损伤的关系。方法 选取2型糖尿病（T2DM）住院患者96例，根据24小时尿微量白蛋白（urinary albumin，UALB）分为正常白蛋白尿组（A组，24 h UALB＜30 mg）48例，微量白蛋白尿组（B组，30 mg≤24 h UALB＜300 mg）25例，大量白蛋白尿组（C组，24 h UALB≥300 mg）23例，正常对照组（N组）20例为体检中心健康人群。检测糖化血红蛋白、肌酐、血清胱抑素C、24 h UALB；酶联免疫吸附试验（ELISA）测定血清mindin水平。所有统计分析结果均使用SPSS 17.0统计学分析软件进行。结果 （1）N组血清mindin水平显著低于

A组、B组、C组（P＜0.05）；C组血清mindin水平明显高于A组和B组，A组、B组、C组、N组分别为（162.87±17.29）pg/mL、（347.19±1 6.01）pg/mL、（453.65±20.86）pg/mL、（89.87±10.20）pg/mL，差异均有统计学意义（P＜0.05）。（2）Pearson相关分析示，血清mindin水平与24 h尿微量白蛋白、血清胱抑素C、尿素氮、肌酐等呈正相关（r=0.788、0.887、0.715、0.512，P＜0.05）；与糖化血红蛋白无相关性（r=0.112，P＞0.05）。结论 血清mindin可能反映糖尿病早期肾损伤，并可能与肾功能损伤程度相关。

mindin；2型糖尿病；糖尿病肾病

糖尿病（diabetes mellitus,DM）是由遗传和环境因素共同引起的一组以糖代谢紊乱为主要表现的临床综合征，目前DM在全世界的患病率正在迅速增加。mindin是一种分泌型细胞外基质蛋白，由spon2基因编码，它最初于1992年在斑马鱼基底层发现，随后证明其参与海马神经元的生长[1]。mindin在多个器官脏器中均有表达。近年来很多研究显示了mindin是免疫反应的重要因子，是细胞外基质的独特的模式识别分子[2]，在启动先天免疫反应对抗病原入侵过程中发挥着重要作用。本研究拟通过测定T2DM患者及DN患者血清mindin的水平并且与临床常规肾病检查项目比较，初步探讨人血清mindin与T2DM患者DN的相关性，以期为早期DN的临床诊疗提供新视点。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2013年6月～2014年3月在遵义市第一人民医院内分泌科住院的2型糖尿病患者共96例，均符合1999年WHO制定的2型糖尿病诊断标准。根据24 h尿微量白蛋白水平，分为3组，正常白蛋白尿组（A组）：T2DM且24 h尿微量白蛋白＜30 mg，48例，其中男23例，女25例，平均年龄（54.69±10.69）岁；微量白蛋白尿组（B组）：T2DM且30 mg≤24 h尿微量白蛋白＜300 mg，其中男12例，女13例，平均年龄（62.90±12.70）岁；大量白蛋白尿组（C组）：T2DM且24 h尿微量白蛋白≥300 mg，其中男11例，女12例，平均年龄（62.61±10.24）岁；正常对照组（N组）：在本院体检中心选取20例健康体检者作为正常对照组，性别和年龄均与2型糖尿病组患者相匹配。其中包括男9例，女11例，年龄（53.75±9.67）岁。研究对象排除1型及继发性糖尿病，去除合并糖尿病急性并发症（如高血糖高渗状态、酮症酸中毒），明显缺氧、心肺肝功能不全、处于应激状态的患者（严重创伤、手术、消耗性疾病、心脑血管事件等）；急慢性感染；合并其他肾脏疾病，如肾病综合征，急性肾小球肾炎，慢性肾小球肾炎、泌尿系感染等；其他系统性、活动性疾病：如急性心梗、脑梗塞、结缔组织病等；使用对实验造成影响的药物。4组间性别构成、年龄、身高、体质量、BMI、血压等一般临床资料和HbA1c无统计学差异，具有可比性。见表1。

1.2 检测方法 糖化血红蛋白采用高压液相色谱法（HPLC），血清胱抑素C、尿素氮、肌酐采用Olympas（AU2700）全自动生化分析仪检测，24小时尿白蛋白排泄率（UAER）采用免疫比浊法测定。

1.3 mindin水平的测定 使用美国R＆D公司的人mindin ELISA试剂盒。

1.4 统计学方法 本实验所有统计分析结果均使用SPSS 17.0统计学分析软件进行。符合正态分布的计量资料使用“x±s”表示；不符合正态分布的计量资料使用中位数（四分位间距）表示；组间比较使用单因素方差分析及q检验进行统计分析；两变量间的相关性，使用Pearson相关分析，以P＜0.05为差异具有统计学意义。

表1 4组临床资料比较（x±s）

2 结果

2.1 血清miindin在各组间的比较 与N组比较，其余3组血清mindin水平增高，差异均有统计学意义（P＜0.05）；与A组比较，B组及C组mindin水平较高，差异有统计学意义（P＜0.05）；C组血清mindin水平高于B组，差异有统计学意义（P＜0.05），随着24 h尿微量白蛋白的升高，血清mindin水平呈升高趋势。见表2。

