Gadd45α、NF-κB在胃癌中表达情况及其相关性研究*

冯水土，陈毅德，陈玉强，高应勤，范鑫

[1.福建省厦门市海沧医院肿瘤内科，福建厦门361026；2.厦门大学附属成功医院（解放军一七四医院）肿瘤治疗中心，福建厦门361004]



Gadd45α、NF-κB在胃癌中表达情况及其相关性研究*

冯水土1，陈毅德1，陈玉强2，高应勤1，范鑫1

[1.福建省厦门市海沧医院肿瘤内科，福建厦门361026；2.厦门大学附属成功医院（解放军一七四医院）肿瘤治疗中心，福建厦门361004]

摘要：目的通过分析Gadd45α、NF-κB在不同幽门螺杆菌（HP）感染状态胃癌中的差异表达来探讨两者表达的相关性及其对胃癌发生的意义。方法随机选取本院70例胃癌石蜡标本及56例相应癌旁正常组织标本来检测Gadd45α、NF-κB蛋白的表达情况；分析Gadd45α蛋白与NF-κB在胃癌中表达的相关性。结果NF-κB在HP+胃癌、HP-胃癌、HP+癌旁组织中的阳性表达率分别为82.5%、53.33%和26.32%，Gadd45α蛋白在HP+胃癌、HP-胃癌、HP+癌旁组织中的阳性表达率分别为77.5%、46.67%和34.21%，经过χ2检验比较阳性表达的差异有统计学意义（P<0.05）。Gadd45α与NF-κB在胃癌中表达呈正相关（P<0.05）。结论NF-κB、Gadd45α蛋白在胃癌组织中高表达，且Gadd45α与NF-κB蛋白两者在胃癌中的表达呈正相关。

关键词：胃癌；Gadd45α；NF-κB；幽门螺杆菌；表达

胃癌是一种常见的消化道恶性肿瘤，原发性胃癌主要是由幽门螺杆菌（helicobacter pylori，HP）感染诱发的，而我国属HP高感染国家；HP侵染宿主胃部后，能引起宿主细胞调控出现紊乱，激活多条信号通路，其中一条较为重要的是NF-κB信号通路，该通路的异常激活使细胞内多种细胞因子的表达发生改变，从而影响细胞的生物学行为，最终导致胃癌的形成[1-3]。许多研究[3-5]提示，NF-κB、HP表达与胃癌TNM分期、病理组织分化程度及预后之间的关系密切；Gadd45α是DNA损伤修复的重要蛋白，可以被NF-κB介导的泛素化蛋白酶降解。NF-κB和Gadd45α是否与胃癌的形成以及HP感染状态之间存在相互关系的研究罕有报道。本文选择将Gadd45α蛋白和NF-κB蛋白、HP因素综合起来进行初步研究，报道如下。

1　材料与方法

1.1一般资料

选取2008～2012年既往研究[5]中厦门市海沧医院胃癌根治手术切除的大体标本术后保存在病理科的石蜡标本70例，所有标本都经病理证实为胃癌。同时还选择了56例相应的癌旁组织石蜡标本作对照。入组标本的临床资料情况见表1。本研究获得单位伦理委员会的批准及受试者签署的知情同意。

表1　入组标本的临床资料比较

1.2方法

采用类似既往研究[6]使用的免疫组织化学Max Vision二步法检测胃癌组织及癌旁组织中Gadd45α蛋白表达情况；Gadd45α蛋白表达以胞浆或胞核中出现棕色反应为阳性，结果参照文献[7]及既往研究[6]评分方法，选5个高倍视野计算阳性细胞数，以阳性细胞<5%记为0分；25%≥阳性数>5% 为1分；50%≥阳性数>25%为2分；阳性数>50% 为3分。着色强度计分，与阴性对照同等颜色为0分，弱着色（淡棕黄色）为1分，强着色（明显棕黄色）为2分。阳性分级：以上2项相加，0～2分为（-）；3～5分为（+）；由两位病理科主治医生采用双盲法观察切片，判断蛋白的表达结果。

1.3统计学方法

采用SPSS 17.0统计软件进行数据分析，所获得的实验数据进行χ2检验或者Spearman秩相关分析，P<0.05为差异有统计学意义。

2　结果

2.1NF-κB、Gadd45α蛋白在不同HP感染状态的胃癌及癌旁组织中的表达差异情况比较

在HP+胃癌、HP-胃癌、HP+癌旁组织、HP-癌旁组织中NF-κB蛋白的阳性表达率分别为82.50%、53.33%、26.32%和27.78%，Gadd45α蛋白的阳性表达率分别为77.50%、46.67%、34.21%和22.22%；经过χ2检验，在HP+组与HP-组胃癌中NF-KB、Gadd45α蛋白阳性的表达比较，差异有统计学意义（χ2=6.944、24.867，P<0.05），在HP+组胃癌与癌旁中NF-KB、Gadd45α蛋白阳性的表达差异有统计学意义（χ2=7.099、14.852，P<0.05），在HP-胃癌及其癌旁组织中NF-KB、Gadd45α蛋白阳性表达差异无统计学意义（χ2=2.99、2.87，P>0.05），见表2和图1、2。

表2　NF-κB、Gadd45α蛋白在不同HP感染状态的胃癌及癌旁组织中的阳性表达差异　例（%）

2.2NF-κB，Gadd45α蛋白在胃癌及癌旁组织的阳性表达

NF-κB蛋白在胃癌和癌旁组织中的阳性表达率分别为70.00%和26.79%（χ2=23.246，P <0.05）；Gadd45α蛋白的阳性表达率分别为64.29%和30.36%（χ2=12.611，P<0.05），经过χ2检验，两者比较差异有统计学意义，提示NF-κB、Gadd45α蛋白在胃癌组织中高表达，在癌旁组织中低表达。见表3。

