165 例新生儿溶血三项试验结果分析

覃彬

165 例新生儿溶血三项试验结果分析

覃彬

目的：了解我院新生儿溶血病（HDN）的婴儿血型抗体分布频率，探讨HDN血清学检测结果与新生儿出生时间的关系。方法：对我院2015年165例临床怀疑ABO血型不合引起的HDN标本进行溶血三项试验。结果：血清学诊断为新生儿溶血病标本67例，占送检标本的40.6%（67/165），67例在检出的HDN中抗体分布频率分别为：抗-A抗体为46.3%（31/67），抗-B抗体为53.7%（36/67），出生后0-2d组检出率为45.9%（62/135），出生后3-4d组检出率为1.5%（2/135），出生后5-6d组检出率为2.2%（3/135），出生后大于6d组检出率为0.0%（0/135）。结论：我院ABO-HDN抗体分布特征为抗A抗体﹤抗B抗体。HDN在出生后0-2d检出率最高，随着时间的延长检出率逐渐降低，6d以上患儿检出率为0。

新生儿；溶血三项试验；分析

新生儿溶血病（hemolytic disease newborn,HDN）是由于母婴血型不合，母体产生与胎儿红细胞血型抗原相应的抗体，经胎盘进入胎儿血循环作用于胎儿（新生儿），引起的同种免疫性溶血，临床表现为不同程度黄疸、贫血、水肿、肝脾肿大，严重者可有核黄疸，甚至死亡[1]。现将我院2015年165例新生儿溶血三项试验结果分析如下:

1 资料与方法

1.1 资料

2015年在我院出生的母亲血型为O型疑似为ABO-HDN的新生儿血样165例,其中男93例,女72例,差异无统计学意义(P﹥0.05)；A型血患儿76例，B型血患儿89例,差异无统计学意义(P﹥0.05)；所有患儿均在出生后)2h-14d内出现黄疸,所有患儿均有肉眼黄疸。血标本用乙二胺四乙酸2钾抗凝管采集，每管血量2-5毫升。

1.2 仪器和试剂

血型血清学专用离心机；博研TD-A离心机；奥森多半自动孵育器，数显电热恒温水浴箱；抗球蛋白卡，购自长春博迅生物技术有限公司；ABO标准红细胞，购自上海血液生物医药有限公司。

1.3 方法

取患儿血标本以3500r/min离心3min分离其血浆后进行直抗试验、游离试验和放散试验。直抗试验：在1个抗球蛋白卡反应孔中加入患儿1%红细胞悬液50μl,后用博研TD-A离心机5分钟后判定结果。游离试验：在3个抗球蛋白卡反应孔中分别加入标准A,B,O红细胞各50μl，再加入患儿血清50μl，置孵育器37℃孵育15min,后用博研TD-A离心机5分钟后判定结果。放散试验：将四洗后的患儿压积红细胞1ml加入等量生理盐水后置于试管中，放入56℃水浴震摇1min,加热9min，取出后在3000r/min的离心机上离心1min取上清液；在抗球蛋白卡中分别加入标准A,B,O红细胞各50μl+放散液50μl，置于孵育器中在37℃孵育15min，后用博研TD-A离心机5分钟后判定结果，结果判定标准如表Ⅰ。所有试验均依照《全国临床检验操作规程》操作进行。

表1 新生儿溶血三项试验结果判定

2 结果

血清学诊断为新生儿溶血病标本67例，67例在检出的HDN中抗体分布频率分别为：抗-A抗体为46.3%（31/67），抗-B抗体为53.7%（36/67），出生后0-2d组检出率为45.9%（62/135），出生后3-4d组检出率为13.3%（2/15），出生后5-6d组检出率为50.0%（3/6），出生后大于6d组检出率为0.0%（0/9），见表Ⅱ。

表2 67例新生儿溶血三项试验阳性结果血型分布情况

表3 67例新生儿溶血三项试验阳性结果年龄分布情况

3 讨论

ABO新生儿溶血病是指由于母婴血型不合，即母亲为O型，婴儿为A或者B型，母亲体内IgG类血型抗体通过胎盘进入胎儿体内，胎儿的红细胞被母亲的同种抗体所包围，此抗体可以和胎儿红细胞上内源性的抗原相结合，最终导致红细胞在分娩前后加速破坏造成胎儿发生溶血。

从表Ⅱ可以看出，本文分对165例新生儿进行血清游离抗体试验、红细胞抗体释放试验、直接抗人球蛋白试验三项试验,结果显示,新生儿血型A、B两组不同血型的新生儿血清学三项试验检出阳性率比较无显著差异；其中以红细胞抗体释放试验的阳性检出率最高,其次是血清游离抗体试验,明显高直接抗人球蛋白试验,提示由于母婴血型不合引起新生儿发生ABO溶血的不同血型检测结果间并无明显的分布规律,以A型的新生儿发生率稍低于B型[2,3]。

从表Ⅲ可以看出，本次试验发现HDN的检出率与患儿出生时间有很大关系，即患儿出生时间越短，检测阳性率越高，以出生后0～2d组的检测阳性率为最高。这是因为在发病24h内抽样检测，新生儿血液中还有较多的游离IgG血型抗体及致敏红细胞存在。随着发病时间的延长，新生儿血液中只有少量的游离IgG血型抗体及致敏红细胞存在，而大部分IgG血型抗体以抗原抗体复合物的形式存在，失去了反应原性，导致检出率降低[4]。

放散试验敏感度高、特异性强，是判定HDN的最有力的证据。本文检测结果显示，患儿游离试验，放散试验是早期诊断ABO-HDN的最有效方法[5]。直接抗人球蛋白试验可能由于致敏胎儿红细胞的IgG抗体数量较少，特别在出生后较长时间，而抗原抗体亲和力弱，洗涤过程中抗体被洗脱（主要是ABO血型系统），使得反应强度较弱。所以其检出阳性率低于放散试验和游离试验。

以上分析显示，溶血三项检测在新生儿溶血病诊断中具有重要意义，其中以放散试验难度较大，实验中应注意放散时的温度、放散液的量、离心转速和时间等[6,7]。母婴血型不合引起新生儿ABO溶血的血型分布无明显规律性,因此,早期对母亲血进行ABO溶血的筛查有积极的意义,在血学清三项试验中,放散试验、直接抗人球蛋白试验应用性较广,出结果相对较快,操作简便,能够为临床早期筛查并防治新生儿ABO溶血提供及时、可靠的依据。

（作者单位：柳州市工人医院输血科）

[1]张红删，李文益.新生儿溶血病的诊断和治疗[J].中国小儿血液与肿瘤杂志，2009，14(6):246-248

[2]李烛,杨晓亚,李振奇,等.母婴血型不合新生儿溶血病免疫血液学检测进展[J].华北国防医药,2010;22(3):240-243

[3]林蔚,戴伟良,肖平.105例新生儿ABO溶血病血清学检测结果分析[J].中国现代医生,2008;46(26):115-116

[4]詹影影.ABO血型系统诊断新生儿溶血病的实验研究[J].中国卫生检验杂志，2010,20(6):1421-1422

[5]黄瑞英.新生儿溶血病实验室检测研究进展[J].医学理论与实践.2011,24（12）：1411-1414

[6]刘达庄.免疫血液学［M］.上海：上海科学技术出版社.2002.224-225

[7]安万新.输血技术学［M］.北京：北京科学技术文献出版社.2006.91-101

覃彬（1982～），男，壮族，2005年在柳州市工人医院输血科工作至今，主管技师，研究生班毕业，学士学位。