表2 4组血清mindin水平的比较（x±s）

2.2 相关性分析 将尿微量白蛋白、血清胱抑素C、糖化血红蛋白、尿素氮、肌酐与血清mindin进行相关分析，血清mindin与尿微量白蛋白呈正相关（r=0.788，P＜0.05）；血清mindin与血清胱抑素C呈正相关（r=0.887，P＜0.05）；血清mindin与肌酐呈正相关（r=0.512，P＜0.05）；血清mindin与尿素氮呈正相关（r=0.715，P＜0.05）；糖化血红蛋白与尿微量白蛋白（r=0.241）、肌酐（r=0.201）、尿素氮（r=0.286）存在正相关性（P＜0.05）；而糖化血红蛋白与血清mindin（r=0.112）及血清胱抑素C（r=0.199）无明显相关性。

3 讨论

目前糖尿病肾病的诊断多采用尿液检测为主，但是由于尿液收集不方便，且容易受多种因素（如放置时间过长、尿液留置方式不对等）的影响而导致影响检测结果。探索简单、准确的糖尿病肾病早期诊断方法，为糖尿病患者临床诊疗提供依据，具有极其重要的意义。

足突细胞是构成肾小球滤过屏障外层的终末分化上皮细胞，在维持肾小球滤过屏障的完整性和防止蛋白尿的出现方面很重要[3]。M Murakoshi等[4]的研究证实了mindin主要在肾脏的足突细胞上表达，由损伤的足突细胞合成，并且证明了mindin的表达早于蛋白/肌酐比，说明mindin是足突细胞损伤的早期生物学标志，也是糖尿病肾损伤的实时指示器[4]。

mindin在细胞外基质蛋白中是启动先天免疫反应的一个重要的模式识别分子[5]，而自身免疫反应机制可能是糖尿病肾病发生和进展的重要因素[6]。在糖尿病肾病患者中，自身免疫损伤与高血糖、基底膜非酶促糖化是进行性加重的[7]。

另外，有研究[8]发现人类mindin可介导整合素的结合。同时，整合素也参与了足突细胞的损伤，是足突细胞损伤的一个关键分子。足突细胞主要通过α3β1整合素以及α-/β-蛋白聚糖固定在基底膜[9]，而且α3β1整合素则主要是通过足突细胞整合表达。而mindin的功能是作为病原微生物和整合素配体聚集炎症细胞的模式识别分子[10]，因此，mindin作为足突细胞损伤的标志，在糖尿病肾病的发生发展中很重要，并且可以成为糖尿病肾病的新型标记物。

尿微量白蛋白的出现提示糖尿病肾脏疾病的早期损坏及全身内皮的广泛损伤，是目前诊断糖尿病肾病的较敏感而且可靠的指标[11]。本实验通过相关分析证实，尿微量白蛋白与血清mindin存在相关性，呈正相关，随着24 h尿微量白蛋白的升高，血清mindin也升高，每组血清mindin含量差异具有统计学意义（P＜0.05），且消除年龄、性别等差异后，仍具有统计学意义，说明血清mindin可能反映糖尿病肾病早期的损害，并且可能与糖尿病肾病的进展有关。

综上所述，血清mindin可能早期反映糖尿病患者的肾损伤，并可能在早期诊断、病情观察等方面有很好的应用价值。

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Objective To evaluate the signif i cance of serum mindin in the diagnosis of early diabetic nephropathy. Methods 96 patients with type 2 diabetes mullitus were devided to A group (n=48, normoalbuminuria, urinary albumin<30mg/24h), B group (n=25, microalbuminuria, 30mg≤24h urinary albumin<300mg), C group (n=23, macroalbuminuria, urinary albumin≥300mg/24h), and N group (n=20,normal control group) were enrolled. The glycated hemoglobin, creatinine, cystainC, urinary albumin were measured by conventional methods. The levels of serum mindin were measured by using ELISA kits. The statisical analysis were made with the SPSS17.0 software. Results The level of serum mindin in the healthy physical individuals were signif i cantly lower than in the patients of all 3 groups. Serum mindin in the patients of C group were signif i cantly higher than in other 2 group. The level of serum mindin in petients with normoalbuminuria, microalbuminuria, macroalbuminuria and normal controls were (162.87±17.29) pg/mL, (347.19±16.01) pg/mL, (453.65±20.86) pg/mL, (89.87±10.2) pg/mL. The level of serum mindin were positively correlated with 24 h-urinary albumin (r=0.788, P<0.05), cystatin C (r=0.887, P<0.05), Urea nitrogen (r=0.715, P<0.05), creatinine (r=0.512, P<0.05). The level of serum mindin were no correlated with HbAlc (r=0.112, P>0.05). Conclusion This study indicates that serum mindin might be closely ralated to diabetic nephropathy and participate in the progress of diabetic nephropathy. Serum mindin may probably ref l ect the early course of renal injury and be associated with renal function.

Mindin; Type 2 diabetes mellitus; Diabetic nephropathy

10.3969/j.issn.1009-4393.2016.20.001

贵州 563003 贵州省遵义市第一人民医院内分泌科 （赵倩陈袁 徐台林 蓝雅琳）