2.3胃癌组织NF-κB与Gadd45α蛋白表达的相关性

结合既往的研究[6]进行分析，在胃癌组织中NF-κB与Gadd45α均为阳性的表达率为51.43% （36/70），均为阴性的表达率为17.14%（12/70），而NF-κB（+）/Gadd45α（-）表达率为18.57%（13/70），NF-κB（-）/Gadd45α（+）表达率为12.86%（9/70），经Spearman秩相关分析，该组试验中胃癌组织NF-κB与Gadd45α蛋白的表达呈正相关（r s= 0.29，P<0.05），两组比较差异有统计学意义，见表4。

图1　NF-κB在胃癌组织及癌旁正常组织中的阳性表达（×400）

图2　Gadd45α在胃癌及癌旁组织中的阳性表达（×400）

表3　NF-κB、Gadd45α蛋白在胃癌及癌旁组织中的阳性表达情况

表4　NF-κB，Gadd45α蛋白在胃癌组织中表达情况的相关性检验　例

3　讨论

研究表明[3-4]，NF-κB在HP+胃炎转化为胃癌的过程中起到了重要作用。而Gadd45α基因是以P53基因为核心的调控体系中的重要一员[8-11]，是NF-κB下游的一个重要靶基因，Gadd45α的诱导表达受到多层次的调控[9，12-14]。正是这种多重的诱导表达机制决定Gadd45α具有多样化的功能，它与许多肿瘤的发生、发展关系密切，其发挥功能的机制考虑可能与Gadd45α基因异常甲基化及表达有关[8-11，14-20]。

本文通过免疫组织化学法检测随机选取的70例胃癌石蜡标本及56例相应癌旁正常组织标本中NF-κB、Gadd45α的表达情况，并与不同HP感染状态的胃癌组织中的表达情况及其相互关系进行统计分析。实验结果发现，NF-κB、Gadd45α蛋白在胃癌组织中的阳性表达率较高的情况（表达阳性率分别为70.00%和64.29%），在HP感染型胃癌中的阳性表达率更高（表达阳性率分别为82.50%和77.50%），统计学分析提示差异有统计学意义；同时结合既往的研究[5]进一步分析，结果提示Gadd45α表达水平与NF-κB呈正相关。但Gadd45α与NF-κB的正相关系数rs仅为分别为0.29，提示了胃癌发生、发展过程极其复杂，除NF-κB外还有很多分子参与Gadd45α的调节、影响其表达水平。这有待在以后的试验中进行进一步胃癌细胞学及基因学的进一步研究，需要有更多的相关研究加入到胃癌的研究中。上述研究结果提示，胃癌的产生可能与其细胞内NF-κB、Gadd45α的活化和过表达有关，对其表达水平的检测有益于胃癌的早期诊断及其预后的早期预测，以两者为靶点的治疗可能是对胃癌（特别是HP+胃癌）另辟的一条治疗途径。

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（张蕾编辑）

论著

Differential expression and correlation of Gadd45α and NF-κB in human gastric cancer*

Shui-tu Feng1, Yi-de Chen1, Yu-qiang Chen2, Ying-qin Gao1, Xin Fan1
[1.Department of Medical Oncology, Xiamen Haicang Hospital, Xiamen, Fujian 361026, China;
2. Clinical Center of Tumor Therapy, Chenggong Hospital (the 174th Hospital of PLA), Xiamen University, Xiamen, Fujian 361004, China]

Abstract:Objective To explore the differential expression level of Gadd45α and NF-κB in human gastric cancer with Helicobacter Pylori (HP) infection status, and to explore a way to clinical diagnosis and treatment for gastric cancer. Methods A total of 70 paraffin-emeded samples of gastric cancer and 56 normal tissues from surgical resected tissues were selected randomly. We analyzed the correlation between the expression of Gadd45α protein and NF-κB in gastric carcinoma. Results The positive rates of expression of NF-κB protein in HP+ gastric carcinoma tissues, HP-gastric carcinoma tissues and HP+ adjacent non-neoplastic tissues were 82.5%, 53.33% and 26.32% respectively. The positive rates of expression of Gadd45α protein in HP+ gastric carcinoma tissues, HP-gastric carcinoma tissues and HP+ adjacent non-neoplastic tissues were 77.5%, 46.67% and 34.21% respectively. The difference of the expression levels was significant (P < 0.05 ). The expression of Gadd45α protein in gastric carcinoma samples was positively correlated with NF-κB (P < 0.05 ). Conclusions The levels of Gadd45α and NF-κB protein expression are up-regulated in HP+ gastric carcinoma sample. The expression of Gadd45α and NF-κB in gastric carcinoma is positively correlated.

Keywords:gastric cancer; Gadd45α; NF-κB; Helicobacter Pylori; expression

[通信作者]陈玉强，Tel：13358389899，E-mail：chenyq707@163.com

*基金项目：厦门市海沧区科技计划项目（No：350205z20144010-05）；南京军区医学科技创新课题（No：10MA068）；福建省自然科学基金资助项目（No：2010D013）；厦门市科技计划创新项目（No：3502z20104014）

收稿日期：2015-09-14

文章编号：1005-8982（2016）08-0033-05

DOI:10.3969/j.issn.1005-8982.2016.08.007

中图分类号：R735.2

文献标识码：A